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桑树PCS基因功能及桑树转基因技术研究

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桑树PCS基因功能及桑树转基因技术研究
论文目录
 
摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
第一章 文献综述第16-26页
  1.1 重金属危害及污染现状第16-17页
    1.1.1 重金属及其危害性第16页
    1.1.2 污染来源及现状第16-17页
  1.2 土壤重金属污染治理修复第17-18页
    1.2.1 传统修复第17页
    1.2.2 生物修复第17-18页
  1.3 植物螯合肽第18-23页
    1.3.1 PCs的作用第19-20页
    1.3.2 PCs生物合成与解毒机理第20-21页
    1.3.3 植物螯合肽合成酶(PCS)第21-23页
  1.4 桑树重金属耐受性及研究动态第23-24页
  1.5 植物转基因技术第24页
  1.6 桑树转基因技术研究现状第24-26页
第二章 引言第26-30页
  2.1 研究背景及意义第26-27页
  2.2 主要研究内容第27-28页
  2.3 技术路线第28-30页
第三章 川桑PCS基因生物信息学分析第30-42页
  3.1 材料与试剂第30-32页
    3.1.1 材料第30页
    3.1.2 基因序列信息的获得第30页
    3.1.3 主要信息学分析软件第30页
    3.1.4 主要试剂及溶液的配制方法第30-32页
    3.1.5 主要仪器第32页
  3.2 方法第32-36页
    3.2.1 川桑PCS基因的鉴定第32-33页
    3.2.2 RNA的提取及质量检测第33页
    3.2.3 cDNA第一链合成第33页
    3.2.4 川桑PCS基因的克隆第33-36页
    3.2.5 PCS基因的对序列比对及系统发生分析第36页
  3.3 结果与分析第36-40页
    3.3.1 川桑PCS基因的鉴定预测第36-37页
    3.3.2 桑树植物螯合肽合成酶基因在川桑不同组织的表达分析第37-38页
    3.3.3 桑树植物螯合肽合成酶基因的克隆及信息学分析第38-40页
  3.4 小结与讨论第40-42页
第四章 桑树PCS基因胁迫诱导表达分析第42-50页
  4.1 材料与主要试剂仪器第42-43页
    4.1.1 材料第42页
    4.1.2 实验方法第42页
    4.1.3 主要试剂第42-43页
    4.1.4 主要仪器第43页
  4.2 实验方法第43-45页
    4.2.1 RNA的提取及质量检测第43页
    4.2.2 cDNA第一链的合成第43-44页
    4.2.3 荧光定量PCR(qRT-PCR)第44页
    4.2.4 qRT-PCR第44页
    4.2.5 结果计算第44-45页
  4.3 结果与分析第45-48页
    4.3.1 MaPCS1第45-46页
    4.3.2 MaPCS2第46-48页
  4.4 小结与讨论第48-50页
第五章 桑树植物螯合肽合成酶基因的遗传转化及功能研究第50-82页
  5.1 实验材料与主要试剂第50-57页
    5.1.1 实验材料第50页
    5.1.2 主要试剂及溶液配制方法第50-56页
      5.1.2.1 主要试剂第50-56页
    5.1.3 主要仪器第56-57页
  5.2 实验方法第57-65页
    5.2.1 转基因过表达载体的构建第57-59页
    5.2.2 农杆菌感受态细胞的制备与转化第59-60页
    5.2.3 农杆菌的检测及甘油菌农杆菌的制备第60页
    5.2.4 拟南芥的种植及转化第60-61页
    5.2.5 烟草叶盘转化法第61-62页
    5.2.6 转基因阳性植株的分子鉴定第62-64页
    5.2.7 桑树植物螯合肽合成酶基因的功能研究第64-65页
  5.3 结果与分析第65-80页
    5.3.1 桑树植物螯合肽合成酶基因的转基因载体构建第65-66页
    5.3.2 桑树植物螯合肽合成酶基因在拟南芥中的过表达第66-70页
    5.3.3 桑树植物螯合肽合成酶基因在烟草中的过表达第70-73页
    5.3.4 转基因植株中基因的功能研究第73-80页
  5.4 小结与讨论第80-82页
第六章 桑树转基因技术第82-96页
  6.1 实验材料与试剂第82-85页
    6.1.1 实验材料第82页
    6.1.2 主要试剂及溶液配制方法第82-84页
    6.1.3 主要仪器第84-85页
  6.2 实验方法第85-90页
    6.2.1 桑树注射转化第85页
    6.2.2 桑树套袋、人工授粉及种子的收集第85-86页
    6.2.3 桑树种子的种植与筛选第86页
    6.2.4 基因组PCR检测第86-87页
    6.2.5 转基因桑树的qRT-PCR检测第87页
    6.2.6 Southern blotting检测第87-90页
  6.3 结果与分析第90-94页
    6.3.1 桑树冬芽注射统计第90-91页
    6.3.2 阳性个体筛选及分子鉴定第91-92页
    6.3.3 T2代桑树幼苗阳性鉴定第92-94页
    6.3.4 阳性植株分子鉴定第94页
  6.4 小结与讨论第94-96页
第七章 综合与讨论第96-100页
参考文献第100-108页
附录第108-110页
在读期间发表论文及参加课题第110-112页
致谢第112-113页

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