论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
缩略语索引 | 第15-16页 |
第一章 绪论 | 第16-22页 |
1.1 增强子 | 第16页 |
1.2 增强子的作用机制 | 第16-17页 |
1.3 原核增强子样序列在原核生物中的表达调控 | 第17-19页 |
1.3.1 病毒基因组的原核增强子样序列 | 第18页 |
1.3.2 原核生物基因组的原核增强子样序列 | 第18-19页 |
1.4 增强子样序列筛选研究 | 第19页 |
1.5 增强子样序列目前的应用 | 第19-20页 |
1.6 本论文研究的目的及意义 | 第20-22页 |
第二章 增强子样序列检测载体构建 | 第22-40页 |
2.1 材料和方法 | 第22-31页 |
2.1.1 材料 | 第22-27页 |
2.1.2 方法 | 第27-31页 |
2.2 结果 | 第31-38页 |
2.2.1 重组亚克隆载体的鉴定 | 第31-33页 |
2.2.2 L11(Nde Ⅰ/BamH Ⅰ)基因的扩增 | 第33页 |
2.2.3 重组L11-CAT-pET21a载体的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
2.2.4 重组L1-CAT-pET21a载体的酶切鉴定 | 第34-35页 |
2.2.5 检测菌株氯霉素抗性 | 第35-36页 |
2.2.6 检测菌株融合报告基因表达 | 第36-38页 |
2.3 讨论 | 第38-39页 |
2.3.1 引物设计 | 第38页 |
2.3.2 融合报告基因的设计思路 | 第38-39页 |
2.4 小结 | 第39-40页 |
第三章 增强子样序列筛选及其序列分析 | 第40-74页 |
3.1 材料和方法 | 第40-49页 |
3.1.1 材料 | 第40-43页 |
3.1.2 方法 | 第43-49页 |
3.2 结果 | 第49-70页 |
3.2.1 检测载体的酶切和去磷酸化 | 第49-51页 |
3.2.2 基因组酶切 | 第51-53页 |
3.2.3 基因文库的构建 | 第53页 |
3.2.4 含增强子样序列的菌株筛选 | 第53-59页 |
3.2.5 增强子样序列分析 | 第59-65页 |
3.2.6 ER1和ER2增强Lll基因蛋白表达检测 | 第65-66页 |
3.2.7 重组载体ER1-L11-pET21a和ER2-L11-pET21a酶切鉴定 | 第66-67页 |
3.2.8 检测含增强子样序列ER1和ER2的重组菌诱导L11蛋白表达 | 第67-70页 |
3.3 讨论 | 第70-73页 |
3.3.1 增强子样序列菌株的筛选分析 | 第70页 |
3.3.2 融合报告基因的表达分析 | 第70-72页 |
3.3.3 增强子样序列测定与同源性检索分析 | 第72页 |
3.3.4 增强子样序列的TFs结合位点及其TFs预测 | 第72-73页 |
3.4 小结 | 第73-74页 |
第四章 增强子样序列的功能区域研究 | 第74-94页 |
4.1 材料和方法 | 第74-77页 |
4.1.1 材料 | 第74-75页 |
4.1.2 方法 | 第75-77页 |
4.2 结果 | 第77-91页 |
4.2.1 增强子样序列ER1缺失突变体载体构建 | 第77-83页 |
4.2.2 增强子样序列突变菌株L11蛋白表达 | 第83-88页 |
4.2.3 增强子样序列功能区域的微生物转录因子及其结合位点 | 第88-91页 |
4.3 讨论 | 第91-93页 |
4.3.1 增强子样序列的功能活性区域 | 第91页 |
4.3.2 增强子样序列转录因子及其结合位点 | 第91-93页 |
4.4 小结 | 第93-94页 |
第五章 全文总结 | 第94-95页 |
第六章 展望 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-101页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文及参与项目目录 | 第101页 |