论文目录 | |
中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1.1 细胞骨架 | 第9-12页 |
1.1.1 微丝简介 | 第9-10页 |
1.1.2 微管简介 | 第10-11页 |
1.1.3 微丝和微管的“cross-talk”及相关蛋白简介 | 第11-12页 |
1.2 植物中的kinesin超家族以及kinesin-14 家族的介绍 | 第12-19页 |
1.2.1 植物中的kinesin超家族简介 | 第12-13页 |
1.2.2 植物中的kinesin的功能简介 | 第13-14页 |
1.2.3 植物中的kinesin-14 亚家族概述 | 第14-15页 |
1.2.4 拟南芥中的kinesin简介 | 第15-17页 |
1.2.5 植物中特有的含有调宁蛋白同源结构域(CH)的kinesin(KCH)概述 | 第17页 |
1.2.6 植物特有的KCH家族的生理功能 | 第17-19页 |
1.3 胁迫与细胞骨架的联系 | 第19-21页 |
1.4 本课题研究的目的意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-29页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 菌株及质粒载体 | 第22页 |
2.1.2 酶、试剂与药品 | 第22页 |
2.1.3 仪器与设备 | 第22页 |
2.1.4 植物材料 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-29页 |
2.2.1 拟南芥RNA的提取 | 第23页 |
2.2.2 反转录聚合酶链反应 | 第23页 |
2.2.3 聚合酶链反应(PCR) | 第23页 |
2.2.4 CTAB法提取拟南芥基因组 | 第23-24页 |
2.2.5 目的基因片段产物的回收和纯化 | 第24页 |
2.2.6 目的基因片段连T载体 | 第24页 |
2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
2.2.8 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第25页 |
2.2.9 大肠杆菌质粒的提取 | 第25页 |
2.2.10 重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
2.2.11 农杆菌感受态细胞的制备和外源基因转化 | 第26页 |
2.2.12 重组蛋白的诱导与纯化 | 第26-27页 |
2.2.13 肌动蛋白纯化 | 第27-28页 |
2.2.14 肌动蛋白的聚合 | 第28页 |
2.2.15 高低速共沉淀实验 | 第28-29页 |
第三章 结果与讨论 | 第29-62页 |
3.1 At KCH3、At KCH4、At KCH5的结构预测和分析 | 第29页 |
3.2 At KCH3、At KCH4、At KCH5的生理功能分析 | 第29-55页 |
3.2.1 At KCH3、At KCH4、At KCH5的亚细胞定位 | 第29-30页 |
3.2.2 T-DNA插入突变体中基因表达转录水平上的分析 | 第30-31页 |
3.2.3 T-DNA插入突变体生理功能的研究 | 第31-43页 |
3.2.4 kch3×kch4双突变体生理功能的研究 | 第43-52页 |
3.2.5 At KCH3、At KCH4双缺失对植物胚胎发育的影响 | 第52-55页 |
3.3 At KCH3、At KCH4、At KCH5体外生化功能的研究 | 第55-59页 |
3.3.1 KCHs CH domain的原核表达载体构建 | 第55页 |
3.3.2 KCHs CH domain蛋白的预诱导和纯化 | 第55-56页 |
3.3.3 At KCH3、At KCH4、At KCH5 CH domain能在体外结合微丝 | 第56-57页 |
3.3.4 At KCH3,At KCH4 CH domain能在体外促进微丝成束 | 第57-59页 |
3.4 讨论 | 第59-62页 |
3.4.1 拟南芥KCH3、KCH4、KCH5基因表达的分析 | 第59-60页 |
3.4.2 拟南芥At KCH3、At KCH4、At KCH5在拟南芥生长发育过程中的作用 | 第60-61页 |
3.4.3 拟南芥KCH3-CH、KCH4-CH、KCH5-CH在体外的生化功能 | 第61-62页 |
第四章 结论与展望 | 第62-64页 |
4.1 结论 | 第62页 |
4.2 展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69页 |