论文目录 | |
| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-39页 |
| 1. 转基因对虾研究概况 | 第20-21页 |
| 2. 对虾转基因技术面临的困难 | 第21-22页 |
| 3. 假型病毒载体的研究概况 | 第22-24页 |
| 4. 对虾白斑综合症病毒(WSSV)的研究概况 | 第24-29页 |
| 4.1 WSSV的基因组 | 第25-26页 |
| 4.2 WSSV主要的结构蛋白 | 第26-29页 |
| 5. 非病毒载体入核机制的研究进展 | 第29-33页 |
| 5.1 非分裂细胞中载体入核的方式 | 第30-32页 |
| 5.2 提高载体在非分裂细胞中入核效率的方法 | 第32-33页 |
| 6. MICRORNA的研究进展 | 第33-37页 |
| 6.1 microRNA的基本概况 | 第33-34页 |
| 6.2 microRNAs的生物合成过程(图1-3) | 第34-36页 |
| 6.3 利用计算机进行microRNA生物信息学预测的研究概况 | 第36-37页 |
| 6.4 对虾microRNA的研究进展 | 第37页 |
| 7. 论文立题依据、研究内容和意义 | 第37-39页 |
| 第二章 嗜对虾细胞逆转录病毒基因转移系统的构建 | 第39-103页 |
| 1. 前言 | 第39-40页 |
| 2. 材料和方法 | 第40-75页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-75页 |
| 3. 实验结果 | 第75-99页 |
| 3.1 vp19、vp28以及eGFP基因的克隆 | 第75-78页 |
| 3.2 刀额新对虾和日本囊对虾TCTP基因启动区的克隆 | 第78页 |
| 3.3 真核表达载体pcDNA-VP19和pcDNA-VP28的构建及测序验证 | 第78-80页 |
| 3.4 六种病毒表达载体的构建以及测序验证 | 第80-81页 |
| 3.5 vp19、vp28以及TCTP基因启动区序列的生物信息学分析 | 第81-84页 |
| 3.6 囊膜蛋白VP19和VP28在包装细胞Plat-GP中的细胞膜定位 | 第84-90页 |
| 3.7 六种逆转录病毒表达载体在包装细胞Plat-GP中的表达 | 第90-91页 |
| 3.8 六种逆转录病毒表达载体在对虾类淋巴原代培养细胞中的表达 | 第91-96页 |
| 3.9 逆转录病毒感染对虾原代培养细胞 | 第96-99页 |
| 4. 讨论 | 第99-103页 |
| 第三章 对虾WSSV早期基因IE1启动区和SV40增强子序列在对虾原代细胞中的活性研究 | 第103-156页 |
| 1. 前言 | 第103-104页 |
| 2. 材料和方法 | 第104-122页 |
| 2.1 实验材料 | 第104-106页 |
| 2.2 实验方法 | 第106-122页 |
| 3. 结果与讨论 | 第122-154页 |
| 3.1 ie1启动区和eGFP基因片段的扩增 | 第122-124页 |
| 3.2 pcDNA-P_(cmv)-P_(ie1-2000)-eGFP和pcDNA-ΔP_(cmv)-P_(ie1-2000)-eGFP的构建及测序验证 | 第124-128页 |
| 3.3 三种绿色荧光报告载体在Plat-GP、Neuro2A和FG细胞中的表达 | 第128-132页 |
| 3.4 pcDNA-P_(cmv)-mCherry、pcDNA-P_(cmv)-P_(ie1-504)-mCherry、pcDNA-P_(cmv)-mCherry-SV40和pcDNA-P_(cmv)-P_(ie1-504)-mCherry-SV40的构建及测序验证 | 第132-140页 |
| 3.5 四种红色荧光报告载体在Plat-GP、Neuro2A和FG细胞中的表达 | 第140-143页 |
| 3.6 七种真核表达载体在对虾类淋巴组织原代培养细胞中的表达 | 第143-151页 |
| 3.7 ie1启动子和SV40增强子的活性的Image定量分析 | 第151-154页 |
| 4. 小结与讨论 | 第154-156页 |
| 第四章 基于对虾早期胚胎转录组序列的MICRORNA挖掘与分析 | 第156-178页 |
| 1. 前言 | 第156-157页 |
| 2. 材料和方法 | 第157-165页 |
| 2.1 实验材料 | 第157-158页 |
| 2.2 实验方法 | 第158-165页 |
| 3. 结果与讨论 | 第165-177页 |
| 3.1 转录组测序以及de novo组装结果 | 第165页 |
| 3.2 转录组水平上对虾早期胚胎miRNA的预测 | 第165-168页 |
| 3.3 保守性分析 | 第168-170页 |
| 3.4 对虾miRNAs的验证以及表达 | 第170-172页 |
| 3.5 对虾miRNAs的靶基因预测 | 第172-173页 |
| 3.6 所预测的靶基因的GO与KEGG分析 | 第173-174页 |
| 3.7 发育和免疫相关的靶基因的表达模式 | 第174-177页 |
| 4. 小结 | 第177-178页 |
| 总结 | 第178-181页 |
| 参考文献 | 第181-190页 |
| 附录 | 第190-197页 |
| 致谢 | 第197-198页 |
| 个人简历 | 第198页 |
