论文目录 | |
摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
1.1 植物的抗病性 | 第13-15页 |
1.1.1 植物对病原菌入侵的两种防御机制:PTI和ETI | 第13-14页 |
1.1.2 植物对病原真菌的侵入前抗性和侵入后抗性 | 第14-15页 |
1.2 植物对病原菌的防御反应 | 第15-16页 |
1.2.1 植物的细胞壁、胼胝质与抗性 | 第15页 |
1.2.2 植物的HR反应、ROS积累、几丁质与抗性 | 第15-16页 |
1.2.3 水杨酸信号与抗病性 | 第16页 |
1.3 拟南芥中的R基因 | 第16-18页 |
1.3.1 拟南芥抗病基因研究概况 | 第16-17页 |
1.3.2 RPW8的结构和抗性特点 | 第17页 |
1.3.3 RPW8的最新研究进展 | 第17-18页 |
1.4 膜联蛋白及其作用 | 第18-19页 |
1.5 论文选题依据及研究意义 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 质粒载体 | 第20页 |
2.1.2 突变体及相关亲本材料 | 第20页 |
2.1.3 工程菌和病原菌 | 第20页 |
2.1.4 抗生素 | 第20-21页 |
2.1.5 酶和试剂 | 第21-22页 |
2.1.6 培养基 | 第22页 |
2.1.7 主要的实验器材 | 第22-23页 |
2.1.8 试剂盒 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-33页 |
2.2.1 突变体的筛选、分离群体的构建与基因作图克隆 | 第23页 |
2.2.2 载体的构建 | 第23-26页 |
2.2.3 大肠杆菌和农杆菌感受态的制备 | 第26页 |
2.2.4 大肠杆菌和农杆菌的电击转化 | 第26-27页 |
2.2.5 拟南芥的培养与遗传转化 | 第27页 |
2.2.6 总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.7 Real-time PCR分析 | 第28-29页 |
2.2.8 基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.9 活性氧爆发测定 | 第30页 |
2.2.10 Trypan Blue染色步骤 | 第30-31页 |
2.2.11 H_2O_2的DAB染色 | 第31页 |
2.2.12 白粉菌侵染后的胼胝质染色 | 第31页 |
2.2.13 细菌生长实验 | 第31-33页 |
第三章 结果与分析 | 第33-52页 |
3.1 突变相关基因的图位克隆与互补实验 | 第33-39页 |
3.1.1 b7-6群体中的突变基因定位为AT5G12380 | 第33-35页 |
3.1.2 互补实验证明ANNEXIN8~(280A→G)引起b7-6细胞死亡增强 | 第35-36页 |
3.1.3 ANN8的RNAi分析 | 第36-38页 |
3.1.4 ann8-1单突变体的获得 | 第38-39页 |
3.2 ann8-1,ann8-1/R1Y4的抗病性及抗性反应研究 | 第39-46页 |
3.2.1 ann8-1增强了RPW8.1介导的抗病性 | 第39-42页 |
3.2.2 ann8-1增强了RPW8.1介导的抗性反应 | 第42-46页 |
3.3 ann8-1增强RPW8.1的抗病性及抗性反应的分子机理 | 第46-52页 |
3.3.1 ann8-1增强了RPW8.1的转录水平 | 第46-47页 |
3.3.2 ann8-1增强了R1Y4中PR1和FRK1基因受白粉菌诱导表达的程度 | 第47页 |
3.3.3 ANN8在Annexin蛋白家族中特异的表达模式 | 第47-52页 |
第四章 讨论与结论 | 第52-54页 |
4.1 ANN8负调控RPW8.1的抗病性和抗病反应 | 第52-53页 |
4.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61-67页 |
附表1. 用于基因定位的分子标记 | 第61-64页 |
附表2. 引物 | 第64-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68页 |