论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 细胞凋亡关键蛋白FADD的组织分布分析 | 第10-21页 |
绪论 | 第10-11页 |
1.1 材料与方法 | 第11-15页 |
1.1.1 材料 | 第11-12页 |
1.1.2 方法 | 第12-15页 |
1.2 结果与讨论 | 第15-19页 |
1.2.1 FADD蛋白相关的序列比对分析及小鼠FADD的UniGene EST Profile统计 | 第15-16页 |
1.2.2 mRNA水平各主要组织中FADD基因的表达 | 第16-17页 |
1.2.3 蛋白水平各主要组织中FADD蛋白的表达 | 第17页 |
1.2.4 各组织FADD表达的相对丰度比较 | 第17-19页 |
1.3 本节小结 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-21页 |
第二章 探讨FADD通过miR-7a和hnRNPK调控细胞迁移 | 第21-83页 |
绪论 | 第21-23页 |
第一节 FADD调控FAK的表达 | 第23-41页 |
1.1 材料与方法 | 第23-34页 |
1.1.1 材料 | 第23-25页 |
1.1.2 方法 | 第25-34页 |
1.2 结果与讨论 | 第34-40页 |
1.2.1 过表达FADD促进FAK表达上调 | 第34-35页 |
1.2.2 部分干扰FADD使FAK表达下调 | 第35-37页 |
1.2.3 完全敲除FADD使FAK表达进一步下调 | 第37-38页 |
1.2.4 过磷酸化FADD使FAK表达上调 | 第38-39页 |
1.2.5 FAK干扰后FADD表达基本没有变化 | 第39-40页 |
1.3 本节小结 | 第40-41页 |
第二节 FADD敲除后差异表达的miRNA筛选及鉴定 | 第41-49页 |
2.1 材料与方法 | 第41-44页 |
2.1.1 材料 | 第41页 |
2.1.2 方法 | 第41-44页 |
2.2 结果与讨论 | 第44-48页 |
2.2.1 通过microarray筛选FADD敲除后表达变化的miRNA | 第44-45页 |
2.2.2 miR-7a,miR-19b,let-7b,let-7c在FADD敲除后表达变化的qPCR验证 | 第45页 |
2.2.3 miR-7a,miR-19b,let-7b,let-7c在FADD部分干扰后表达水平的qPCR检测 | 第45-46页 |
2.2.4 FADD过表达后miR-7a,miR-19b,let-7b,let-7c表达水平的qPCR检测 | 第46-47页 |
2.2.5 FADD过磷酸化细胞中miR-7a,miR-19b,let-7b,let-7c表达水平qPCR检测 | 第47-48页 |
2.3 本节小结 | 第48-49页 |
第三节 FADD敲除后差异表达的蛋白筛选及鉴定 | 第49-60页 |
3.1 材料与方法 | 第49-56页 |
3.1.1 材料 | 第49页 |
3.1.2 方法 | 第49-56页 |
3.3 结果与讨论 | 第56-59页 |
3.3.1 通过microarray筛选FADD敲除后表达变化的蛋白 | 第56-57页 |
3.3.2 FADD敲除细胞中hnRNPK在mRNA表达水平的qPCR验证 | 第57页 |
3.3.3 FADD部分干扰后hnRNPK在mRNA表达水平的qPCR检测 | 第57-58页 |
3.3.4 FADD过表达后hnRNPK在mRNA表达水平的qPCR检测 | 第58-59页 |
3.3.5 FADD过磷酸化细胞中hnRNPK在mRNA表达水平的qPCR检测 | 第59页 |
3.4 本节小结 | 第59-60页 |
第四节 miR-7a与FAK相关的功能研究 | 第60-72页 |
4.1 材料与方法 | 第60-69页 |
4.1.1 材料 | 第60-61页 |
4.1.2 方法 | 第61-69页 |
4.2 结果与讨论 | 第69-71页 |
4.2.1 miR-7a抑制FAK的表达 | 第69页 |
4.2.2 miR-7a能够靶向FAK的3'UTR | 第69-70页 |
4.2.3 miR-7a通过与FAK-3'UTR的749-755位结合来抑制FAK的表达 | 第70-71页 |
4.3 本节小结 | 第71-72页 |
第五节 探讨不同FADD水平下的细胞迁移及其通过miR-7a和hnRNPK调控细胞迁移的可能作用模式 | 第72-79页 |
5.1 材料与方法 | 第72-75页 |
5.1.1 材料 | 第72页 |
5.1.2 方法 | 第72-75页 |
5.2 结果与讨论 | 第75-78页 |
5.2.1 FADD过表达促进MMP-2和MMP-9在mRNA水平表达上调 | 第75-76页 |
5.2.2 FADD部分干扰使MMP-2和MMP-9在mRNA水平表达下调 | 第76-77页 |
5.2.3 FADD完全敲除使MMP-2在mRNA水平表达下调,而MMP-9相反 | 第77页 |
5.2.4 FADD过磷酸化细胞中MMP-2和MMP-9在mRNA水平表达上调 | 第77-78页 |
5.2.5 FADD通过miR-7a和hnRNPK调控的可能作用模式 | 第78页 |
5.3 本节小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
致谢 | 第83-84页 |