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乙酰乳酸脱羧酶体外重组表达与酶学性质分析
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乙酰乳酸脱羧酶体外重组表达与酶学性质分析
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
引言第10-11页
1 文献综述第11-20页
　　1.1 ALDC概述第11-12页
　　1.2 ALDC的活性调节第12页
　　1.3 ALDC的结构研究第12-14页
　　1.4 ALDC的催化机制研究第14-15页
　　1.5 ALDC基因的重组表达与理化性质研究第15-16页
　　　　1.5.1 ALDC基因克隆与表达第15页
　　　　1.5.2 ALDC的理化性质第15-16页
　　1.6 ALDC的应用第16-19页
　　　　1.6.1 啤酒发酵工业第16-17页
　　　　1.6.2 合成单一手性化合物第17-19页
　　1.7 本论文的选题依据与研究内容第19-20页
2 ALDC基因重组表达与纯化第20-40页
　　2.1 引言第20页
　　2.2 实验材料第20-23页
　　　　2.2.1 实验仪器第20-21页
　　　　2.2.2 主要实验材料第21-22页
　　　　2.2.3 主要溶液配制第22-23页
　　2.3 实验方法第23-30页
　　　　2.3.1 ALDC基因的克隆第23-25页
　　　　2.3.2 重组大肠杆菌的构建第25-27页
　　　　2.3.3 重组基因pET-21b-ALDC的表达第27-28页
　　　　2.3.4 IPTG诱导条件的优化第28-29页
　　　　2.3.5 ALDC分离纯化第29页
　　　　2.3.6 重组表达ALDC含量的测定第29-30页
　　2.4 实验结果与讨论第30-39页
　　　　2.4.1 ALDC基因克隆第30-31页
　　　　2.4.2 构建大肠杆菌重组菌体第31-33页
　　　　2.4.3 SDS-PAGE检测重组基因pET-21b-ALDC表达第33-34页
　　　　2.4.4 IPTG诱导时间与使用浓度第34-35页
　　　　2.4.5 ALDC分离纯化第35-38页
　　　　2.4.6 ALDC纯化倍数及回收率第38-39页
　　2.5 小结第39-40页
3 ALDC生物信息学分析第40-49页
　　3.1 引言第40页
　　3.2 生物信息学软件及网络服务器第40页
　　3.3 分析方法第40-42页
　　　　3.3.1 ALDC氨基酸序列比对与系统发育树构建第40-41页
　　　　3.3.2 ALDC三维结构模拟第41页
　　　　3.3.3 ALDC与底物分子对接第41-42页
　　3.4 分析结果与讨论第42-48页
　　　　3.4.1 氨基酸序列相似性比对第42页
　　　　3.4.2 构建系统发育树第42-43页
　　　　3.4.3 ALDC的同源模建第43-45页
　　　　3.4.4 分子对接第45-48页
　　3.5 小结第48-49页
4 ALDC酶学性质分析第49-60页
　　4.1 引言第49页
　　4.2 实验材料第49-50页
　　　　4.2.1 实验仪器第49页
　　　　4.2.2 主要试剂第49页
　　　　4.2.3 主要溶液配制第49-50页
　　4.3 实验方法第50-52页
　　　　4.3.1 外消旋α-乙酰乳酸为底物测定ALDC酶活性第50-51页
　　　　4.3.2 pH对ALDC活性影响的测定第51页
　　　　4.3.3 金属离子对ALDC活性影响的测定第51页
　　　　4.3.4 酶反应动力学常数的测定第51-52页
　　4.4 实验结果与讨论第52-59页
　　　　4.4.1 ALDC的酶活性第52-56页
　　　　4.4.2 ALDC的最适pH第56页
　　　　4.4.3 金属离子对ALDC活性的影响第56-58页
　　　　4.4.4 Km及Kcat测定结果分析第58-59页
　　4.5 小结第59-60页
结论与展望第60-61页
参考文献第61-66页
附录A 缩略语表及名称说明第66-67页
附录B-Ⅰ pMD19-T质粒谱图第67页
附录B-Ⅱ pET-21b质粒谱图第67-68页
附录C 测序结果第68-70页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第70-71页
致谢第71-72页

本篇论文共72页，点击这进入下载页面。
 
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