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β-葡萄糖醛酸苷酶催化选择性定向调控研究

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β-葡萄糖醛酸苷酶催化选择性定向调控研究
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 绪论第11-22页
  1.1 化学修饰对酶选择性影响的研究现状第11-12页
  1.2 固定化对酶选择性影响的研究现状第12-18页
    1.2.1 物理包埋法第13页
    1.2.2 物理吸附法第13-14页
    1.2.3 共价结合法第14页
    1.2.4 交联法第14-15页
    1.2.5 固定化方法的改进第15-18页
  1.3 非水相介质的使用对酶选择性影响的研究现状第18-19页
  1.4 β-葡萄糖醛酸苷酶催化选择性研究进展第19-20页
  1.5 课题研究思路与主要内容第20-21页
  1.6 技术路线第21-22页
第二章 材料与方法第22-31页
  2.1 实验材料第22-25页
    2.1.1 菌株第22页
    2.1.2 培养基第22页
    2.1.3 药品和试剂第22-23页
    2.1.4 实验仪器第23-24页
    2.1.5 常用溶液配制第24页
    2.1.6 常用储备液第24-25页
  2.2 实验方法第25-31页
    2.2.1 PGUS-E的诱导表达第25页
    2.2.2 PGUS-E细胞破碎第25页
    2.2.3 蛋白质浓度测定第25-26页
    2.2.4 PGUS-E的分离纯化第26页
    2.2.5 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳第26-27页
    2.2.6 PGUS-E的化学修饰第27-28页
    2.2.7 铁磁性纳米粒子固定化PGUS-E第28-29页
    2.2.8 有机溶剂脱水第29页
    2.2.9 不同水含量两相体系第29页
    2.2.10 酶活力计算第29-30页
    2.2.11 薄层分析(TLC)第30页
    2.2.12 HPLC定量分析PGUS-E的选择率第30-31页
第三章 化学修饰对PGUS-E选择性的影响第31-49页
  3.1 引言第31页
  3.2 PGUS-E的制备第31-32页
  3.3 PGUS-E的酶学性质研究第32-34页
    3.3.1 最适温度的测定第32-33页
    3.3.2 最适pH的测定第33-34页
  3.4 PGUS-E反应条件优化第34-36页
    3.4.1 最适温度的测定第34-35页
    3.4.2 最适pH的测定第35-36页
  3.5 修饰剂的选择第36-39页
    3.5.1 聚乙二醇衍生物(mPEG)第36-37页
    3.5.2 小分子修饰PGUS-E第37-39页
  3.6 DTNB修饰PGUS-E条件优化第39-43页
    3.6.1 不同浓度的DTNB修饰PGUS-E对酶活和选择率的影响。第39-41页
    3.6.2 不同修饰时间对酶活性和选择率的影响第41-43页
  3.7 DTNB修饰后酶学性质的研究第43-45页
    3.7.1 最适温度的测定第43-44页
    3.7.2 最适pH的测定第44-45页
  3.8 DTNB修饰后反应条件的优化第45-47页
    3.8.1 最适温度的测定第45-46页
    3.8.2 最适pH的测定第46-47页
  3.9 PGUS-E-D催化GL反应进程曲线第47-48页
  3.10 小结第48-49页
第四章 铁磁性纳米粒子固定化对PGUS-E选择性的影响第49-60页
  4.1 引言第49页
  4.2 磁性纳米粒子固定化条件优化第49-53页
    4.2.1 酶量与载体的不同比例对固定化酶活的影响第49-50页
    4.2.2 固定化时间对酶活的影响第50-51页
    4.2.3 固定化温度对酶活的影响第51-52页
    4.2.4 固定化pH对酶活的影响第52-53页
  4.3 固定化后酶学性质的研究第53-55页
    4.3.1 最适温度的测定第53-54页
    4.3.2 最适pH的测定第54-55页
  4.4 固定化后酶反应条件的优化第55-58页
    4.4.1 最适温度的测定第55-56页
    4.4.2 最适pH的测定第56-57页
    4.4.3 对GAMG的选择率第57-58页
  4.5 PGUS-E-DFe催化GL反应进程曲线第58-59页
  4.6 小结第59-60页
第五章 非水相介质对PGUS-E选择性的影响第60-68页
  5.1 引言第60页
  5.2 有机介质单相体系第60-61页
  5.3 两相体系第61-62页
    5.3.1 不同含水量两相体系中的酶活第61页
    5.3.2 含水量为 70%两相体系中酶的选择性第61-62页
  5.4 两相体系酶学性质研究第62-64页
    5.4.1 温度对酶活的影响第62-63页
    5.4.2 pH对酶活的影响第63-64页
  5.5 两相体系反应条件优化第64-66页
    5.5.1 温度对酶活的影响第64-65页
    5.5.2 pH对酶活的影响第65-66页
  5.6 两相体系催化GL反应进程曲线第66-67页
  5.7 小结第67-68页
第六章 结论与展望第68-70页
  6.1 结论第68-69页
  6.2 展望第69-70页
参考文献第70-74页
致谢第74页

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