论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 课题背景及意义 | 第9-10页 |
| 1.2 课题相关知识及国内外进展 | 第10-14页 |
| 1.2.1 micro RNA相关研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.2 内含子mi RNA相关研究 | 第11页 |
| 1.2.3 mi R-1904及其宿主基因Pde4d相关研究 | 第11-14页 |
| 1.3 本课题研究内容 | 第14-16页 |
| 1.3.1 本课题的主要研究内容 | 第14页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第14-16页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第16-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第16页 |
| 2.1.2 主要实验试剂及仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.2.1 实时定量PCR | 第17页 |
| 2.2.2 原位杂交 | 第17-18页 |
| 2.2.3 免疫组化 | 第18页 |
| 2.2.4 mi R-1904过表达载体的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.5 mi R-1904慢病毒载体包装 | 第19页 |
| 2.2.6 疑似靶基因 3'UTR载体的构建及双荧光素酶报告基因检测 | 第19-20页 |
| 2.2.7 mi R-1904慢病毒载体处理小鼠 | 第20页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第20-21页 |
| 第3章 mi R-1904在小鼠胚胎中的表达谱 | 第21-34页 |
| 3.1 mi R-1904的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 3.2 小鼠胚胎的获取及胚胎重量统计 | 第22-23页 |
| 3.3 E11.5 天胚胎全胚原位杂交分析 | 第23-24页 |
| 3.4 E12.5 天胚胎切片原位杂交分析 | 第24-27页 |
| 3.5 E15.5 天胚胎切片原位杂交分析 | 第27-32页 |
| 3.5.1 脑部等神经组织原位杂交实验结果分析 | 第29-30页 |
| 3.5.2 主要脏器原位杂交实验结果分析 | 第30-31页 |
| 3.5.3 其他组织原位杂交实验结果分析 | 第31-32页 |
| 3.6 本章小结 | 第32-34页 |
| 第4章 mi R-1904慢病毒载体活体实验结果分析 | 第34-62页 |
| 4.1 mi R-1904慢病毒载体的制备 | 第34-36页 |
| 4.1.1 mi R-1904慢病毒载体制备的技术路线 | 第34-35页 |
| 4.1.2 慢病毒包装质粒共转效率观察 | 第35页 |
| 4.1.3 慢病毒载体滴度测定 | 第35-36页 |
| 4.2 尾静脉注射mi R-1904慢病毒载体及孕鼠检测结果 | 第36-44页 |
| 4.2.1 小鼠分组及生长状况观察 | 第36-37页 |
| 4.2.2 各实验组孕鼠饮食量及体重观测结果分析 | 第37-38页 |
| 4.2.3 各实验组孕鼠脏器系数结果分析 | 第38-39页 |
| 4.2.4 各实验组孕鼠器官组织形态观察 | 第39-44页 |
| 4.3 子代胚胎的获取及胚胎形态观察 | 第44-53页 |
| 4.3.1 子代胚胎表型统计结果 | 第44-45页 |
| 4.3.2 子代胚胎、胎盘重量分析及整体形态观察 | 第45-48页 |
| 4.3.3 子代胚胎组织器官形态观察 | 第48-53页 |
| 4.4 子代胚胎中相关基因的表达分析 | 第53-58页 |
| 4.4.1 各实验组子代胚胎中mi R-1904表达水平分析及模型确定 | 第53-55页 |
| 4.4.2 mi R-1904与Pde4d靶向关系预测及初步验证 | 第55-56页 |
| 4.4.3 活体实验子代胚胎肺脏和肾脏中Pde4d的表达水平分析 | 第56-57页 |
| 4.4.4 活体实验子代胚胎肺脏和肾脏免疫组化实验结果分析 | 第57-58页 |
| 4.5 对子代胚胎发育异常可能因素的探讨及研究展望 | 第58-59页 |
| 4.6 本章小结 | 第59-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
