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两种节肢动物纤溶蛋白酶基因克隆与表达
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两种节肢动物纤溶蛋白酶基因克隆与表达
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-11页
Catalogue第11-15页
缩写字母索引第15-16页
第一章 绪论第16-26页
　　1.1 概述第16页
　　1.2 丝氨酸蛋白酶家族的介绍第16-17页
　　1.3 血栓的形成和溶解机制第17-18页
　　　　1.3.1 血栓的形成机制第17-18页
　　　　1.3.2 血栓的溶解机制第18页
　　1.4 溶栓药物的发展和研究现状第18-19页
　　1.5 纤溶酶的基因克隆表达研究第19-20页
　　1.6 蛋白质结构与功能的关系第20-22页
　　　　1.6.1 蛋白质的结构第20-21页
　　　　1.6.2 蛋白质结构与功能的关系第21页
　　　　1.6.3 蛋白质结构与功能的预测第21-22页
　　1.7 蝎子与黄粉虫的研究现状第22-23页
　　　　1.7.1 蝎子的研究现状第22-23页
　　　　1.7.2 黄粉虫的研究现状第23页
　　1.8 本论文研究的意义及主要研究内容第23-26页
　　　　1.8.1 研究意义第23-24页
　　　　1.8.2 研究内容第24-26页
第二章 东亚钳蝎总RNA的提取和cDNA第一链的合成第26-30页
　　2.1 实验材料第26-27页
　　　　2.1.1 主要实验材料和试剂第26页
　　　　2.1.2 主要仪器第26-27页
　　　　2.1.3 常用试剂的配方第27页
　　2.2 实验方法第27-29页
　　　　2.2.1 实验材料及仪器的处理第27页
　　　　2.2.2 东亚钳蝎的总RNA的提取第27-28页
　　　　2.2.3 RNA的检测第28页
　　　　2.2.4 cDNA第一链的合成第28-29页
　　2.3 结果与分析第29页
　　2.4 本章小结第29-30页
第三章 蝎子纤溶酶cDNA全长的克隆第30-52页
　　3.1 实验材料第30-32页
　　　　3.1.1 主要实验材料和试剂第30页
　　　　3.1.2 主要仪器第30-31页
　　　　3.1.3 常用试剂的配方第31-32页
　　3.2 试验方法第32-41页
　　　　3.2.1 蝎子纤溶酶保守序列基因片段的克隆第32-33页
　　　　3.2.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第33-34页
　　　　3.2.3 DNA片段的转化和阳性克隆的验证第34-35页
　　　　3.2.4 3 ’-RACE法扩增蝎子纤溶酶基因3’端的cDNA片段第35-37页
　　　　3.2.5 5 ’-RACE法扩增蝎子纤溶酶基因5’端的cDNA片段第37-40页
　　　　3.2.6 蝎子纤溶酶基因全长克隆第40-41页
　　　　3.2.7 序列分析及三维结构的构建第41页
　　3.3 结果与分析第41-46页
　　　　3.3.1 蝎子纤溶酶基因保守片段的克隆第41-43页
　　　　3.3.2 蝎子纤溶酶基因的3’-RACE扩增片段第43-44页
　　　　3.3.3 蝎了纤溶酶基因的5’-RACE扩增片段第44-45页
　　　　3.3.4 蝎子纤溶酶全长基因的拼接与克隆第45-46页
　　3.4 氨基酸序列的生物学分析和空间结构的构造第46-51页
　　　　3.4.1 蝎子纤溶酶结构的一些信息第46-48页
　　　　3.4.2 同源性比对第48-50页
　　　　3.4.3 蝎子纤溶酶三维空间结构的构建第50-51页
　　3.5 本章小结第51-52页
第四章 黄粉虫纤溶酶的原核表达第52-68页
　　4.1 实验材料和仪器第52-54页
　　　　4.1.1 试剂第52-53页
　　　　4.1.2 所用仪器第53页
　　　　4.1.3 试剂配方第53-54页
　　4.2 实验方法第54-62页
　　　　4.2.1 表达系统的选择和载体的设计第54-56页
　　　　4.2.2 纤溶酶基因目的片段的制备第56-57页
　　　　4.2.3 原核表达载体的构建与转化第57-59页
　　　　4.2.4 目的蛋白的诱导表达第59-60页
　　　　4.2.5 最佳表达条件下蛋白表达情况的研究第60页
　　　　4.2.6 SDS-PAGE检测蛋白的表达情况第60-62页
　　4.3 结果与分析第62-67页
　　　　4.3.1 PCR扩增目的DNA片段的电泳结果第62页
　　　　4.3.2 表达载体的双酶切验证第62-63页
　　　　4.3.3 重组载体的表达结果分析第63-66页
　　　　4.3.4 最佳表达条件下蛋白表达情况的研究第66-67页
　　4.4 本章小结第67-68页
第五章 表达蛋白的分离纯化和活性检测第68-79页
　　5.1 材料与仪器第68-70页
　　　　5.1.1 实验材料第68页
　　　　5.1.2 主要仪器第68页
　　　　5.1.3 实验中所用的试剂的配制第68-70页
　　5.2 实验方法第70-74页
　　　　5.2.1 可溶性目的蛋白的分离纯化第70-71页
　　　　5.2.2 包涵体的复性与纯化第71-73页
　　　　5.2.3 纤维平板法测定酶的活性第73-74页
　　　　5.2.4 黄粉虫纤溶酶的三维结构预测第74页
　　5.3 结果与分析第74-77页
　　　　5.3.1 可溶性蛋白的分离纯化第74-75页
　　　　5.3.2 包涵体的复性与纯化第75-76页
　　　　5.3.3 黄粉虫纤溶酶三维结构的模拟与分析第76-77页
　　5.4 本章小结第77-79页
结论第79-81页
参考文献第81-87页
攻读学位期间发表的论文第87-89页
致谢第89页

本篇论文共89页，点击这进入下载页面。
 
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