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沙冬青原生质体分离与蛋白质亚细胞定位分析技术的建立

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沙冬青原生质体分离与蛋白质亚细胞定位分析技术的建立
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-14页
  1.1 植物原生质体分离研究概况第9-12页
    1.1.1 原生质体的特点和应用第9页
    1.1.2 原生质体的分离与纯化及其影响因素第9-11页
    1.1.3 原生质体产量与活力的测定第11-12页
  1.2 植物蛋白质亚细胞定位分析方法第12-13页
    1.2.1 报告基因第12页
    1.2.2 转化受体材料第12页
    1.2.3 转化方法第12-13页
  1.3 本研究的目的和意义第13-14页
2 实验材料与方法第14-21页
  2.1 实验材料与试剂第14页
  2.2 所用引物第14页
  2.3 实验方法第14-21页
    2.3.1 缓冲液及主要试剂的配制第14-15页
    2.3.2 沙冬青原生质体分离与纯化第15-16页
    2.3.3 沙冬青原生质体产量与活力检测第16页
    2.3.4 蛋白亚细胞定位预测第16-17页
    2.3.5 植物瞬时表达载体的构建第17-18页
    2.3.6 重组表达载体质粒DNA的提取第18-19页
    2.3.7 质粒DNA导入拟南芥原生质体与荧光显微观察第19页
    2.3.8 质粒DNA导入沙冬青原生质体与荧光显微观察第19-21页
3 结果与分析第21-31页
  3.1 蒙古沙冬青原生质体分离与转化技术的建立第21-24页
    3.1.1 酶解液中不同酶类浓度的确定第21页
    3.1.2 酶解液中渗透压稳定剂浓度的确定第21-22页
    3.1.3 酶解时间的确定第22-23页
    3.1.4 离心速度的选择第23页
    3.1.5 原生质体活力的检测第23-24页
  3.2 蒙古沙冬青抗逆相关基因植物瞬时表达载体的构建第24-28页
    3.2.1 目的基因片段的PCR扩增与测序验证第24-26页
    3.2.2 目的基因片段与瞬时表达载体的连接与鉴定第26-28页
  3.3 AmDREB1F、AmDREB2和AmCAT蛋白的亚细胞定位分析第28-31页
    3.3.1 三种蛋白亚细胞定位的生物信息学预测第28页
    3.3.2 利用拟南芥原生质体进行蛋白亚细胞定位分析第28-29页
    3.3.3 利用蒙古沙冬青原生质体进行蛋白亚细胞定位分析第29-31页
4 讨论第31-33页
5 结论第33-34页
致谢第34-35页
参考文献第35-39页
作者简介第39页

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