论文目录 | |
摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
1 文献综述 | 第8-18页 |
1.1 葡萄糖基转移酶(GLCNACASES)的研究概况 | 第8-10页 |
1.1.1 葡萄糖基转移酶的结构与特异性 | 第8-9页 |
1.1.2 葡萄糖基转移酶的作用机制 | 第9-10页 |
1.2 葡萄糖基转移酶的分类及其性质 | 第10-14页 |
1.2.1 按照不同的糖基化作用机制 | 第11页 |
1.2.2 按照不同的蛋白质结构的三维折叠模式 | 第11-12页 |
1.2.3 按照不同酶的分子构特征特征以及底物特异性 | 第12-14页 |
1.3 葡萄糖基转移酶的生物分布及生物学功能 | 第14-18页 |
1.3.1 微生物中Glc NAcases酶的生物学研究 | 第14页 |
1.3.2 植物中Glc NAcases酶的生物学研究 | 第14页 |
1.3.3 哺乳动物中Glc NAcases酶的生物学研究 | 第14-15页 |
1.3.4 昆虫中Glc NAcases酶的生物学研究 | 第15页 |
1.3.5 家蚕中 Bm Glc NAcases 的生物学研究 | 第15-18页 |
2 引言 | 第18-21页 |
2.1 研究目的及意义 | 第18页 |
2.2 主要研究内容 | 第18-20页 |
2.2.1 Bm Glc NAcase A基因c DNA的克隆及生物信息学分析 | 第18页 |
2.2.2 Bm Glc NAcase A基因在不同组织的表达分析 | 第18页 |
2.2.3 Bm Glc NAcase A基因的在各种病原微生物处理后的表达分析 | 第18-19页 |
2.2.4 Bm Glc NAcase A基因的原核表达和多抗制备 | 第19-20页 |
2.3 主要技术路线 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-34页 |
3.1 实验材料 | 第21页 |
3.2 仪器与试剂 | 第21-24页 |
3.2.1 主要实验仪器 | 第21页 |
3.2.2 主要生化试剂 | 第21-22页 |
3.2.3 常用溶液的配置 | 第22-24页 |
3.3 实验方法 | 第24-34页 |
3.3.1 Bm Glc NAcase A基因c DNA的克隆 | 第24-28页 |
3.3.2 Bm Glc NAcase A基因的原核表达 | 第28-34页 |
4 结果与分析 | 第34-46页 |
4.1 家蚕脂肪体总RNA的提取检测 | 第34页 |
4.2 BMGLCNACASEA基因CDNA的克隆 | 第34-35页 |
4.3 BMGLCNACASEA基因的生物信息学分析 | 第35-37页 |
4.4 BMGLCNACASEA基因的表达模式分析 | 第37-38页 |
4.4.1 Bm Glc NAcase A基因在家蚕不同组织中的表达水平 | 第37-38页 |
4.4.2 表皮中Bm Glc NAcase A在不同时期的表达变化 | 第38页 |
4.5 BMGLCNACASEA基因在家蚕中组织的表达分布情况分析 | 第38-39页 |
4.6 不同微生物刺激后BMGLCNACASEA基因的表达情况分析 | 第39-40页 |
4.7 BmGlcNAcaseA基因的原核表达 | 第40-41页 |
4.7.1 Bm Glc NAcase A基因的开放阅读框(ORF)的序列扩增 | 第40-41页 |
4.7.2 Bm Glc NAcase A重组表达载体的鉴定 | 第41页 |
4.8 重组PET-28A-BMGLCNACASEA蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
4.9 WESTERN BLOT检测PET-28A-BMGLCNACASEA蛋白表达 | 第42-43页 |
4.10 重组蛋白的定量与纯化 | 第43-44页 |
4.11 ELISA效价测定 | 第44页 |
4.12 WESTERN BOLT检测BMGLCNACASEA在组织中的分布 | 第44-46页 |
5 讨论 | 第46-48页 |
1. BMGLCNACASEA基因蛋白载体的选择与重组蛋白诱导表达 | 第46页 |
2. BMGLCNACASEA在家蚕中的组织分布 | 第46页 |
3. BmGlcNAcaseA 基因在家蚕生长发育期间发挥重要作用 | 第46-47页 |
4. BmGlcNAcaseA 基因在家蚕中的免疫刺激反应 | 第47-48页 |
6 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55页 |