论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 食物过敏反应 | 第11-12页 |
| 1.1.1 食物过敏反应的途径 | 第11-12页 |
| 1.1.2 引起食物过敏的主要食物 | 第12页 |
| 1.1.3 食物过敏防治措施 | 第12页 |
| 1.2 大豆中主要过敏原的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 β-伴大豆球蛋白及β亚基的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.2 大豆中其他主要过敏原的研究进展 | 第14页 |
| 1.3 B细胞抗原表位的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.3.1 B细胞表位的预测方法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 B细胞表位的鉴定方法 | 第16-18页 |
| 1.4 不同处理方法对大豆过敏原表位的影响 | 第18-20页 |
| 1.4.1 超高压处理法 | 第18-19页 |
| 1.4.2 热加工处理法 | 第19页 |
| 1.4.3 酶解法 | 第19页 |
| 1.4.4 化学法及基因工程法 | 第19-20页 |
| 1.5 本课题的研究意义与主要内容 | 第20-22页 |
| 第二章 β-伴大豆球蛋白多克隆抗体的制备及纯化前后免疫学特性鉴定 | 第22-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 试验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 试验溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 β-伴大豆球蛋白的分离纯化及分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2 动物免疫 | 第25页 |
| 2.2.3 正辛酸-硫酸铵沉淀法 | 第25-26页 |
| 2.2.4 抗血清效价的测定 | 第26页 |
| 2.2.5 抗体浓度与纯度测定 | 第26-27页 |
| 2.2.6 抗血清敏感性测定 | 第27页 |
| 2.2.7 抗血清特异性测定 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.3.1 β-伴大豆球蛋白凝胶电泳分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 间接ELISA法分析抗体效价 | 第28-29页 |
| 2.3.3 抗体浓度和纯度分析 | 第29页 |
| 2.3.4 纯化前后敏感性分析 | 第29-30页 |
| 2.3.5 纯化前后特异性分析 | 第30-31页 |
| 2.4 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 β-conglycininβ亚基的抗原表位分析及重组噬菌体鉴定 | 第32-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1 试验试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.2 试验仪器 | 第33页 |
| 3.1.3 β亚基基因及氨基酸序列 | 第33-34页 |
| 3.1.4 β亚基三级结构预测软件 | 第34页 |
| 3.1.5 β亚基B细胞构象表位预测软件 | 第34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-41页 |
| 3.2.1 β亚基三级结构构建 | 第34-35页 |
| 3.2.2 β亚基构象表位预测 | 第35页 |
| 3.2.3 引物设计 | 第35页 |
| 3.2.4 基因的克隆 | 第35-38页 |
| 3.2.5 β亚基及分段片段的噬菌体包装 | 第38页 |
| 3.2.6 噬菌体包装 | 第38-39页 |
| 3.2.7 重组噬菌体滴度测定 | 第39页 |
| 3.2.8 重组噬菌体的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.9 重组噬菌体的扩大培养及纯化 | 第40页 |
| 3.2.10 重组噬菌体的ELISA鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-46页 |
| 3.3.1 β亚基三级结构构建 | 第41页 |
| 3.3.2 β亚基B细胞构象表位的预测 | 第41-42页 |
| 3.3.3 基因的分段克隆及重组质粒构建 | 第42-44页 |
| 3.3.4 噬菌体包装及重组噬菌体的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 噬菌体的ELISA鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 超高压破坏β-conglycininβ亚基抗原表位的定位 | 第47-65页 |
| 4.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 试验试剂 | 第47页 |
| 4.1.2 试验溶液配制 | 第47-48页 |
| 4.2 试验方法 | 第48-52页 |
| 4.2.1 加工破坏抗原表位抗体的制备 | 第48页 |
| 4.2.2 重组噬菌体的构建及ELISA鉴定 | 第48-50页 |
| 4.2.3 加工破坏抗原表位的定位 | 第50页 |
| 4.2.4 多肽的设计合成及Dot-blot鉴定 | 第50-52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-64页 |
| 4.3.1 超高压破坏β亚基及分片段抗原位点的ELISA鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3.2 C片段蛋白质空间结构分析 | 第53页 |
| 4.3.3 C片段及分段载体的构建及鉴定 | 第53-55页 |
| 4.3.4 C片段及分段重组噬菌体的PCR鉴定 | 第55-56页 |
| 4.3.5 超高压破坏C片段及分片段抗原位点的ELISA鉴定 | 第56-57页 |
| 4.3.6 C2片段蛋白质空间结构分析 | 第57页 |
| 4.3.7 C2片段及分段载体的构建及鉴定 | 第57-59页 |
| 4.3.8 C2片段及分段重组噬菌体的PCR鉴定 | 第59-60页 |
| 4.3.9 超高压破坏C2片段及分片段抗原位点的ELISA鉴定 | 第60页 |
| 4.3.10 C2-3片段蛋白质空间结构分析 | 第60-61页 |
| 4.3.11 合成多肽的鉴定 | 第61-63页 |
| 4.3.12 偶联多肽的鉴定 | 第63页 |
| 4.3.13 重组噬菌体及偶联多肽的Dot-blot鉴定 | 第63-64页 |
| 4.4 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介、攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第74页 |
