全细胞生物转化法制备γ-氨基丁酸

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全细胞生物转化法制备γ-氨基丁酸

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全细胞生物转化法制备γ-氨基丁酸

论文目录
摘要	第1-7页
abstract	第7-15页
第一章文献综述	第15-29页
1.1 γ-氨基丁酸的理化性质	第15-16页
1.2 γ-氨基丁酸的分布	第16-17页
1.3 γ-氨基丁酸的代谢	第17页
1.4 γ-氨基丁酸的生理作用	第17-20页
1.4.1 延缓大脑衰老	第17-18页
1.4.2 降低血压	第18页
1.4.3 治疗癫痫	第18-19页
1.4.4 抗焦虑	第19页
1.4.5 活化肝肾	第19页
1.4.6 对呼吸系统的作用	第19页
1.4.7 生殖生理作用	第19-20页
1.4.8 其他作用	第20页
1.5 γ-氨基丁酸的开发应用	第20-21页
1.5.1 GABA茶	第20页
1.5.2 发芽糙米	第20页
1.5.3 其他应用	第20-21页
1.6 γ-氨基丁酸的制备	第21-25页
1.6.1 化学法制备GABA	第21-22页
1.6.2 天然产物组织提取制备GABA	第22-23页
1.6.3 生物法制备GABA	第23-25页
1.7 GABA的分离纯化	第25-26页
1.8 谷氨酸脱羧酶	第26页
1.9 GABA测定方法	第26-28页
1.9.1 双酶法	第26-27页
1.9.2 薄层层析法快速鉴定	第27页
1.9.3 比色法法快速鉴定	第27-28页
1.9.4 高效液相色谱法鉴定	第28页
1.10 本研究的目的及意义	第28-29页
第二章材料与方法	第29-44页
2.1 材料	第29-33页
2.1.1 试剂	第29页
2.1.2 仪器	第29页
2.1.3 实验所用质粒和菌株	第29页
2.1.4 培养基配置	第29-30页
2.1.5 实验使用的主要溶液和配方	第30-33页
2.1.5.1 常用溶液配制	第30-31页
2.1.5.2 快速提取质粒DNA试剂配制	第31页
2.1.5.3 琼脂糖凝胶电泳缓冲液配置	第31-32页
2.1.5.4 SDS-PAGE电泳缓冲液配制	第32页
2.1.5.5 Western Blot相关试剂	第32-33页
2.1.5.6 引物	第33页
2.2.方法	第33-44页
2.2.1 TB法制备大肠杆菌感受态细胞	第33-34页
2.2.1.1 菌种划线	第33页
2.2.1.2 接种	第33页
2.2.1.3 感受态细胞制作	第33-34页
2.2.2 感受态细胞制作	第34页
2.2.2.1 大肠杆菌的常规转化	第34页
2.2.2.2 大肠杆菌的快速转化	第34页
2.2.3 GAD重组子的构建	第34-36页
2.2.4 琼脂糖凝胶DNA回收	第36页
2.2.5 小量质粒DNA提取	第36-37页
2.2.6 试剂盒提取质粒DNA	第37页
2.2.7 琼脂糖凝胶电泳	第37-38页
2.2.8 重组蛋白的表达	第38-41页
2.2.8.1 重组质粒的筛选	第38页
2.2.8.2 重组蛋白的表达	第38页
2.2.8.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测重组蛋白的表达	第38-40页
2.2.8.4 Western-Blot检测重组蛋白的表达	第40-41页
2.2.9 GAD活性测定	第41-42页
2.2.9.1 GAD活性定义	第41页
2.2.9.2 GAD活性标准曲线的建立	第41-42页
2.2.9.3 GAD活性测定	第42页
2.2.10 GABA柱前衍生化	第42-44页
第三章结果与分析	第44-57页
3.1 GAD重组质粒的构建	第44-45页
3.2 GAD活性快速测定方法的优化	第45页
3.3 GAD摇瓶表达验证	第45-46页
3.4 重组GAD全细胞转化活性的探究	第46-48页
3.5 重组GAD全细胞转化活性的探究	第48-50页
3.6 重组GAD菌株高密度发酵	第50-51页
3.7 全细胞生物转化制备GABA	第51-54页
3.8 全细胞生物转化制备GABA	第54-55页
3.9 GABA结晶重化	第55页
3.10 HPLC柱前衍生化测定GABA含量	第55-57页
第四章讨论与展望	第57-59页
4.1 讨论	第57页
4.2 展望	第57-59页
参考文献	第59-63页
致谢	第63页

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