论文目录 | |
1. 综述 | 第1-21
页 |
1.1. 反义RNA研究概述 | 第7-12
页 |
1.1.1. 反义RNA | 第7-8
页 |
1.1.2. 反义RNA的调控方式 | 第8-9
页 |
1.1.2.1. 在DNA复制水平上 | 第9
页 |
1.1.2.2. 在转录水平上 | 第9
页 |
1.1.2.3. 在翻译水平上的调控 | 第9
页 |
1.1.3. 反义RNA的功能 | 第9-10
页 |
1.1.3.1. 调控细菌基因的表达 | 第10
页 |
1.1.3.2. 噬菌体溶菌/溶源状态的控制 | 第10
页 |
1.1.3.3. IS10转位作用的抑制 | 第10
页 |
1.1.4. 反义RNA的应用 | 第10-12
页 |
1.1.4.1. 反义RNA在植物上的应用 | 第11-12
页 |
1.1.4.1.1. 果实成熟的控制 | 第11
页 |
1.1.4.1.2. 在植物抗病性方面 | 第11
页 |
1.1.4.1.3. 在改变花卉的颜色方面 | 第11
页 |
1.1.4.1.4. 植物淀粉合成的控制 | 第11-12
页 |
1.1.4.1.5. 油料植物种子中脂肪酸合成的控制 | 第12
页 |
1.1.4.2. 反义RNA在动物及人类抗病毒研究中的应用 | 第12
页 |
1.2. 动物转基因研究概述 | 第12-16
页 |
1.2.1. 动物转基因原理 | 第12-13
页 |
1.2.2. 动物转基因方法 | 第13-16
页 |
1.2.2.1. DNA显微注射法 | 第13-14
页 |
1.2.2.2. 逆转录病毒感染法 | 第14
页 |
1.2.2.3. 胚胎干细胞介导法 | 第14
页 |
1.2.2.4. 精子载体介导法 | 第14-15
页 |
1.2.2.5. 电穿孔法 | 第15
页 |
1.2.2.6. 基因枪法 | 第15-16
页 |
1.2.2.7. 微束激光转基因法 | 第16
页 |
1.3. 水产养殖动物基因工程育种研究 | 第16-19
页 |
1.3.1. 鱼类基因工程育种 | 第17-18
页 |
1.3.1.1. 鱼类转基因方法 | 第17
页 |
1.3.1.2. 鱼类转基因育种中采用的外源基因 | 第17-18
页 |
1.3.1.3. 受精卵转基因的分子机制 | 第18
页 |
1.3.2. 虾类基因工程育种 | 第18-19
页 |
1.4. 本文研究的目的和意义 | 第19-21
页 |
2. 材料与方法 | 第21-30
页 |
2.1. 材料 | 第21-23
页 |
2.2. 常用溶液、培养基的配制 | 第23-24
页 |
2.3. 主要仪器 | 第24-25
页 |
2.4. 方法 | 第25-30
页 |
2.4.1. 基本方法 | 第25-27
页 |
2.4.2. 日本对虾肌动蛋白基因启动子和终止子的克隆方法 | 第27-30
页 |
2.4.2.1. 提取日本对虾染色体 | 第27
页 |
2.4.2.2. 日本对虾染色体分别用六种平端酶完全酶切 | 第27-28
页 |
2.4.2.3. 接头制备 | 第28
页 |
2.4.2.4. 日本对虾染色体酶切片段与接头连接 | 第28
页 |
2.4.2.5. PCR扩增 | 第28-30
页 |
3. 结果和分析 | 第30-59
页 |
3.1. 日本对虾肌动蛋白基因启动子和终止子的克隆 | 第30-45
页 |
3.1.1. 日本对虾肌动蛋白基因部分cDNA片段的克隆 | 第30-34
页 |
3.1.2. 日本对虾肌动蛋白基因启动子和终止子的克隆 | 第34-45
页 |
3.1.2.1. 接头及其引物设计 | 第34
页 |
3.1.2.2. 日本对虾肌动蛋白基因特异性引物设计 | 第34-35
页 |
3.1.2.3. 日本对虾肌动蛋白基因启动子的克隆 | 第35-42
页 |
3.1.2.4. 日本对虾肌动蛋白基因终止子的克隆 | 第42-45
页 |
3.2. 白斑杆状病毒DNA聚合酶基因的鉴定及其序列特征分析 | 第45-48
页 |
3.3. 反义RNA转录载体构建 | 第48-51
页 |
3.3.1.1. 引物设计 | 第48-50
页 |
3.3.1.2. 片段扩增及酶切 | 第50
页 |
3.3.1.3. 构建载体 | 第50-51
页 |
3.4. 带有报告基因的反义RNA转录载体构建 | 第51-53
页 |
3.5. 转基因实验 | 第53-59
页 |
3.5.1. 转基因载体的制备 | 第53
页 |
3.5.2. 日本对虾卵的准备 | 第53-55
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3.5.3. 转化介质的选择 | 第55-56
页 |
3.5.4. 转化电压的选定 | 第56
页 |
3.5.5. 日本对虾转基因实验结果 | 第56-59
页 |
4. 讨论 | 第59-63
页 |
4.1. 肌动蛋白基因启动子在转基因载体构建中的应用 | 第59-60
页 |
4.2. 日本对虾转基因研究的难点 | 第60-61
页 |
4.3. 关于报告基因 | 第61-63
页 |
5. 小结 | 第63-64
页 |
6. 参考文献 | 第64-70
页 |
7. 致谢 | 第70页 |