论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-29页 |
| · 生物燃料乙醇转化平台—酿酒酵母 | 第14-15页 |
| · 酿酒酵母热胁迫损伤 | 第15-16页 |
| · 酿酒酵母的耐热机制 | 第16-22页 |
| · 热激酿酒酵母基因表达响应 | 第16-17页 |
| · 热休克蛋白 | 第17-18页 |
| · 海藻糖与酿酒酵母耐热机制 | 第18-19页 |
| · ATPase | 第19页 |
| · 泛素-蛋白酶体途径与酿酒酵母耐热机制 | 第19-20页 |
| · 抗氧化防御系统与酿酒酵母耐热性 | 第20-22页 |
| · 酶促防御体系 | 第20-21页 |
| · 非酶促防御体系 | 第21-22页 |
| · 嗜热微生物耐热机制 | 第22-23页 |
| · 酿酒酵母耐热性改造研究 | 第23-27页 |
| · 非理性育种技术 | 第23-24页 |
| · 理性育种技术 | 第24-27页 |
| · 基于酿酒酵母耐热机制提高酿酒酵母耐热性 | 第24-25页 |
| · 嗜热微生物在微生物耐热性改造方面的应用 | 第25-27页 |
| · 研究意义及研究路线 | 第27-29页 |
| · 研究意义 | 第27-28页 |
| · 研究路线 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-46页 |
| · 实验材料 | 第29-33页 |
| · 菌株与质粒 | 第29页 |
| · 培养基 | 第29-30页 |
| · 药品及试剂 | 第30-31页 |
| · 实验溶液配制 | 第31-32页 |
| · 实验仪器 | 第32-33页 |
| · 实验方法 | 第33-46页 |
| · 大肠杆菌的活化与培养 | 第33页 |
| · 酿酒酵母S. cerevisiae的活化与培养 | 第33页 |
| · 酿酒酵母基因组的提取 | 第33-34页 |
| · 引物设计 | 第34页 |
| · 目的基因及调控元件的扩增 | 第34-37页 |
| · 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第37页 |
| · 重叠延伸PCR（OE-PCR） | 第37-38页 |
| · 大肠杆菌质粒的提取 | 第38页 |
| · 质粒和DNA同步双酶切连接 | 第38-39页 |
| · 大肠杆菌感受态的制备 | 第39-40页 |
| · 大肠杆菌热激转化 | 第40页 |
| · 菌落PCR | 第40-41页 |
| · 酿酒酵母感受态的制备 | 第41页 |
| · 酿酒酵母电击转化 | 第41-42页 |
| · 酿酒酵母同源重组 | 第42页 |
| · 酿酒酵母质粒的提取 | 第42-43页 |
| · 酿酒酵母恒定高温培养 | 第43页 |
| · 酿酒酵母生长曲线的测定 | 第43页 |
| · 酿酒酵母点滴平板法和梯度稀释涂板法测定活菌数 | 第43-44页 |
| · 酿酒酵母乙醇产量及残糖测定 | 第44页 |
| · 酿酒酵母 50℃高温热激实验 | 第44-46页 |
| 第三章 抗氧化蛋白元器件的构建 | 第46-58页 |
| · 抗氧化功能基因的挖掘 | 第46-47页 |
| · 抗氧化功能基因的克隆 | 第47-49页 |
| · 抗氧化蛋白元器件的构建 | 第49-53页 |
| · 抗氧化蛋白元器件转染酿酒酵母工程菌的构建 | 第53-56页 |
| · 小结 | 第56-58页 |
| 第四章 酿酒酵母工程菌的表征 | 第58-83页 |
| · SOD元器件转染酿酒酵母工程菌表征 | 第58-64页 |
| · 含SOD元器件酿酒酵母工程菌 37℃表征结果 | 第58-61页 |
| · 含SOD元器件酿酒酵母工程菌 40℃表征结果 | 第61-64页 |
| · Prx元器件和CAT元器件转染酿酒酵母工程菌表征 | 第64-70页 |
| · 含Prx元器件和CAT元器件酿酒酵母工程菌 37℃表征结果 | 第64-66页 |
| · 含Prx元器件和CAT元器件酿酒酵母工程菌 40℃表征结果 | 第66-68页 |
| · 含Prx元器件和CAT元器件酿酒酵母工程菌 50℃高温耐受性测定 | 第68-70页 |
| · Trx元器件转染酿酒酵母表征 | 第70-75页 |
| · 含Trx元器件酿酒酵母工程菌 37℃表征结果 | 第70-72页 |
| · 含Trx元器件酿酒酵母工程菌 40℃表征结果 | 第72-75页 |
| · TrxR元器件与NAD(H)激酶元器件转染酿酒酵母表征 | 第75-81页 |
| · 含TrxR元器件和NAD(H)元器件酿酒酵母工程菌 37℃表征结果 | 第75-78页 |
| · 含TrxR和NAD(H)元器件酿酒酵母工程菌 40℃表征结果 | 第78-81页 |
| · 小结 | 第81-83页 |
| 第五章 结论与展望 | 第83-85页 |
| · 结论 | 第83-84页 |
| · 展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
