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H3N2亚型猪流感病毒HA1蛋白间接ELISA方法的建立及NP蛋白单克隆抗体的制备
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H3N2亚型猪流感病毒HA1蛋白间接ELISA方法的建立及NP蛋白单克隆抗体的制备
论文目录
 
摘要第1-7 页
Abstract第7-14 页
第一章 绪论第14-26 页
　　· 猪流感病毒概况第14-19 页
　　　　· 猪流感的流行病学第14-15 页
　　　　· 猪流感的生物学特性第15-16 页
　　　　· 猪流感病毒基因结构与编码蛋白第16-18 页
　　　　· 流感病毒的复制第18-19 页
　　· 猪流感病毒种间传播及其分子机理第19-20 页
　　　　· 猪流感病毒的种间传播第19-20 页
　　　　· 猪流感病毒种间传播的分子机理第20 页
　　· 猪流感病毒的遗传变异第20-22 页
　　　　· 猪流感病毒抗原性变异第20-21 页
　　　　· 猪流感病毒基因组变异第21-22 页
　　· 猪流感病毒诊断技术研究进展第22-23 页
　　　　· 猪流感病毒分离第22 页
　　　　· 琼脂扩散（AGP）实验第22 页
　　　　· 血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验第22 页
　　　　· 酶联免疫吸附试验（ELISA）第22-23 页
　　　　· 荧光抗体试验（IF）试验第23 页
　　　　· 免疫组织化学试验第23 页
　　　　· PCR 试验第23 页
　　· 流感病毒单克隆抗体研究进展第23-25 页
　　· 研究的目的和意义第25-26 页
第二章 H3N2 亚型猪流感病毒血凝素基因的原核表达第26-35 页
　　· 材料第26 页
　　　　· 病毒与菌种第26 页
　　　　· 质粒及相关试剂第26 页
　　· 方法第26-31 页
　　　　· 引物第26 页
　　　　· 病毒RNA 的提取及反转录第26-27 页
　　　　· PCR 反应扩增目的基因第27 页
　　　　· PCR 产物回收和纯化第27-28 页
　　　　· 大肠杆菌感受态的制备第28 页
　　　　· 重组表达质粒的构建及鉴定第28-29 页
　　　　· 转化菌的诱导表达及最佳诱导条件的确定第29 页
　　　　· 表达产物的SDS-PAGE 分析第29-30 页
　　　　· 表达产物的Western-blot 检测第30 页
　　　　· 表达产物的纯化第30-31 页
　　· 结果第31-34 页
　　　　· HA1 基因的RT-PCR 扩增结果第31-32 页
　　　　· 重组表达质粒的鉴定结果第32 页
　　　　· 转化菌的诱导表达第32-34 页
　　· 讨论第34-35 页
第三章 H3N2 亚型 SIV 重组 HA1 蛋白间接 ELISA 检测方法的建立第35-51 页
　　· 材料第35 页
　　　　· 抗原第35 页
　　　　· 血清和酶标抗体第35 页
　　　　· ELISA 相关溶液第35 页
　　　　· 主要仪器和设备第35 页
　　· 方法第35-38 页
　　　　· 间接ELISA 操作步骤第35-36 页
　　　　· 抗原包被浓度和血清稀释度的确定第36 页
　　　　· 封闭液对比试验第36-37 页
　　　　· 封闭时间对比试验第37 页
　　　　· 一抗最佳作用时间确定试验第37 页
　　　　· 酶标抗体稀释倍数的确定第37 页
　　　　· 酶标抗体作用时间的确定第37 页
　　　　· 阴阳性标准对照的确定第37 页
　　　　· 敏感性试验第37 页
　　　　· 特异性试验第37-38 页
　　　　· 重复性实验第38 页
　　· 结果第38-49 页
　　　　· 抗原包被浓度和血清稀释度的确定第38-39 页
　　　　· 封闭液对比试验第39-40 页
　　　　· 封闭时间对比试验第40-41 页
　　　　· 一抗最佳作用时间确定试验第41-42 页
　　　　· 酶标抗体稀释倍数第42-43 页
　　　　· 酶标抗体作用时间的确定第43-45 页
　　　　· 阴阳性标准对照的确定第45-46 页
　　　　· 敏感性试验第46 页
　　　　· 特异性试验第46 页
　　　　· 重复性试验第46-49 页
　　· 讨论第49-51 页
第四章 猪流感病毒 H3N2 亚型单克隆抗体的制备第51-62 页
　　· 材料第51-52 页
　　　　· 毒株第51 页
　　　　· 实验动物与细胞第51 页
　　　　· 主要试剂第51-52 页
　　　　· 主要仪器第52 页
　　· 方法第52-55 页
　　　　· 全病毒抗原的制备与纯化第52 页
　　　　· 动物免疫第52 页
　　　　· 间接ELISA 检测方法的建立第52-53 页
　　　　· 饲养细胞的制备第53 页
　　　　· 脾细胞制备第53 页
　　　　· 细胞融合第53-54 页
　　　　· 阳性杂交瘤细胞的筛选第54 页
　　　　· 腹水的制备第54 页
　　　　· 单克隆抗体的生物学特性鉴定第54-55 页
　　· 结果第55-61 页
　　　　· 全病毒抗原的制备与纯化第55 页
　　　　· 动物免疫第55-56 页
　　　　· 间接ELISA 检测方法的建立第56-57 页
　　　　· 细胞融合第57 页
　　　　· 阳性杂交瘤细胞的筛选第57-58 页
　　　　· 腹水的制备第58 页
　　　　· 单抗的生物学特性鉴定第58-61 页
　　· 讨论第61-62 页
　　　　· 抗原的纯化第61 页
　　　　· 细胞融合第61 页
　　　　· 筛选方法与生物学特性分析第61-62 页
第五章 结论第62-63 页
参考文献第63-70 页
附录第70-71 页
致谢第71-72 页
作者简历第72页

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