内含肽介导的重组酶Cre拆分及其在拟南芥中的删除活性研究

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内含肽介导的重组酶Cre拆分及其在拟南芥中的删除活性研究

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内含肽介导的重组酶Cre拆分及其在拟南芥中的删除活性研究

论文目录
摘要	第1-8页
Abstract	第8-10页
第1章文献综述	第10-24页
· 植物转基因技术概况	第10-11页
· 转基因植物安全性问题及解决途径	第11-14页
· 转基因植物生物安全性问题	第11-12页
· 解决途径	第12-14页
· 位点特异性重组酶系统	第14-16页
· 研究现状	第14页
· Cre/loxp系统作用原理及应用	第14-16页
· 内含肽介导的蛋白拆分技术研究进展	第16-24页
· 内含肽概述	第17-18页
· 内含肽的作用机理及应用	第18-21页
· Ssp DnaE intein	第21-24页
第2章引言	第24-26页
· 研究目标	第24页
· 研究内容	第24-25页
· 技术路线	第25-26页
第3章材料与方法	第26-40页
· 材料	第26-29页
· 植物材料	第26页
· 菌株和质粒	第26页
· 主要仪器设备	第26页
· 购买的试剂及试剂盒	第26-27页
· 抗生素与激素	第27页
· 培养基	第27-28页
· 其它试剂的配制	第28-29页
· 方法	第29-40页
· 质粒提取(碱裂解法)	第29-30页
· 大肠杆菌感受态细胞制备和转化	第30页
· 农杆菌感受态细胞制备和转化	第30-31页
· 植物表达载体的构建	第31-34页
· 烟草遗传转化	第34页
· 转基因烟草毛状根的分子鉴定	第34-35页
· 转基因烟草毛状根的GUS组织染色	第35页
· 删除效应测序分析	第35页
· 拟南芥的遗传转化	第35-36页
· 转基因拟南芥单拷贝纯合体的筛选	第36页
· 拟南芥叶片总RNA的提取	第36-37页
· 拟南芥GUS染色	第37页
· GUS酶活性的定量分析	第37-38页
· 拟南芥的杂交方法	第38-40页
第4章结果与分析	第40-56页
· 重组酶CRE蛋白结构分析及拆分位点确定	第40页
· 拆分系统在烟草发根中的删除效率研究	第40-45页
· 拆分系统植物表达载体的构建	第40-41页
· 转基因毛状根的PCR检测	第41-42页
· 毛状根GUS染色分析	第42-43页
· 拆分系统删除效率统计	第43-44页
· 测序分析	第44-45页
· 拆分系统在拟南芥中的删除活性分析	第45-50页
· 单拷贝转基因拟南芥的获得	第45-46页
· 拟南芥GUS染色分析	第46-47页
· 拟南芥GUS活性分析	第47-50页
· 拆分系统在拟南芥杂交中的删除活性研究	第50-56页
· 植物表达载体的构建	第50页
· 转基因拟南芥单拷贝纯合体的获得	第50-53页
· 杂交后代GUS染色分析	第53-56页
第5章结论与讨论	第56-58页
· 结论	第56-57页
· 重组酶Cre的不同拆分位点的确定	第56页
· 拆分系统在烟草发根中的删除效率	第56页
· 拆分系统在拟南芥中的删除活性分析	第56-57页
· 拆分系统在拟南芥杂交中的删除活性	第57页
· 讨论	第57-58页
参考文献	第58-66页
附录	第66-68页
致谢	第68-69 页

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