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牦牛β-防御素5基因的原核表达及乳腺特异性表达载体的构建

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牦牛β-防御素5基因的原核表达及乳腺特异性表达载体的构建
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一部分 文献综述第10-26页
  第一章 转基因动物乳腺生物反应器的研究进展第10-26页
    · 防御素的研究进展第10-16页
      · 防御素的来源和分布第10-11页
      · 防御素的分子结构特征第11-12页
      · 抗菌肽的作用机制第12-13页
      · 防御素的生物学活性第13-14页
      · 防御素的应用前景第14-16页
    · 转基因动物的研究进展第16-20页
      · 转基因动物的研究历史第16-17页
      · 转基因技术第17-19页
      · 转基因技术面临的问题第19-20页
    · 乳腺生物反应器的研究进展第20-26页
      · 转基因乳腺生物反应器的概述第20页
      · 乳腺特异性表达载体调控元件的类型第20-22页
      · 乳腺表达载体检验方法第22-24页
      · 动物乳腺生物反应器存在的问题及展望第24-26页
第二部分 试验研究第26-65页
  第一章 牦牛β-防御素 5 基因的克隆及序列分析第26-35页
    · 材料与方法第26-30页
      · 材料第26页
      · 主要试剂第26-27页
      · 实验仪器第27页
      · 实验方法第27-30页
    · 结果与分析第30-34页
      · 牦牛肺组织总 RNA 提取及检测第30-31页
      · 牦牛 BNBD5 成熟肽基因 RT-PCR 扩增结果第31页
      · 重组子的筛选及双酶切鉴定第31-32页
      · 牦牛 BNBD5 成熟肽 cDNA 序列分析第32-34页
    · 讨论第34页
    · 小结第34-35页
  第二章 牦牛β-防御素 5 基因的原核表达及产物体外抗菌活性的鉴定第35-46页
    · 材料与方法第35-41页
      · 菌株第35页
      · 试剂第35页
      · 主要试剂的配制第35-37页
      · 方法第37-41页
    · 结果与分析第41-44页
      · 重组质粒的双酶切鉴定第41页
      · IPTG 诱导不同时间牦牛β-防御素 5 的表达第41-42页
      · 纯化蛋白第42页
      · 重组蛋白浓度的测定结果第42-43页
      · 重组蛋白抑菌活性的鉴定第43-44页
    · 讨论第44-45页
    · 小结第45-46页
  第三章 牦牛β-防御素 5 基因真核表达载体的构建第46-57页
    · 材料与方法第46-53页
      · 材料第46页
      · 主要试剂第46页
      · 实验仪器第46页
      · 方法第46-53页
    · 结果与分析第53-56页
      · CSN25' 端、CSN23' 端调控区及牦牛 BNBD5 ORF 的 PCR 扩增结果第53页
      · 质粒 pEGFP-C1 和 pMD19-BNBD5 的双酶切结果第53页
      · 质粒 pEGFP- BNBD5 和 pMD19-BC3 的双酶切结果第53-54页
      · 质粒 pEGFP- BNBD5-BC3 和 pMD19-BC5 的双酶切结果第54-55页
      · 质粒 pEGFP- BNBD5-BC3-BC5 的双酶切鉴定第55-56页
    · 讨论第56页
    · 小结第56-57页
  第四章 牦牛β-防御素 5 基因转染牦牛乳腺上皮细胞及其在细胞中的表达第57-64页
    · 材料与方法第57-59页
      · 材料第57-58页
      · 方法第58-59页
    · 结果与分析第59-62页
      · 质粒的纯化第59-60页
      · 牦牛乳腺上皮细胞的原代及传代培养第60页
      · 抗性筛选结果第60-61页
      · 细胞转染和筛选第61页
      · PCR 检测细胞转染的结果第61-62页
    · 讨论第62-63页
    · 小结第63-64页
  第五章 结论、创新点以及存在的问题第64-65页
    1 本论文的结论第64页
    2 本论文的创新点第64页
    3 本论文存在的不足之处第64-65页
参考文献第65-72页
硕士期间发表的文章第72-73页
致谢第73-74 页

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