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猪胞内劳森氏菌抗原候选蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立与初步应用

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猪胞内劳森氏菌抗原候选蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立与初步应用
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-11页
第一部分 综述第11-25页
  · 胞内劳森氏菌病原学第12-14页
    · 胞内菌形态学与分类第12页
    · 培养第12-13页
    · 流行病学第13-14页
  · 致病性第14-15页
  · 病理变化第15-16页
  · 致病机理第16-19页
  · 免疫反应第19-20页
  · 诊断第20-22页
    · 临床诊断第20页
    · 剖检诊断第20-21页
    · 活体诊断第21-22页
  · 预防与控制第22-23页
    · 抗菌药物第22页
    · 疫苗免疫第22-23页
  · 目的与意义第23-24页
  · 研究线路第24-25页
第二部分 实验研究第25-85页
  研究一 猪胞内劳森氏菌抗原候选蛋白的原核表达及重组蛋白的纯化与复性第25-64页
    1 主要材料、试剂与仪器第25-29页
      · 材料、菌种及载体第25页
      · 主要试剂第25-26页
      · 主要仪器设备第26页
      · 引物合成与序列测定第26页
      · 主要试剂和培养基的配制第26-29页
    2 实验方法与步骤第29-39页
      · 抗原候选蛋白的筛选第29-31页
      · 引物第31页
      · DNA的抽提第31-32页
      · PCR扩增与目的基因回收第32-33页
      · 目的基因克隆第33-34页
      · 原核表达载体的构建第34-35页
      · 重组表达质粒转化表达宿主菌第35页
      · 诱导表达及鉴定第35-37页
      · 重组蛋白的纯化及复性第37-39页
    · 结果第39-59页
      · 猪胞内劳森氏菌的诊断第39-40页
      · 抗原候选蛋白原核表达载体的构建第40-43页
      · 重组蛋白的表达与鉴定第43-54页
      · 重组蛋白的纯化与复性第54-59页
    · 讨论第59-62页
      · 间接ELISA检测方法建立意义第59页
      · 胞内劳森氏菌外膜蛋白的抗原性第59-60页
      · 抗原候选蛋白的选择第60页
      · 原核表达系统的选择第60页
      · 原核表达质粒的构建第60-61页
      · 重组蛋白的表达形式第61-62页
      · 重组蛋白的获得第62页
      · 包被抗原的确定第62页
    · 小结第62-64页
  研究二 猪胞内劳森氏菌间接ELSIA检测方法的建立及初步应用第64-85页
    · 材料、试剂与仪器第64-65页
      · 主要试剂第64页
      · 主要仪器第64-65页
    · 方法与步骤第65-69页
      · 间接ELISA的基本步骤第65页
      · 间接ELlSA的优化第65-67页
      · 间接ELISA阴阳性临界值第67页
      · LI-1024b-ELSIA特异性实验第67-68页
      · 重复性试验第68页
      · LI-1024b间接ELISA检测方法的初步应用第68-69页
    3 结果第69-81页
      · ELISA反应条件的优化结果第69-76页
      · LI-1024b间接ELISA阴阳性临界值的确定第76-77页
      · LI-1024b-ELSIA特异性试验第77-79页
      · 重复性试验第79-80页
      · 临床样品的检测第80-81页
    · 讨论第81-84页
      · 间接ELISA的优点第81页
      · 间接ELISA反应条件的优化第81-82页
      · LI-1024b间接ELISA的特异性第82-83页
      · 临床血清样品检测结果第83-84页
    · 小结第84-85页
第三部分 全文结论第85-86页
参考文献第86-95页
附录:英文缩写对照表第95-96页
致谢第96-97页
攻读硕士期间发表论文情况第97 页

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