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猪瘟病毒Erns、NS4A、NS4B、NS5A蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

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猪瘟病毒Erns、NS4A、NS4B、NS5A蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
第一章 文献综述第14-26页
  · 猪瘟病毒的分类及其结构特性第14-15页
  · 猪瘟病毒的致病机理研究第15-16页
    · 免疫抑制第15页
    · 免疫逃避第15-16页
    · 出血机制第16页
  · 猪瘟病毒基因组结构及其功能蛋白的特性第16-22页
    · CSFV的非编码区第16-17页
    · CSFV的非结构蛋白第17-19页
    · CSFV的结构蛋白第19-22页
  · 非结构蛋白NS4A、NS4B和NS5A及结构蛋白E~(rns)的研究进展第22-24页
    · NS4A蛋白第22页
    · NS4B蛋白第22-23页
    · NS5A蛋白第23页
    · E~(rns)蛋白第23-24页
  · 本研究的目的与意义第24-26页
第二章 材料与方法第26-36页
  · 实验材料第26-30页
    · 病毒、细胞、质粒与菌株第26页
    · 试验动物第26页
    · 引物及载体构建策略第26页
    · 实验仪器第26-27页
    · 试剂第27页
    · 试剂配制第27-29页
    · 感受态细胞的制备第29-30页
  · 技术路线第30页
  · 试验方法第30-36页
    · 基因的克隆第30-31页
    · 构建原核表达载体第31页
    · 重组蛋白的诱导表达第31-32页
    · 纯化重组蛋白第32-34页
    · 免疫小白鼠制备多抗血清第34页
    · 多克隆抗体的特异性第34-36页
第三章 实验结果第36-75页
  · 总体实验设计及所用引物第36-39页
  · 猪瘟病毒E~(rns)蛋白的原核表达及多抗的制备第39-47页
    · E~(rns)表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列第39-40页
    · 猪瘟病毒E~(rns)基因的克隆第40页
    · 构建E~(rns)基因的原核表达载体第40-41页
    · E~(rns)重组蛋白的诱导表达第41-42页
    · E~(rns)重组蛋白表达形式的鉴定与纯化第42-43页
    · Western Blot鉴定E~(rns)重组蛋白第43-44页
    · 抗E~(rns)多克隆抗体与纯化的重组蛋白的反应性第44-45页
    · 抗E~(rns)多克隆抗体与CSFV感染PK-15细胞中E~(rns)蛋白的反应性第45-47页
  · 猪瘟病毒NS4A蛋白的原核表达及多抗的制备第47-55页
    · NS4A表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列第47页
    · 猪瘟病毒NS4A基因的克隆第47-48页
    · 构建NS4A基因的原核表达载体第48-49页
    · 原核表达载体PET-NS4A的诱导表达第49页
    · NS4A重组蛋白表达形式的鉴定与纯化第49-50页
    · Western Blot鉴定NS4A重组蛋白第50-51页
    · 抗NS4A多克隆抗体与NS4A重组蛋白的反应性第51-52页
    · 抗NS4A多克隆抗体与CSFV感染的PK-15细胞中NS4A蛋白的反应性第52-55页
  · 猪瘟病毒NS4B蛋白的原核表达及多抗的制备第55-65页
    · NS4B表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分析第55-56页
    · 猪瘟病毒NS4B基因的克隆第56-57页
    · 构建NS4B基因的原核表达载体第57-58页
    · 诱导NS4B基因原核表达载体表达蛋白第58-59页
    · NS4BΔ205-347重组蛋白的纯化及鉴定第59-60页
    · Western Blot鉴定NS4BΔ205-347重组蛋白第60-61页
    · 抗NS4BΔ205-347多克隆抗体与重组蛋白的反应性第61-62页
    · 抗NS4BΔ205-347多克隆抗体与真核表达NS4B蛋白的反应性第62-63页
    · 抗NS4BzΔ205-347多克隆抗体与CSFV感染PK-15细胞中NS4B蛋白的反应性第63-65页
  · 猪瘟病毒NS5A蛋白的原核表达及多抗的制备第65-75页
    · NS5A表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列第65-66页
    · 猪瘟病毒NS5A基因的克隆第66-67页
    · 构建NS5A基因的原核表达载体第67-68页
    · 原核表达载体PET-NS5A的诱导表达第68-69页
    · NS5A蛋白表达形式的鉴定及纯化第69页
    · NS5A重组蛋白的Western Blot分析第69-70页
    · 抗NS5A多克隆抗体与重组蛋白的反应性第70-71页
    · 抗NS5A多克隆抗体与PK-15细胞中真核表达的NS5A蛋白的反应性第71-72页
    · 抗NS5A多克隆抗体与CSFV感染PK-15细胞中NS5A蛋白的反应性第72-75页
第四章 讨论第75-83页
  · 免疫原的选择第75-76页
  · 猪瘟病毒E~(rns)、NS4A、NS4B、NS5A的原核表达策略第76-78页
  · 可溶性抗原的制备第78-80页
  · 多克隆抗体的反应性和特异性第80-83页
第五章 总结第83-84页
参考文献第84-92页
致谢第92-93页
攻读学位期间发表论文情况第93 页

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