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H1亚型禽流感病毒分离鉴定、遗传进化分析及快速检测方法的研究

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H1亚型禽流感病毒分离鉴定、遗传进化分析及快速检测方法的研究
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
前言第15-17页
第一章 文献综述第17-30页
  · 禽流感病毒的国内外研究进展第17-24页
    · 禽流感病毒流行历史概况第17-18页
    · 禽流感病毒基因组结构和作用机制第18-21页
    · 禽流感病毒的复制第21-22页
    · 禽流感病毒抗原变化第22-23页
    · 禽流感病毒的感染途径和方式第23-24页
  · H1亚型流感病毒的研究进展第24-25页
  · 禽流感病毒快速诊断方法的研究进展第25-28页
    · 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)第25-26页
    · 二温式-聚合酶链式反应第26页
    · 巢氏-聚合酶链式反应第26-27页
    · 实时荧光定量-聚合酶链式反应第27页
    · 多重-聚合酶链式反应第27-28页
  · 本课题研究意义第28-30页
第二章 H1亚型禽流感病毒的分离鉴定和生物学特性研究第30-40页
  摘要第30页
  · 材料与方法第30-35页
    · 材料第30-31页
    · 方法第31-35页
  · 结果第35-38页
    · 病毒分离结果第35页
    · 病毒纯化第35-36页
    · RT-PCR检测鉴定结果第36页
    · HA基因和NA基因测序结果第36页
    · H1亚型禽流感病毒病原性监测情况第36-37页
    · 鸡胚半数致死量(ELD_(50))和鸡胚半数感染量(EID_(50))的测定结果第37-38页
    · 致病性实验结果第38页
  · 讨论第38-40页
第三章 6株H1亚型禽流感病毒全基因序列测定与分析第40-67页
  摘要第40页
  · 材料和方法第40-44页
    · 材料第40-41页
    · 方法第41-44页
  · 结果第44-65页
    · 6株分离株全基因RT-PCR扩增结果第44页
    · 各毒株基因片段的克隆和序列测定第44-48页
    · 6株H1N2亚型禽流感病毒全基因序列分析第48-65页
  · 讨论第65-67页
第四章 H1亚型禽流感病毒快速检测方法的建立第67-104页
  试验一 H1亚型禽流感病毒二温式PCR检测方法的建立第67-73页
    摘要第67页
    · 材料与方法第67-69页
      · 病毒株第67页
      · 主要试剂第67-68页
      · 引物设计与合成第68页
      · 病毒RNA抽提与反转录第68页
      · 二温式PCR条件的优化第68页
      · 二温式PCR的特异性试验第68-69页
      · 二温式PCR的敏感性试验第69页
      · 临床样品检测第69页
    · 结果第69-71页
      · 二温式PCR反应条件的优化第69页
      · 特异性试验结果第69-70页
      · 敏感性试验结果第70-71页
      · 临床样品检测结果第71页
    · 讨论第71-73页
  试验二 H1亚型禽流感病毒巢氏PCR检测方法的建立第73-80页
    摘要第73页
    · 材料与方法第73-75页
      · 毒株第73页
      · 试剂第73-74页
      · 引物设计与合成第74页
      · 病毒RNA的抽提与反转录第74页
      · 巢氏PCR条件的优化第74页
      · 巢氏PCR的特异性试验第74页
      · 巢式PCR的敏感性试验第74-75页
    · 结果第75-77页
      · 巢氏PCR条件优化结果第75-76页
      · 特异性试验结果第76页
      · 敏感性试验结果第76-77页
    · 讨论第77-80页
  试验三 H1亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立第80-89页
    摘要第80-81页
    · 材料与方法第81-83页
      · 病毒株第81页
      · 主要设备和试剂第81页
      · 引物的设计与合成第81页
      · 病毒RNA抽提与反转录第81页
      · 标准品的制备第81-82页
      · 反应条件的优化第82页
      · 标准曲线的制作第82页
      · 特异性试验第82-83页
      · 敏感性试验第83页
      · 重复性试验第83页
      · 临床样品检测第83页
    · 结果第83-87页
      · 质粒DNA浓度的测定第83页
      · 实时荧光定量PCR条件优化第83-84页
      · 标准曲线的制作第84-85页
      · 敏感性试验结果第85-86页
      · 特异性试验结果第86-87页
      · 重复性试验结果第87页
      · 临床检测结果第87页
    · 讨论第87-89页
  试验四 H1和H3亚型禽流感病毒二重PCR检测方法的建立第89-96页
    摘要第89页
    · 材料与方法第89-91页
      · 试剂第89-90页
      · 毒株第90页
      · 引物设计与合成第90页
      · 病毒RNA抽提与反转录第90页
      · 二重PCR扩增条件的优化第90页
      · 二重PCR的特异性试验第90-91页
      · 二重PCR的敏感性试验第91页
      · 临床样品检测第91页
    · 结果第91-94页
      · 二重PCR条件的优化第91页
      · 特异性试验结果第91-92页
      · 敏感性试验结果第92-93页
      · 临床样品检测结果第93-94页
    · 讨论第94-96页
  试验五 H1、H3亚型禽流感病毒和M基因三重RT-PCR检测方法的建立第96-104页
    摘要第96页
    · 材料与方法第96-99页
      · 试验材料第96-97页
      · 引物设计与合成第97页
      · 病毒RNA抽提与反转录第97页
      · 阳性质粒的制备第97-98页
      · 三重PCR扩增条件的优化第98页
      · 三重PCR的特异性试验第98页
      · 三重PCR的敏感性试验第98页
      · 临床样品检测第98-99页
    · 结果第99-101页
      · 三重PCR条件的优化结果第99-100页
      · 特异性试验结果第100页
      · 敏感性试验结果第100-101页
      · 临床样品检测结果第101页
    · 讨论第101-104页
第五章 H1亚型禽流感病毒多种快速检测方法的比较第104-111页
  摘要第104页
  · 材料与方法第104-107页
    · 病毒株第104页
    · RNA的抽提第104-105页
    · 病毒RNA的梯度稀释第105页
    · 病毒RNA浓度的测定第105页
    · RNA的反转录第105页
    · 引物的合成第105-106页
    · 六种检测方法的最佳扩增条件第106-107页
  · 结果第107-109页
    · 病毒RNA敏感性检测结果第107-109页
  · 讨论第109-111页
结论第111-112页
参考文献第112-118页
致谢第118-119页
个人简历第119页
攻读学位期间发表论文情况第119 页

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