论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| · MADS-box基因的研究进展 | 第11-13页 |
| · MADS-box基因的类型及其结构特点 | 第11页 |
| · MADS-box基因与花发育 | 第11-12页 |
| · 植物MADS-box基因的生物学功能及其多效性 | 第12页 |
| · MADS-box基因与控制开花时间 | 第12-13页 |
| · TFL2基因的研究进展 | 第13-14页 |
| · 植物TFL2同源基因表达谱的进化 | 第13页 |
| · 植物TFL2的功能 | 第13-14页 |
| · DAWDLE基因的研究进展 | 第14页 |
| · 研究目的与意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-32页 |
| · 农杆菌介导OsMADS59 Overexpression、OsMADS59 RNAi转化水稻 | 第16-18页 |
| · 水稻材料、表达载体、菌株 | 第16页 |
| · 试剂与仪器 | 第16页 |
| · 实验相关试剂 | 第16页 |
| · 实验常用仪器 | 第16页 |
| · 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备和保存 | 第16-17页 |
| · 农杆菌的转化 | 第17页 |
| · 农杆菌介导水稻的转化 | 第17-18页 |
| · OsMADS59的RNA原位杂交 | 第18-22页 |
| · 材料 | 第18页 |
| · 质粒与分子生物学试剂 | 第18-19页 |
| · 材料固定 | 第19页 |
| · 脱水 | 第19页 |
| · 透明 | 第19页 |
| · 透蜡 | 第19页 |
| · 包埋 | 第19页 |
| · 切片 | 第19页 |
| · 原位杂交RNA探针的制备 | 第19-21页 |
| · 体外转录模板的制备 | 第19-20页 |
| · RNA探针的体外转录 | 第20-21页 |
| · 切片的预处理 | 第21-22页 |
| · 预杂交与杂交 | 第22页 |
| · 冲冼 | 第22页 |
| · 检测杂交信号 | 第22页 |
| · OsDDL RNAi载体的克隆和水稻转化 | 第22-32页 |
| · 目的片段的PCR扩增 | 第22-23页 |
| · PCR扩增产物的回收 | 第23-24页 |
| · 目的DNA片段的pUCm-T载体的连接 | 第24-25页 |
| · 连接产物对大肠杆菌DH5α的转化 | 第25页 |
| · 大肠杆菌pUCm-T-DDL转化子PCR阳性鉴定 | 第25-26页 |
| · 大肠杆菌pUCm-T-DDL转化子质粒提取 | 第26页 |
| · 序列测定和比对 | 第26-27页 |
| · OsDDL目的片段的获得 | 第27页 |
| · 176载体的酶切与回收 | 第27页 |
| · 质粒176-DDLsense的构建 | 第27-29页 |
| · 质粒 176-DDLsense4)DLantiseiise 的构建 | 第29页 |
| · RNAi载体pICAMBIA1300-DDL的构建 | 第29-31页 |
| · pCAMBIA1300-DDL表达载体转化农杆菌EHA105 | 第31页 |
| · 农杆菌介导的pCAMBIA1300-DDL表达载体转化水稻 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-53页 |
| · pCAMBIA1300-MADS59过表达和RNAi载体的水稻转化 | 第32-38页 |
| · 水稻胚愈伤组织的诱导 | 第32页 |
| · 愈伤组织的继代培养 | 第32-33页 |
| · 抗性愈伤组织的筛选 | 第33-34页 |
| · 抗性愈伤组织的分化 | 第34-35页 |
| · 转基因苗的生根培养 | 第35-36页 |
| · 转基因苗的移栽 | 第36页 |
| · pCAMBIA1300-MADS59过表达和RNAi转基因水稻的PCR鉴定 | 第36-38页 |
| · OsMADS59在OsTFL2转基因水稻中表达情况的研究 | 第38-40页 |
| · OsMADS59原位杂交RNA探针的制备 | 第38页 |
| · OsMADS59的RNA原位杂交结果分析 | 第38-40页 |
| · OsDDL基因的RNAi载体的构建和转化水稻 | 第40-53页 |
| · 水稻基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| · OsDDL RNAi目的片段的扩增 | 第41页 |
| · 目的片段的回收 | 第41-42页 |
| · 质粒pUCm-T-DDL的构建 | 第42-43页 |
| · 质粒176-DDLsense的构建 | 第43-44页 |
| · 质粒176-DDLsense-DDLantisense的构建 | 第44-45页 |
| · RNAi载体pICAMBIA1300-DDL的构建 | 第45-50页 |
| · 农杆菌介导pICAMBIA1300-DDL RNAi转化水稻 | 第50-51页 |
| · pCAMBIA1300-DDL RNAi转基因水稻的PCR鉴定 | 第51-53页 |
| 4 结论 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-56页 |
| · OsMADS59转化水稻的意义 | 第54页 |
| · OsDDL RNAi载体构建和转化水稻的意义 | 第54页 |
| · OsMADS59的RNA原位杂交结果的讨论 | 第54-55页 |
| · 影响农杆菌介导转化效率的因素 | 第55-56页 |
| · 愈伤组织诱导的影响因素 | 第55页 |
| · 头孢菌素对愈伤分化的影响因素 | 第55页 |
| · 共培养农杆菌菌液浓度 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 | 第64-66
页 |
