论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩写略表中英文注释表 | 第10-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-19页 |
| 1.1 幽门螺杆菌的简介 | 第15页 |
| 1.2 胃炎及胃癌概述 | 第15-16页 |
| 1.2.1 H.pylori与胃炎 | 第15-16页 |
| 1.2.2 H.pylori与胃癌 | 第16页 |
| 1.3 转录相关蛋白FRA-1 的研究 | 第16-17页 |
| 1.4 参与H.pylori相关性胃炎发生的信号通路 | 第17-18页 |
| 1.5 参与H.pylori相关性胃癌发生的信号通路 | 第18-19页 |
| 第二章 研究目的与方法、技术路线及意义 | 第19-22页 |
| 2.1 研究目的 | 第19页 |
| 2.2 研究方法 | 第19-20页 |
| 2.3 技术路线 | 第20-21页 |
| 2.4 研究意义 | 第21-22页 |
| 第三章 H.pylori感染组织及细胞中FRA-1 表达分析 | 第22-38页 |
| 3.1 材料和仪器 | 第22-26页 |
| 3.1.1 数据库数据分析 | 第22页 |
| 3.1.2 临床标本 | 第22页 |
| 3.1.3 细胞和菌株 | 第22页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.5 主要溶液配置 | 第23-25页 |
| 3.1.6 主要仪器、耗材 | 第25-26页 |
| 3.2 方法 | 第26-31页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第26页 |
| 3.2.2 细菌培养与鉴定 | 第26-27页 |
| 3.2.3 H.pylori 11637 与胃上皮细胞共培养 | 第27页 |
| 3.2.4 IHC | 第27-28页 |
| 3.2.5 细胞中总RNA提取 | 第28-29页 |
| 3.2.6 RNA逆转录 | 第29页 |
| 3.2.7 qRT-PCR | 第29-30页 |
| 3.2.8 Western blot | 第30-31页 |
| 3.2.9 统计分析 | 第31页 |
| 3.3 结果 | 第31-37页 |
| 3.3.1 FRA-1 在胃癌及癌旁组织中的表达情况 | 第31-32页 |
| 3.3.2 FRA-1 表达情况与患者预后的关系 | 第32页 |
| 3.3.3 FRA-1 在人胃炎和胃癌胃黏膜组织中的表达 | 第32页 |
| 3.3.4 FRA-1 在胃上皮细胞系中的表达差异 | 第32-33页 |
| 3.3.5 H.pylori的鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.6 共培养胃上皮细胞形态学观察 | 第34-35页 |
| 3.3.7 FRA-1 在H.pylori不同感染时间及浓度下的表达分析 | 第35-36页 |
| 3.3.8 FRA-1 表达的增高依赖于H.pylori活菌的接触 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 初步探索FRA-1 在H.pylori诱导的胃相关性炎症中的作用机制 | 第38-48页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第38-39页 |
| 4.1.1 细胞和菌株 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 主要溶液配置 | 第38页 |
| 4.1.4 主要仪器及耗材 | 第38-39页 |
| 4.2 方法 | 第39-41页 |
| 4.2.1 细胞与H.pylori11637共培养 | 第39页 |
| 4.2.2 siRNA瞬时转染 | 第39页 |
| 4.2.3 细胞中总RNA提取 | 第39页 |
| 4.2.4 RNA逆转录 | 第39页 |
| 4.2.5 qRT-PCR | 第39页 |
| 4.2.6 Western blot | 第39-40页 |
| 4.2.7 ELISA检测 | 第40页 |
| 4.2.8 免疫荧光实验 | 第40页 |
| 4.2.9 统计分析 | 第40-41页 |
| 4.3 结果 | 第41-46页 |
| 4.3.1 FRA-1 siRNA干扰效果的验证 | 第41页 |
| 4.3.2 FRA-1 对H.pylori诱导的炎症因子的影响 | 第41-44页 |
| 4.3.3 FRA-1 对H.pylori感染诱导NF-κB通路蛋白表达的影响 | 第44-46页 |
| 4.3.4 FRA-1 对H.pylori感染诱导NF-κB p65核转位的影响 | 第46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 抑制FRA-1 表达对H.pylori感染胃上皮细胞生物学行为的影响 | 第48-58页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第48页 |
| 5.1.1 细胞与细菌 | 第48页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 5.1.3 主要溶液配制 | 第48页 |
| 5.1.4 主要仪器与耗材 | 第48页 |
| 5.2 方法 | 第48-50页 |
| 5.2.1 细胞与H.pylori11637共培养 | 第48-49页 |
| 5.2.2 Transwell转移实验 | 第49页 |
| 5.2.3 平板克隆形成实验 | 第49页 |
| 5.2.4 Western blot | 第49页 |
| 5.2.5 免疫荧光实验 | 第49页 |
| 5.2.6 蛋白核浆分离 | 第49-50页 |
| 5.2.7 统计分析 | 第50页 |
| 5.3 结果 | 第50-57页 |
| 5.3.1 FRA-1 低表达抑制GES-1、MGC-803 细胞的增殖能力 | 第50页 |
| 5.3.2 GES-1、MGC-803 细胞中敲减FRA-1 抑制细胞的迁移能力 | 第50-53页 |
| 5.3.3 敲减FRA-1 后体外抑制H.pylori相关性胃上皮细胞发生EMT | 第53-54页 |
| 5.3.4 FRA-1 低表达对Wnt/β-catenin／TGF-β 信号通路相关蛋白的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.5 FRA-1 对H.pylori诱导的 β-catenin核转位影响 | 第55-57页 |
| 5.4 讨论 | 第57-58页 |
| 结论与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文与参加的会议 | 第66页 |
