论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| · 核酸适体的概念及特点 | 第8-9页 |
| · 核酸适体在研究中的状况 | 第9-10页 |
| · 核酸适体电化学生物传感器的研究进展 | 第10-14页 |
| · 传感器概述 | 第10页 |
| · 生物传感器的构成 | 第10页 |
| · 核酸适体生物传感器 | 第10-11页 |
| · 核酸适体电化学生物传感器的分类和优越性 | 第11-14页 |
| · 纳米技术及其在电化学生物传感器领域中的应用 | 第14-15页 |
| · 纳米材料及其特点、分类及其在肿瘤诊断中的应用 | 第14页 |
| · 胶体金技术 | 第14-15页 |
| · 磁性纳米粒子 | 第15页 |
| · 研究构想、意义及技术路线图 | 第15-18页 |
| · 前期研究 | 第16页 |
| · 本研究的构想及意义 | 第16-17页 |
| · 技术路线图 | 第17-18页 |
| 2 实验 | 第18-38页 |
| · 细胞及细胞株来源 | 第18页 |
| · 试剂与材料 | 第18-20页 |
| · 所用设备及仪器 | 第20-21页 |
| · 适体及引物的合成 | 第21-23页 |
| · 适体的化学合成 | 第21-23页 |
| · 引物的设计与合成 | 第23页 |
| · 核酸适体的扩增 | 第23-26页 |
| · 合成适体克隆菌质粒抽提 | 第23-24页 |
| · 菌落PCR扩增 | 第24-25页 |
| · PCR扩增产物纯化 | 第25-26页 |
| · PCR纯化产物电泳检测 | 第26页 |
| · 适体的编号、随机化分组和修饰 | 第26-30页 |
| · 适体的编号、随机化分组 | 第26页 |
| · 适体的氨基修饰 | 第26-28页 |
| · 氨基标记产物电泳检测 | 第28页 |
| · 适体的巯基修饰 | 第28-30页 |
| · 巯基标记产物电泳检测 | 第30页 |
| · 适体与纳米材料的固定 | 第30-31页 |
| · 带羧基的磁性纳米粒子与带氨基的核酸适体结合比例的确定 | 第30页 |
| · 在磁性纳米颗粒上固定核酸适配体Ⅰ | 第30页 |
| · 巯基标记核酸适体Ⅱ金胶探针制备结合比例的确定 | 第30-31页 |
| · 慢性粒细胞白血病K562细胞的培养 | 第31-32页 |
| · 细胞的传代培养 | 第31页 |
| · 细胞的冻存 | 第31-32页 |
| · 细胞的活化 | 第32页 |
| · 不同适体与慢性粒细胞白血病K562细胞结合位点的确定 | 第32-36页 |
| · 带羧基磁性纳米颗粒与核酸适体的结合物与慢性粒细胞白血病K562细胞结合及原子分光光度计对Fe含量测定 | 第32-34页 |
| · 巯基标记核酸适体的金胶探针与慢性粒细胞白血病K562细胞结合及Au元素含量的测定 | 第34-36页 |
| · 不同适体对慢性粒细胞白血病K562细胞的识别与结合位点的确定 | 第36页 |
| · 慢性粒细胞白血病K562细胞的特异性识别与分离及电化学检测最佳组合的筛查 | 第36-37页 |
| · 慢性粒细胞白血病K562细胞的特异性识别与分离 | 第37页 |
| · 电化学的检测及最佳组合的筛选 | 第37页 |
| · 适体检测方法灵敏度及检测限的测定 | 第37页 |
| · 核酸适体检测方法重复性试验 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-48页 |
| · 核酸适体扩增PCR结果 | 第38页 |
| · 氨基标记适体PCR结果 | 第38-39页 |
| · 巯基标记适体PCR结果 | 第39-40页 |
| · 带羧基的磁性纳米粒子与带氨基的核酸适体结合比例的确定 | 第40页 |
| · 巯基标记核酸适体Ⅱ金胶探针制备结合比例的确定 | 第40-41页 |
| · 原子吸收分光光度计测定Fe含量的标准曲线(如图7) | 第41-42页 |
| · 原子吸收分光光度计测定Au含量的标准曲线(如图8) | 第42页 |
| · 带羧基磁性纳米颗粒标记的核酸适体与CMLK562结合物中Fe含量 | 第42页 |
| · 带巯基的核酸适体与CMLK562结合物中Au含量 | 第42-43页 |
| · 不同核酸适体与CMLK562结合位点的确定结果 | 第43-47页 |
| · 核酸适体检测方法重复性试验结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 縮略词表 | 第55-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
