论文目录 | |
符号与缩写 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-26页 |
1.激光共聚焦扫描显微镜 | 第10-11页 |
2.落射荧光显微镜 | 第11-12页 |
3.细胞内钙离子 | 第12-16页 |
3.1 受体门控的钙通道 | 第13页 |
3.1.1 配体门控钙通道 | 第13页 |
3.1.2 G蛋白与钙通道偶联 | 第13页 |
3.1.3 受体与G蛋白偶联 | 第13页 |
3.2 胆碱受体分类及效应机制 | 第13-16页 |
3.2.1 M型胆碱受体 | 第14-15页 |
3.2.1.1 M受体的分布及作用 | 第14-15页 |
3.2.2 N胆碱受体 | 第15-16页 |
3.2.2.1 N受体的分布 | 第15-16页 |
3.2.2.2 N受体的信号传导通路 | 第16页 |
4.乙酰胆碱 | 第16-20页 |
4.1 乙酰胆碱作为外周神经递质的分布和作用 | 第16页 |
4.2 乙酰胆碱作为中枢神经递质的分布和作用 | 第16-17页 |
4.3 乙酰胆碱分析 | 第17-20页 |
4.3.1 物理化学测定法 | 第17-19页 |
4.3.2 生物测定法 | 第19-20页 |
5.参考文献 | 第20-26页 |
第一章 通过细胞内钙离子的荧光强度变化检测乙酰胆碱 | 第26-50页 |
1.1 引言 | 第26-27页 |
1.2 实验部分 | 第27-35页 |
1.2.1 实验仪器 | 第27-28页 |
1.2.2 材料与试剂 | 第28-30页 |
1.2.3 实验方法 | 第30-35页 |
1.2.3.1 高温灭菌 | 第30页 |
1.2.3.2 培养池的制作 | 第30-31页 |
1.2.3.3 细胞培养 | 第31页 |
1.2.3.4 细胞计数 | 第31-32页 |
1.2.3.5 通过细胞内游离Ca2+变化检测乙酰胆碱的基本过程 | 第32-34页 |
1.2.3.6 激光共聚焦荧光显微镜检测荧光强度 | 第34页 |
1.2.3.7 落射激光诱导荧光显微镜检测荧光强度 | 第34-35页 |
1.3 结果和讨论 | 第35-47页 |
1.3.1 细胞贴壁条件 | 第35-36页 |
1.3.1.1 细胞密度 | 第35页 |
1.3.1.2 细胞贴壁 | 第35-36页 |
1.3.2 检测条件 | 第36-38页 |
1.3.2.1 滤光片的选择 | 第36-37页 |
1.3.2.2 增强增益的选择 | 第37-38页 |
1.3.3 荧光探针负载 | 第38-41页 |
1.3.3.1 荧光探针浓度的选择 | 第38-40页 |
1.3.3.2 荧光探针负载时间的选择 | 第40-41页 |
1.3.4 药物(Ach)对胃癌细胞刺激的检测 | 第41-47页 |
1.3.4.1 激光共聚焦荧光显微镜检测不同时间胃癌细胞的荧光强度 | 第41-43页 |
1.3.4.2 落射荧光显微镜检测胃癌细胞刺激前后的荧光强度 | 第43-44页 |
1.3.4.3 大量胃癌细胞刺激后乙酰胆碱的线性关系 | 第44-46页 |
1.3.4.4 乙酰胆碱对大量胃癌细胞刺激后检测的重现性 | 第46页 |
1.3.4.5 乙酰胆碱对大量胃癌细胞刺激后检测的检测限 | 第46-47页 |
1.4 结论 | 第47页 |
1.5 参考文献 | 第47-50页 |
第二章 微流控技术结合单细胞传感器检测乙酰胆碱 | 第50-63页 |
2.1 引言 | 第50-52页 |
2.2 实验部分 | 第52-58页 |
2.2.1 实验仪器 | 第52-53页 |
2.2.2 材料与试剂 | 第53-54页 |
2.2.3 实验方法 | 第54-58页 |
2.2.3.1 微流控芯片的制作 | 第54-57页 |
2.2.3.1.1 光刻与蚀刻 | 第54-55页 |
2.2.3.1.2 PDMS膜的浇注 | 第55-56页 |
2.2.3.1.3 PDMS膜的改性及封接 | 第56-57页 |
2.2.3.2 灭菌、细胞培养及计数 | 第57页 |
2.2.3.3 单细胞进样和检测 | 第57-58页 |
2.3 结果和讨论 | 第58-60页 |
2.3.1 细胞贴壁条件 | 第58页 |
2.3.2 检测条件 | 第58页 |
2.3.3 荧光探针负载条件 | 第58页 |
2.3.4 药物(Ach)对胃癌细胞刺激的检测 | 第58-60页 |
2.3.4.1 检测胃癌细胞的荧光强度的时间选择 | 第58页 |
2.3.4.2 单个胃癌细胞对乙酰胆碱刺激的响应 | 第58-60页 |
2.4 结论 | 第60页 |
2.5 参考文献 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |