毕赤酵母表达重组wPDI的酶学性质及其在面制品加工中的应用

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毕赤酵母表达重组wPDI的酶学性质及其在面制品加工中的应用

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毕赤酵母表达重组wPDI的酶学性质及其在面制品加工中的应用

论文目录
摘要	第1-6页
Abstract	第6-12页
第一章绪论	第12-25页
1.1 引言	第12-13页
1.2 蛋白质二硫键异构酶概述	第13-18页
1.2.1 PDI的分布与基本性质	第13页
1.2.2 PDI的结构特点	第13-14页
1.2.3 PDI的酶学性质	第14-15页
1.2.4 PDI的分子伴侣活性	第15-16页
1.2.5 PDI活性位点氧化还原状态对分子伴侣活性的影响	第16-17页
1.2.6 PDI在面粉工业中的应用	第17-18页
1.3 毕赤酵母表达系统概述	第18-21页
1.3.1 毕赤酵母表达系统	第18-20页
1.3.2 影响毕赤酵母表达外源蛋白的因素	第20-21页
1.3.3 毕赤酵母表达系统和大肠杆菌表达系统的比较	第21页
1.4 氧化还原剂在饼干制作中的应用	第21-23页
1.5 本课题研究的意义与内容	第23-25页
1.5.1 研究意义	第23页
1.5.2 研究内容	第23-25页
第二章 wPDI真核表达载体构建	第25-35页
2.1 引言	第25页
2.2 实验材料及仪器设备	第25-27页
2.2.1 主要菌株和质粒	第25页
2.2.2 主要仪器设备	第25页
2.2.3 主要实验试剂	第25页
2.2.4 主要试剂及培养基的配制	第25-27页
2.3 实验方法	第27-30页
2.3.1 wPDI毕赤酵母表达载体的构建	第27-30页
2.4 结果与讨论	第30-34页
2.4.1 wpdi的PCR扩增结果	第30-31页
2.4.2 阳性重组表达质粒的构建结果	第31-34页
2.5 本章小结	第34-35页
第三章重组w PDI的诱导表达及表达条件优化	第35-54页
3.1 引言	第35页
3.2 实验材料及仪器设备	第35-40页
3.2.1 主要菌株和质粒	第35页
3.2.2 主要仪器设备	第35页
3.2.3 主要实验试剂	第35页
3.2.4 常用试剂及培养基的配制	第35-40页
3.3 实验方法	第40-46页
3.3.1 重组质粒pPIC9K-wpdi的大量提取	第40页
3.3.2 重组质粒pPIC9K-wpdi的线性化及纯化	第40页
3.3.3 线性化重组质粒电转化入毕赤酵母GS115	第40-41页
3.3.4 重组毕赤酵母阳性转化子筛选	第41-42页
3.3.5 重组毕赤酵母基因组PCR鉴定	第42页
3.3.6 重组wPDI的表达菌株筛选	第42-43页
3.3.7 重组wPDI的鉴定	第43-44页
3.3.8 重组wPDI还原酶活性测定	第44-45页
3.3.9 重组wPDI的诱导表达条件优化	第45-46页
3.4 结果与讨论	第46-53页
3.4.1 重组质粒的线性化	第46-47页
3.4.2 毕赤酵母阳性转化子的筛选	第47页
3.4.3 毕赤酵母阳性转化子基因组PCR鉴定	第47页
3.4.4 重组蛋白的表达菌株筛选	第47-48页
3.4.5 重组蛋白的诱导表达条件优化	第48-53页
3.5 本章小结	第53-54页
第四章重组w PDI的纯化及酶学性质比较	第54-71页
4.1 引言	第54页
4.2 实验材料及仪器设备	第54-56页
4.2.1 主要菌株与质粒	第54页
4.2.2 主要仪器设备	第54页
4.2.3 主要实验试剂	第54-55页
4.2.4 主要溶液的配制	第55-56页
4.3 实验方法	第56-61页
4.3.1 毕赤酵母重组wPDI的大量表达及纯化	第56-57页
4.3.2 大肠杆菌重组wPDI的大量表达及纯化	第57-59页
4.3.3 重组wPDI的活性测定	第59-61页
4.3.4 重组wPDI的内源荧光光谱分析	第61页
4.4 实验结果	第61-69页
4.4.1 wPDI的纯化结果分析	第61-63页
4.4.2 重组wPDI的活性测定及比较	第63-69页
4.5 本章小结	第69-71页
第五章重组w PDI对面粉加工品质的影响	第71-79页
5.1 引言	第71页
5.2 实验材料及仪器设备	第71-72页
5.2.1 主要仪器设备	第71页
5.2.2 主要试剂	第71-72页
5.3 实验方法	第72-74页
5.3.1 重组wPDI对面粉粉质特性的影响	第72页
5.3.2 重组wPDI对饼干加工品质的影响	第72-74页
5.3.3 数据分析	第74页
5.4 实验结果	第74-78页
5.4.1 重组wPDI对面粉粉质特性的影响	第74-76页
5.4.2 重组wPDI对饼干品质的影响	第76-78页
5.5 本章小结	第78-79页
结论与展望	第79-81页
一、结论	第79页
二、研究创新点	第79-80页
三、展望	第80-81页
参考文献	第81-90页
攻读硕士学位期间取得的研究成果	第90-91页
致谢	第91-92页
附件	第92页

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