论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 绪论 | 第10-17页 |
1.1 猪圆环病毒(PCV)概述 | 第10页 |
1.2 2 型猪圆环病毒(PCV2)基因组结构及编码蛋白 | 第10-12页 |
1.2.1 PCV2的基因组结构 | 第10-11页 |
1.2.2 PCV2编码的蛋白 | 第11-12页 |
1.3 PCV2相关疾病及致病机理 | 第12-13页 |
1.3.1 PCV2的相关疾病 | 第12-13页 |
1.3.2 PCV2的致病机理 | 第13页 |
1.4 PCV2疫苗的研究进展 | 第13-15页 |
1.4.1 PCV2病毒灭活疫苗 | 第13页 |
1.4.2 PCV2弱毒疫苗 | 第13-14页 |
1.4.3 PCV2基因工程疫苗 | 第14-15页 |
1.5 PCV2-Cap蛋白表达的研究进展 | 第15页 |
1.6 论文研究的主要内容 | 第15-17页 |
1.6.1 研究内容 | 第15-16页 |
1.6.2 研究意义 | 第16-17页 |
第二章 猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及纯化 | 第17-34页 |
2.1 引言 | 第17页 |
2.2 实验材料与设备 | 第17-22页 |
2.2.1 质粒与菌种 | 第17-18页 |
2.2.2 引物设计 | 第18页 |
2.2.3 实验材料 | 第18-20页 |
2.2.4 实验设备 | 第20-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-29页 |
2.3.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建 | 第22-27页 |
2.3.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达菌株的诱导表达 | 第27页 |
2.3.3 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达的鉴定及纯化 | 第27-29页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第29-33页 |
2.4.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建与鉴定 | 第29-31页 |
2.4.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白的SDS-PAGE、Western Blot检测 | 第31-32页 |
2.4.3 猪圆环病毒2型Cap蛋白的His亲和层析纯化 | 第32-33页 |
2.5 本章小结 | 第33-34页 |
第三章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第34-53页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 实验材料与设备 | 第34-36页 |
3.2.1 质粒与菌种 | 第34-35页 |
3.2.2 引物设计 | 第35页 |
3.2.3 实验材料 | 第35-36页 |
3.2.4 实验设备 | 第36页 |
3.3 实验方法 | 第36-46页 |
3.3.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达载体的构建 | 第36-40页 |
3.3.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白表达载体电转化毕赤酵母宿主 | 第40-43页 |
3.3.3 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达菌株的甲醇诱导 | 第43页 |
3.3.4 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的鉴定分析 | 第43页 |
3.3.5 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的发酵小试 | 第43-44页 |
3.3.6 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的动物免疫实验 | 第44-46页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第46-51页 |
3.4.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达载体的构建 | 第46-48页 |
3.4.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达毕赤酵母重组子直接PCR鉴定 | 第48页 |
3.4.3 毕赤酵母表达重组PCV2-Cap蛋白的SDS-PAGE、Western Blot检测 | 第48-49页 |
3.4.4 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达的高密度发酵小试 | 第49-50页 |
3.4.5 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的动物免疫实验研究 | 第50-51页 |
3.5 本章小结 | 第51-53页 |
第四章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在黑曲霉中的表达研究 | 第53-69页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 实验材料与设备 | 第53-56页 |
4.2.1 质粒与菌种 | 第53-54页 |
4.2.2 引物设计 | 第54页 |
4.2.3 实验材料 | 第54-56页 |
4.2.4 实验设备 | 第56页 |
4.3 实验方法 | 第56-62页 |
4.3.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白黑曲霉表达载体的构建 | 第56-60页 |
4.3.2 原生质体法转化猪圆环病毒2型Cap基因 | 第60-62页 |
4.3.3 黑曲霉表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的摇瓶发酵及鉴定 | 第62页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第62-67页 |
4.4.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建与鉴定 | 第62-64页 |
4.4.2 猪圆环病毒2型Cap基因原生质体法转化无孢黑曲霉的结果 | 第64-65页 |
4.4.3 黑曲霉表达猪圆环病毒2型Cap基因转化子提基因组PCR验证 | 第65-66页 |
4.4.4 黑曲霉猪圆环病毒2型Cap表达菌株发酵产物的检测与纯化 | 第66-67页 |
4.5 本章小结 | 第67-69页 |
结论与展望 | 第69-72页 |
结论 | 第69-70页 |
展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
附件 | 第79页 |