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牛胶原蛋白三维载体支架的制备及其与人角膜基质细胞的生物相容性研究
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牛胶原蛋白三维载体支架的制备及其与人角膜基质细胞的生物相容性研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-21页
　　1 角膜的结构与功能第13-16页
　　　　· 角膜结构第13-15页
　　　　　　· 角膜上皮层第13-14页
　　　　　　· 角膜内皮层第14页
　　　　　　· 角膜基质层第14-15页
　　　　· 角膜功能第15-16页
　　　　　　· 保护功能第15页
　　　　　　· 光的传播功能第15-16页
　　2 角膜组织工程概述第16-21页
　　　　· 角膜上皮层的构建第17-18页
　　　　· 角膜基质层的构建第18-19页
　　　　· 角膜内皮层的构建第19页
　　　　· 种子细胞第19-21页
第二章 牛胶原蛋白载体支架的制备和鉴定第21-33页
　　1 实验仪器和材料第21-24页
　　　　· 实验仪器第21页
　　　　· 实验材料与试剂第21-22页
　　　　　　· 实验材料第21页
　　　　　　· 实验试剂第21-22页
　　　　· 主要溶液配制第22-24页
　　　　　　· PBS缓冲液配制第22页
　　　　　　· 交联剂第22页
　　　　　　· D-Hanks平衡盐溶液第22页
　　　　　　· 生理盐水配制第22-23页
　　　　　　· 伊红染液配制第23页
　　　　　　· 0.1 M的HCl溶液第23页
　　　　　　· 甲醛明胶溶液第23页
　　　　　　· HE染色所需溶液第23-24页
　　2 实验方法第24-27页
　　　　· 牛胶原蛋白提取第24页
　　　　· 牛胶原蛋白电泳检测第24-25页
　　　　· 牛胶原蛋白载体支架的制备第25页
　　　　· 牛胶原蛋白载体支架的检测第25-26页
　　　　　　· 透明度观察第25页
　　　　　　· 透光率检测第25页
　　　　　　· 含水量第25-26页
　　　　　　· 机械性能检测第26页
　　　　· 牛胶原蛋白载体支架组织结构检测第26-27页
　　　　　　· 牛胶原蛋白载体支架冰冻切片与HE染色第26页
　　　　　　· 超微结构第26-27页
　　3 实验结果第27-31页
　　　　· 牛胶原蛋白电泳检测结果第27页
　　　　· 牛胶原蛋白载体支架的理化性质第27-30页
　　　　　　· 外观观察第27-28页
　　　　　　· 透光率第28-29页
　　　　　　· 含水量第29页
　　　　　　· 机械性能第29-30页
　　　　· 牛胶原蛋白载体支架的组织结构第30-31页
　　　　　　· 牛胶原蛋白载体支架的HE染色结果第30页
　　　　　　· 超微结构观察结果第30-31页
　　4 讨论第31-32页
　　5 本章小结第32-33页
第三章 人角膜基质细胞的培养与鉴定第33-48页
　　1 材料与用品第33-35页
　　　　· 实验材料第33页
　　　　· 实验仪器第33-34页
　　　　· 实验试剂第34页
　　　　· 主要溶液配制第34-35页
　　　　　　· DMEM/F12(1：1)培养液的配制第34-35页
　　　　　　· D-Hanks平衡盐溶液第35页
　　　　　　· 0.25 %胰蛋白酶第35页
　　　　　　· 磷酸缓冲液第35页
　　　　　　· 吉姆萨染液第35页
　　2 实验方法第35-41页
　　　　· 人角膜细胞的体外扩增培养第35-36页
　　　　· 人角膜基质细胞的增殖特性分析第36页
　　　　· 人角膜细胞的核型分析第36-37页
　　　　· 人角膜基质细胞免疫化学检测第37-38页
　　　　· HCSC实时荧光定量PCR检测第38-41页
　　　　　　· 总RNA提取第38-39页
　　　　　　· cDNA的合成第39页
　　　　　　· PCR引物设计第39-40页
　　　　　　· 引物特异性验证第40页
　　　　　　· Real-time PCR扩增第40-41页
　　3 实验结果第41-44页
　　　　· 人角膜基质细胞的传代培养及形态观察第41页
　　　　· 人角膜基质细胞的增殖特性分析第41-42页
　　　　· 人角膜基质细胞的染色体组型分析第42-43页
　　　　· 人角膜基质细胞标志及功能蛋白表达第43页
　　　　· 人角膜基质细胞生长、增殖等相关因子表达情况第43-44页
　　　　　　· 提取得到的总RNA质量检测结果第43-44页
　　　　　　· 引物特异性检测第44页
　　4 讨论第44-46页
　　5 本章小结第46-48页
第四章 牛胶原蛋白三维载体支架与人角膜基质细胞第48-63页
　　1 实验仪器与材料第48-51页
　　　　· 实验材料第48页
　　　　· 实验仪器第48-49页
　　　　· 实验试剂第49页
　　　　· 主要溶液配制方法第49-51页
　　　　　　· 0.1 mol/L磷酸氢二钠水溶液第49-50页
　　　　　　· PBS缓冲液第50页
　　　　　　· 甲醛明胶溶液第50页
　　　　　　· 20 %蔗糖溶液第50页
　　　　　　· 伊红-苏木精染色所用溶液第50-51页
　　2 实验方法第51-55页
　　　　· 牛胶原蛋白载体支架的灭菌处理第51页
　　　　· 人角膜基质细胞的DiI标记第51页
　　　　· 人角膜基质细胞的接种和体外培养第51-52页
　　　　· 胶原蛋白载体支架的生物相容性检测第52-55页
　　　　　　· 载体支架浸提液对HCSC活力影响作用分析第52-53页
　　　　　　· 人角膜基质细胞与支架复合物的DiI荧光观察第53页
　　　　　　· 人角膜基质细胞与载体支架复合物的HE染色第53页
　　　　　　· 人角膜基质细胞与载体支架复合物的超微结构观察第53页
　　　　　　· 人角膜基质细胞与载体支架复合物的免疫荧光检测第53-54页
　　　　　　· 人角膜基质细胞与载体支架复合物的实时定量PCR检测第54-55页
　　3 结果第55-61页
　　　　· 浸提液法检测结果第55-57页
　　　　　　· 细胞形态学评价第55-56页
　　　　　　· 增殖能力检测结果第56-57页
　　　　· HE染色与荧光观察第57-58页
　　　　· 免疫组织化学检测第58页
　　　　· 超微结构观察第58-59页
　　　　· 载体支架中HCSC生长和增殖相关因子表达第59-61页
　　　　　　· 总RNA检测结果第59页
　　　　　　· 引物特异性检测结果第59-60页
　　　　　　· 实时荧光定量PCR第60-61页
　　4 讨论第61-62页
　　5 本章小结第62-63页
全文总结第63-64页
参考文献第64-69页
致谢第69-70页
个人简历第70页
在学期间发表的学术论文及专利第70页

本篇论文共70页，点击这进入下载页面。
 
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