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青稞查尔酮合酶基因的克隆与原核表达
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青稞查尔酮合酶基因的克隆与原核表达
论文目录
摘要
第1-6页
Abstract
第6-11页
第一章 文献综述
第11-21页
1 黄酮概述
第11-14页
· 基本结构及分类
第11-12页
· 生物学功能
第12-13页
· 代谢途径
第13-14页
2 查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)
第14-18页
· 查尔酮合酶蛋白结构及反应机理
第14-16页
· 查尔酮合成酶基因结构
第16页
· 查尔酮合成酶基因的进化
第16-17页
· 查尔酮合成酶基因表达的调控
第17页
· 查尔酮合成酶基因的转基因应用
第17-18页
3 大麦(青稞)
第18-19页
4 实验目的与意义及研究内容
第19-21页
第二章 青稞查尔酮合酶基因的克隆
第21-35页
· 材料与方法
第21-27页
· 材料
第21-22页
· 材料与菌株
第21页
· 主要试剂与药品
第21页
· 试剂的配置
第21-22页
· 主要仪器
第22页
· 方法
第22-27页
· 总RNA的提取
第22-23页
· 总RNA的纯度和浓度的检测
第23页
· 第一链cDNA的制备
第23-24页
· PCR扩增
第24页
· PCR产物的克隆
第24-25页
· 目的片段回收
第25页
· 连接与转化
第25-26页
· 阳性克隆的筛选和鉴定
第26-27页
2 结果与分析
第27-33页
· RNA完整性和纯度检测
第27页
· 同源克隆
第27-28页
· PCR扩增产物
第27-28页
· 生物信息学分析
第28-33页
· 碱基序列分析
第28-29页
· 氨基酸序列分析
第29-30页
· HvCHS蛋白一二级结构分析
第30-32页
· HvCHS蛋白三级结构分析
第32-33页
3 讨论
第33-35页
· RNA的提取
第33页
· 青稞查尔酮合酶基因的同源克隆
第33-35页
第三章 青稞查尔酮合酶基因的原核表达
第35-46页
1 材料与方法
第35-41页
· 材料
第35-36页
· 质粒与菌株
第35页
· 主要试剂
第35页
· 试剂的配置
第35-36页
· 实验仪器
第36页
· 方法
第36-41页
· CHS基因酶切引物设计
第36-37页
· PCR扩增
第37页
· PCR产物回收纯化
第37页
· CHS基因与T载体连接
第37页
· CHS基因转化与鉴定
第37页
· 原核表达载体的构建
第37-39页
· 重组蛋白的诱导表达
第39-40页
· SDS-PAGE电泳
第40-41页
2 结果
第41-43页
· 双酶切
第41-42页
· 青稞CHS基因的原核表达
第42-43页
· 青稞CHS基因的原核表达条件的优化
第43页
3 讨论
第43-46页
· 原核表达载体
第43-44页
· 载体构建
第44-45页
· 青稞HvCHS基因表达蛋白
第45-46页
第四章 结论与展望
第46-48页
1 结论
第46页
2 展望
第46-48页
参考文献
第48-55页
致谢
第55-57页
攻读硕士期间发表的学术论文
第57页
本篇论文共
57
页,
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