论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7
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| ABSTRACT | 第7-8
页 |
| 缩略词 | 第8-9
页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23
页 |
| 1 铁素营养研究进展 | 第9-14
页 |
| · 机理Ⅰ植物铁吸收机制及相关基因 | 第10-14
页 |
| · Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因——IRT基因 | 第10-13
页 |
| · 信号肽和可变区的研究进展 | 第13-14
页 |
| · 其他相关基因 | 第14
页 |
| 2 异源互补法在研究基因功能中的应用 | 第14-17
页 |
| · 酵母突变体的异源功能互补法原理 | 第15
页 |
| · 酵母突变体异源功能互补法的应用及研究进展 | 第15-17
页 |
| 3 进行亚细胞定位和动力学研究的方法 | 第17-21
页 |
| · 报告基因 | 第17-19
页 |
| · 苯乙烯类染料的原理及应用 | 第19-20
页 |
| · BFA的研究和应用 | 第20-21
页 |
| 4 本实验研究基础及技术路线 | 第21-23
页 |
| · 研究基础 | 第21-22
页 |
| · 技术路线 | 第22-23
页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-34
页 |
| 1 材料和试剂 | 第23-28
页 |
| · 菌株材料 | 第23
页 |
| · 植物材料 | 第23-24
页 |
| · 所用载体及引物 | 第24-25
页 |
| · 酶、抗生素、各类试剂及试剂盒 | 第25-26
页 |
| · 培养基 | 第26
页 |
| · 常用溶液和特殊药品配制 | 第26-27
页 |
| · 主要实验仪器 | 第27-28
页 |
| 2 实验方法 | 第28-34
页 |
| · MxIRT1基因突变的克隆及鉴定 | 第28-30
页 |
| · MxIRT1基因的功能验证 | 第30-34
页 |
| 第三章 结果分析 | 第34-62
页 |
| 1 去终止子、信号肽、可变区的克隆及表达载体构建 | 第34-39
页 |
| · 去除MxIRT1基因中的终止子 | 第34-35
页 |
| · 去除MxIRT1基因前端的信号肽序列 | 第35-36
页 |
| · Sal Ⅰ/Not Ⅰ双酶切去除MxIRT1中的可变区 | 第36
页 |
| · 将一系列MxIRT1构建到酵母表达载体pDBLeu | 第36-37
页 |
| · 构建好的pDBLeu载体转化不同酵母菌株 | 第37-38
页 |
| · 构建酵母表达载体pDR196系列的检测 | 第38-39
页 |
| · 构建好的pDR196载体转化不同酵母菌株 | 第39
页 |
| 2 MxIRT1的功能验证 | 第39-50
页 |
| · 对重金属离子Cd、Co、Ni的转运结合能力验证 | 第39-43
页 |
| · 转基因M3的异源互补功能验证及Cu~(2+)吸收含量的测定 | 第43-45
页 |
| · 转基因smf1的异源互补功能验证及Mn~(2+)吸收含量的测定 | 第45-47
页 |
| · 转基因Zrt1Zrt2的异源互补功能验证及Zn~(2+)吸收含量的测定 | 第47-49
页 |
| · 转基因DEY1453的异源互补功能验证及Fe~(2+)吸收含量的测定 | 第49-50
页 |
| 3 MxIRT1的酵母亚细胞定位 | 第50-57
页 |
| · 半乳糖诱导型酵母表达载体pYES·-MxIRT1的检测及转化 | 第50-51
页 |
| · 转基因酵母的诱导培养 | 第51
页 |
| · MxIRT1的亚细胞定位 | 第51-57
页 |
| 4 MxIRT1基因转化机理Ⅰ植物烟草 | 第57-62
页 |
| · MxIRT1正、反连接到pCAMBIA1302酶切验证 | 第57-58
页 |
| · 转化农杆菌及PCR鉴定 | 第58-59
页 |
| · 叶盘法转化烟草 | 第59-62
页 |
| 第四章 讨论 | 第62-70
页 |
| 1 MxIRT1对不同二价金属离子的作用 | 第62-67
页 |
| · 对二价重金属离子Cd、Co、Ni的吸收的作用 | 第62-64
页 |
| · 对Zn、Fe较显著的吸收作用 | 第64-65
页 |
| · 对Cu吸收的作用 | 第65
页 |
| · 对Mn基本不吸收 | 第65
页 |
| · ICP-MS实验中可能存在污染的分析及解决方法 | 第65-66
页 |
| · 终止子去除的前后比较 | 第66
页 |
| · 信号肽的作用 | 第66-67
页 |
| · 富含组氨酸的可变区的作用 | 第67
页 |
| 2 MxIRT1的亚细胞定位 | 第67-69
页 |
| · 培养基的优化 | 第67
页 |
| · FM4-64与GFP共定位分析 | 第67-69
页 |
| 3 MxIRT1在机理Ⅰ植物中的研究 | 第69-70
页 |
| 第五章 小结与展望 | 第70-71
页 |
| 1 小结: | 第70
页 |
| 2 展望: | 第70-71
页 |
| 参考文献 | 第71-76
页 |
| 致谢 | 第76-77
页 |
| 附录 | 第77-85页 |
