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喹赛多药理与毒理活性成分筛选研究

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喹赛多药理与毒理活性成分筛选研究
论文目录
 
摘要第1-11页
Abstract第11-14页
缩略词表第14-16页
1 前言第16-27页
  · 研究背景第16-24页
    · 喹赛多药理与毒理作用机制研究进展第16-22页
    · 细胞模型用于药物筛选的研究进展第22-24页
  · 研究内容第24-25页
  · 研究思路第25-26页
  · 研究意义第26-27页
2 材料和方法第27-44页
  · 细胞株第27页
  · 药品和试剂第27-30页
  · 主要仪器和设备第30-31页
  · 溶液配制第31-33页
  · 细胞的复苏、传代和冻存第33-34页
  · 总RNA的提取第34页
  · 总RNA纯度及完整性的检测第34页
  · 反转录反应第34-35页
  · 实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平第35-37页
  · Western Blot实验第37-40页
    · 细胞蛋白提取及蛋白浓度测定第37页
    · SDS-PAGE电泳第37-39页
    · Western blot第39-40页
  · 细胞活力的检测第40-43页
    · MTT法检测喹嗯啉类代谢物对L02细胞的活力影响第40-41页
    · 乳酸脱氢酶(LDH)释放测定第41-42页
    · 细胞内自由基(ROS)释放测定第42页
    · 细胞凋亡的检测第42-43页
  · 统计学分析第43-44页
3 结果第44-60页
  · 总RNA质量第44页
  · 喹赛多及其代谢物对EGF基因表达的时效量效关系第44-47页
    · 喹赛多对EGF基因表达的时效量效关系分析第44-45页
    · 喹赛多的主要代谢物对EGF mRNA表达的影响第45-46页
    · PI3K-Akt通路对EGF表达的调控第46-47页
  · 2μM喹赛多与细胞孵育后对ROS释放的影响第47-48页
  · 2gM喹赛多对FOXO1和P53 mRNA和蛋白表达的影响第48-50页
  · 2gM喹赛多对cyclin D1表达的影响第50-51页
  · 喹赛多及其代谢物对L02细胞剂量及时间依赖性毒性作用第51-52页
  · 喹嗯啉类代谢物对L02细胞中LDH释放的影响第52-53页
  · 喹赛多及其代谢物对ROS释放的影响第53-54页
  · 100μM喹赛多对FOXO1和P53表达的影响第54-57页
  · 喹赛多与EGF和FOXO1及p53表达的量效关系第57-58页
  · 100MM喹赛多对细胞凋亡的影响第58-60页
4 讨论第60-67页
  · 喹赛多及其代谢物药理与毒理活性大小第60页
  · 喹赛多促进ROS释放的时效量效及与Akt激活间的关系第60-64页
  · P53表达的量效关系以及p53表达和Akt激活间的关系第64-65页
  · FOXO1的量效关系以及FOXO1与Akt激活之间的关系第65-66页
  · 喹赛多的药理与毒理作用机理第66-67页
5 全文总结第67-68页
6 文献综述第68-79页
参考文献第79-92页
致谢第92-94页
附录第94-100页
  附录Ⅰ---研究生简介第94页
  附录Ⅱ--实时荧光PCR各基因扩增产物的溶解曲线分析结果第94-95页
  附录Ⅲ-实验过程中细胞培养的步骤第95-96页
  附录Ⅳ-实验过程中RNA的提取步骤第96-97页
  附录Ⅴ-BCA标曲的测定第97-98页
  对各答辩委员的答复书第98-100 页

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