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苦荞次生代谢关键酶F3H的原核表达与多克隆抗体制备

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苦荞次生代谢关键酶F3H的原核表达与多克隆抗体制备
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-27页
  · 植物次生代谢简介第11-18页
    · 植物次生代谢产物的分类第11页
    · 植物次生代谢产物的功能研究第11-14页
    · 植物次生代谢途径的研究进展第14-16页
    · 植物次生代谢的调节第16-18页
  · 黄酮类化合物的生物学研究进展第18-21页
    · 黄酮类化合物的结构第18页
    · 黄酮类化合物的生理活性第18-19页
    · 黄酮类化合物的合成途径第19-20页
    · 黄酮类化合物代谢途径的主要关键酶第20-21页
  · 黄酮-3-羟化酶研究进展第21-23页
    · F3H 基因的结构与功能第21页
    · F3H 蛋白的催化机制研究第21-22页
    · F3H 蛋白的表达调控第22-23页
  · 原核表达系统及包涵体纯化第23-25页
    · 外源基因表达系统第23页
    · 包涵体简介第23页
    · 包涵体形成因素第23-25页
    · 包涵体蛋白的溶解第25页
    · 包涵体蛋白的复性第25页
  · 多克隆抗体制备第25-26页
  · 研究的目的、意义及主要研究内容第26-27页
    · 研究的目的和意义第26页
    · 主要研究内容第26-27页
第二章 苦荞黄酮-3-羟化酶序列的生物信息学分析第27-33页
  · 实验材料第27页
  · 实验方法第27页
    · 苦荞黄酮-3-羟化酶基因的序列分析第27页
    · 苦荞黄酮-3-羟化酶的功能及结构预测第27页
    · 苦荞黄酮-3-羟化酶系统发育树的构建第27页
  · 实验结果第27-31页
    · 苦荞黄酮-3-羟化酶基因序列的分析第27-28页
    · 苦荞黄酮-3-羟化酶的功能及结构预测结果第28-30页
    · 苦荞 F3H 蛋白的系统发育树分析第30-31页
  · 讨论第31-33页
第三章 苦荞黄酮-3-羟化酶原核表达载体的构建第33-40页
  · 实验材料与试剂第33-34页
    · 菌种与质粒第33页
    · 主要的工具酶及试剂第33页
    · 主要实验仪器第33页
    · 主要溶液的配方第33-34页
  · 实验方法第34-38页
    · 引物设计第34页
    · 质粒 pET47b 与 pTriplEx2-TrF3H 的提取第34-35页
    · 黄酮-3-羟化酶基因截短体(TrF3H)序列的 PCR 扩增第35页
    · PCR 产物及载体 pET47b 的双酶切第35页
    · 切胶回收双酶切产物第35-36页
    · 载体与目的片段连接第36页
    · 连接产物转化 Top10第36-37页
    · 原核表达载体的筛选与鉴定第37-38页
  · 实验结果与分析第38-39页
    · 目标片段的 PCR 扩增第38页
    · 重组表达载体的双酶切鉴定第38-39页
  · 讨论第39-40页
第四章 目的基因的诱导表达及亲和纯化第40-50页
  · 实验材料第40-41页
    · 菌种与质粒第40页
    · 主要试剂第40页
    · 主要溶液的配制第40-41页
    · 主要实验仪器第41页
  · 实验方法第41-45页
    · 重组质粒转化表达载体第41页
    · 目的基因的诱导表达第41-42页
    · 目的蛋白 SDS-PAGE 检测第42-44页
    · 目的蛋白的可溶性分析第44页
    · 包涵体纯化第44页
    · 目的蛋白的钴离子螯合层析第44-45页
    · 包涵体复性第45页
    · 目的蛋白的 His-tag 鉴定第45页
  · 实验结果与分析第45-48页
    · 重组蛋白的诱导表达第45-46页
    · 重组蛋白的表达形式分析第46-47页
    · 包涵体的纯化第47页
    · 目的蛋白的 His 标签鉴定第47-48页
  · 讨论第48-50页
    · 原核表达宿主的选择第48-49页
    · 包涵体复性第49页
    · 目的蛋白的纯化第49-50页
第五章 TrF3H 的多克隆抗体制备及 western blotting 检测第50-54页
  · 实验材料第50-51页
    · 实验试剂第50页
    · 材料第50页
    · 主要实验仪器第50页
    · 主要溶液配制第50-51页
  · 实验方法第51-52页
    · 重组蛋白的浓度测定及多克隆抗体制备第51页
    · 苦荞中 F3H 的 Western blotting 分析第51-52页
  · 实验结果与分析第52-53页
    · 重组蛋白的浓度测定第52页
    · 多克隆抗体的 Western blotting 检测第52-53页
  · 讨论第53-54页
第六章 总结与展望第54-55页
  · 总结第54页
  · 展望第54-55页
参考文献第55-62页
附录第62-63页
致谢第63-64页
作者简介第64 页

本篇论文共64页,点击这进入下载页面
 
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