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重组人生长激素在大肠杆菌中分泌表达及其纯化的研究
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重组人生长激素在大肠杆菌中分泌表达及其纯化的研究
论文目录
摘要
第1-4页
Abstract
第4-5页
目录
第5-8页
缩略词表
第8-9页
第一部分:前言
第9-12页
第二部分:材料与方法
第12-25页
·材料
第12-16页
·菌种
第12页
·质粒
第12页
·培养基
第12页
·缓冲液
第12-13页
·工具酶
第13-14页
·抗体
第14页
·试剂及试剂盒
第14-15页
·仪器设备
第15-16页
·实验动物
第16页
·方法
第16-25页
·大肠杆菌质粒的小量提取
第16页
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
第16-17页
·DNA的限制性内切酶的双酶切
第17页
·DNA片段的连接
第17页
·DNA电泳分离
第17页
·DNA片段的回收和纯化
第17-18页
·DNA PCR扩增
第18-19页
·蛋白质的诱导表达
第19页
·表达产物的鉴定及表达水平分析
第19页
·蛋白质存在性质的鉴定
第19-20页
·重组蛋白在摇瓶水平表达条件的优化
第20-21页
·工程菌的发酵
第21-22页
·蛋白质的定量
第22页
·兔抗hGH多克隆抗体的制备
第22页
·抗体效价的测定——免疫双扩散法
第22-23页
·蛋白质纯化
第23-24页
·免疫印迹实验
第24页
·蛋白质银染纯度分析
第24-25页
第三部分:rhGH分泌型表达质粒的构建及其鉴定
第25-41页
·引言
第25页
·结果和分析
第25-36页
·rhGH分泌型表达质粒pET-ompA_3-hGH的构建
第25-28页
·重组质粒pET-ompA_3-hGH的鉴定
第28-29页
·rhGH标准品的定量
第29-31页
·溶菌酶浓度对周质蛋白提取效率的影响
第31-32页
·重组质粒pET-ompA_3-hGH在BL21(DE3)中表达产物的鉴定
第32-33页
·重组质粒pET-hGH的构建、鉴定和表达
第33-36页
·讨论
第36-40页
·本章小结
第40-41页
第四部分:工程菌在摇瓶水平诱导表达条件的优化
第41-49页
·引言
第41页
·结果和分析
第41-46页
·培养基成分对rhGH分泌表达量的影响
第41-43页
·诱导条件的优化
第43-45页
·工程菌优选条件下的生长曲线
第45-46页
·讨论
第46-47页
·本章小结
第47-49页
第五部分:工程菌的发酵
第49-55页
·引言
第49-50页
·结果与分析
第50-53页
·工程菌的稳定性检测
第50-52页
·工程菌在发酵水平目的蛋白表达情况
第52-53页
·讨论
第53-54页
·本章小结
第54-55页
第六部分:分泌型表达rhGH的纯化及其性质的研究
第55-62页
·引言
第55页
·结果与分析
第55-60页
·抗体的纯化及亲和层析柱的制备
第55-56页
·抗体亲和层析一步纯化周质中的rhGH
第56-58页
·纯化rhGH纯度的鉴定
第58-59页
·纯化rhGH相对分子量的测定
第59-60页
·纯化rhGH免疫活性的检测
第60页
·讨论
第60-61页
·本章小结
第61-62页
第七部分:总结
第62-64页
·本研究主要获得的结果
第62页
·本论文的创新之处
第62-63页
·需进一步研究的问题
第63-64页
论文部分参考文献
第64-69页
综述:rhGH在大肠杆菌周质中的分泌表达
第69-79页
致谢
第79-80页
发表学术论文目录
第80页
本篇论文共
80
页,
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。
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