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重组肠激酶包涵体的复性、纯化及其新型重组子的构建
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重组肠激酶包涵体的复性、纯化及其新型重组子的构建
论文目录
 
摘要第1-4 页
ABSTRACT第4-9 页
前言第9-11 页
第一章 文献综述第11-30 页
　　· 融合蛋白的切割及工具酶第11-13 页
　　　　· 融合蛋白的应用第11-12 页
　　　　· 融合蛋白的切割第12-13 页
　　　　· 融合蛋白切割常用的工具酶第13 页
　　· 肠激酶简介第13-19 页
　　　　· 肠激酶的研究历史第14-15 页
　　　　· 肠激酶的结构特点第15 页
　　　　· 肠激酶的酶学特点及理化特征第15-16 页
　　　　· 肠激酶的基因工程研究进展第16-18 页
　　　　· 肠激酶的酶活测定第18-19 页
　　· 包涵体的研究进展第19-24 页
　　　　· 包涵体的形成机制第19 页
　　　　· 蛋白质的体内折叠机制第19-20 页
　　　　· 包涵体的体外折叠机制第20-21 页
　　　　· 包涵体蛋白复性策略第21-24 页
　　· 亲和层析第24-27 页
　　　　· 亲和层析技术的产生与发展第24-25 页
　　　　· 亲和吸附介质第25-26 页
　　　　· 亲和纯化的操作方式第26 页
　　　　· 固定化金属离子亲和层析第26-27 页
　　· 相容质粒的共表达第27-29 页
　　　　· 共表达的应用第27-28 页
　　　　· 共表达的策略第28-29 页
　　· 本文的主要研究内容第29-30 页
第二章 肠激酶蛋白包涵体的复性与纯化第30-49 页
　　· 试验材料第30-31 页
　　　　· 菌种第30 页
　　　　· 试验试剂第30-31 页
　　　　· 主要试验仪器第31 页
　　· 实验方法第31-38 页
　　　　· 肠激酶蛋白的初步表达第31-32 页
　　　　· SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表达结果第32-34 页
　　　　· 上清液中肠激酶亲和层析分离第34-35 页
　　　　· 包涵体中目的蛋白的复性与纯化第35-36 页
　　　　· 融合蛋白的定量估算第36-37 页
　　　　· 纯化后目标蛋白收率的计算第37-38 页
　　· 结果与讨论第38-49 页
　　　　· 工程菌生长曲线测定第38 页
　　　　· 诱导表达产物的SDS-PAGE 鉴定第38-39 页
　　　　· 上清液中肠激酶亲和层析分离第39-40 页
　　　　· 包涵体中目的蛋白的复性与纯化第40-46 页
　　　　· 目标蛋白纯化后产量及收率第46-49 页
第三章 重组质粒pSB3K3-EK_L构建第49-65 页
　　· 实验材料第50-51 页
　　　　· 菌种和载体第50 页
　　　　· 实验试剂第50 页
　　　　· 实验仪器第50-51 页
　　· 实验方法第51-57 页
　　　　· 菌种活化及质粒提取第51 页
　　　　· 感受态细胞的制备第51 页
　　　　· 重组质粒pSB3K3-EK_L构建策略第51-55 页
　　　　· 肠激酶包涵体蛋白的表达变性复性第55-56 页
　　　　· 肠激酶的活性测定第56-57 页
　　· 结果与讨论第57-65 页
　　　　· EK_LPCR 扩增产物及酶切的电泳鉴定第57 页
　　　　· pSB3K3-8p 酶切鉴定及与PCR 产物双酶切切胶回收电泳鉴定第57-59 页
　　　　· 重组子的酶切鉴定第59 页
　　　　· 重组子的基因测序第59-62 页
　　　　· 不同条件对肠激酶蛋白活性的影响第62-65 页
第四章 结论与展望第65-67 页
　　· 结论第65-66 页
　　· 展望第66-67 页
参考文献第67-72 页
致谢第72 页

本篇论文共72页，点击这进入下载页面。
 
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