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BRD4小分子抑制剂JQ1治疗肝癌的实验研究

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BRD4小分子抑制剂JQ1治疗肝癌的实验研究
论文目录
 
前言第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-15页
第1章 文献综述第15-24页
  1.1 肝癌第15-16页
    1.1.1 肝癌的病理组织分型第15页
    1.1.2 肝癌的病因及发病机制第15-16页
    1.1.3 肝癌的治疗现状第16页
  1.2 表观遗传学和肝癌第16-18页
    1.2.1 DNA甲基化和肝癌第17页
    1.2.2 组蛋白修饰和肝癌第17-18页
    1.2.3 非编码RNA和肝癌第18页
  1.3 溴结构域蛋白第18-21页
    1.3.1 BET蛋白家族第19-20页
    1.3.2 BRD4第20-21页
  1.4 抑制BET家族蛋白的治疗潜力第21-24页
    1.4.1 抑制BRD4的治疗潜力第21-22页
    1.4.2 抑制BRD3和BRDT的治疗潜力第22-23页
    1.4.3 抑制BRD2的治疗潜力第23-24页
第2章 实验材料和方法第24-37页
  2.1 实验材料第24-26页
    2.1.1 实验细胞株第24页
    2.1.2 实验仪器第24-25页
    2.1.3 实验试剂第25-26页
  2.2 实验方法第26-37页
第一部分:体外实验第26-34页
    2.2.1 细胞培养第26页
    2.2.2 CCK8第26页
    2.2.3 细胞计数第26-27页
    2.2.4 细胞克隆形成实验第27页
    2.2.5 Brd U免疫荧光染色实验第27页
    2.2.6 FITC- Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡第27-28页
    2.2.7 Hoechst染色实验第28页
    2.2.8 细胞划痕实验第28-29页
    2.2.9 Transwell实验第29页
    2.2.10 PI流式细胞术检测细胞周期第29-30页
    2.2.11 q-PCR检测基因m RNA水平变化第30-32页
    2.2.12 Western blot检测蛋白表达情况第32-34页
第二部分:体内实验第34-37页
    2.2.13 小鼠肿瘤模型的建立第34页
    2.2.14 HE染色第34-35页
    2.2.15 免疫组化实验第35-36页
    2.2.16 TUNEL免疫荧光测凋亡第36-37页
第3章 实验结果第37-52页
  3.1 BRD4在肝癌组织和Hep G2细胞中高表达第37-39页
    3.1.1 BRD4在正常肝脏和肝癌组织中的表达第37页
    3.1.2 BRD4在肝癌不同病理分期中的表达第37-38页
    3.1.3 BRD4在不同肝癌细胞中的表达第38-39页
  3.2 JQ1抑制了Hep G2的细胞活力第39页
  3.3 JQ1抑制了Hep G2细胞的增殖第39-42页
    3.3.1 细胞生长计数实验检测JQ1对Hep G2细胞增殖的影响第39-40页
    3.3.2 平板克隆形成实验检测JQ1对Hep G2细胞增殖的影响第40-41页
    3.3.3 Brd U免疫荧光检测JQ1对Hep G2细胞增殖的影响第41-42页
  3.4 JQ1使Hep G2细胞发生G1期阻滞第42-44页
    3.4.1 流式细胞术检测JQ1对Hep G2细胞周期的影响第42页
    3.4.2 q-PCR检测周期相关基因m RNA水平变化第42-43页
    3.4.3 Western blot检测周期相关基因蛋白水平变化第43-44页
  3.5 JQ1诱导Hep G2细胞凋亡第44-46页
    3.5.1 FITC- Annexin V/PI流式细胞术检测JQ1对Hep G2细胞凋亡的影响第44-45页
    3.5.2 Hoechst染色法检测JQ1对Hep G2细胞凋亡的影响第45页
    3.5.3 q-PCR检测凋亡相关基因m RNA水平变化第45-46页
    3.5.4 Western blot检测凋亡相关基因蛋白水平变化第46页
  3.6 JQ1抑制了Hep G2细胞的迁移能力第46-48页
    3.6.1 细胞划痕实验检测JQ1对Hep G2细胞迁移的影响第46-47页
    3.6.2 Transwell实验检测JQ1对Hep G2细胞迁移的影响第47-48页
    3.6.3 Western blot检测迁移相关基因蛋白水平变化第48页
  3.7 体内实验第48-52页
    3.7.1 JQ1对小鼠肿瘤体积的影响第48-49页
    3.7.2 JQ1对小鼠体重的影响第49-50页
    3.7.3 HE染色观察JQ1对小鼠心肝脾肺肾的影响第50页
    3.7.4 免疫组化实验检测JQ1对小鼠c-Myc、Bcl-2、Bax、PCNA、MMP2、MMP9的影响第50-51页
    3.7.5 TUNEL免疫荧光检测JQ1对肿瘤细胞凋亡的影响第51-52页
第4章 讨论第52-55页
第5章 结论第55-56页
参考文献第56-65页
作者简介及在学期间取得的科研成果第65-66页
致谢第66页

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