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正山小种茶叶水溶性热稳定蛋白的分离纯化与表征

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正山小种茶叶水溶性热稳定蛋白的分离纯化与表征
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第1章 引言第12-20页
  1.1 茶叶研究现状第12-13页
  1.2 茶汤作用机制研究新视角第13-14页
  1.3 茶叶中相关蛋白质的研究现状第14-16页
    1.3.1 糖蛋白第14-15页
    1.3.2 多酚氧化酶第15-16页
  1.4 蛋白质纳米颗粒自组装行为第16-17页
  1.5 本课题的研究目的和意义第17-18页
  1.6 本课题的研究内容第18-20页
第2章 正山小种茶叶中水溶性热稳定蛋白确定及提取研究第20-44页
  2.1 引言第20页
  2.2 实验材料与方法第20-30页
    2.2.0 研究材料第20页
    2.2.1 主要试剂表第20-21页
    2.2.2 主要仪器与设备表第21-22页
    2.2.3 正山小种成品茶茶汤制备方法第22页
    2.2.4 超滤分离正山小种茶汤第22-23页
    2.2.5 正山小种鲜叶蛋白质的提取第23页
    2.2.6 正山小种鲜叶蛋白质提取条件的优化第23-25页
      2.2.6.1 提取缓冲液体系的选择第23-24页
      2.2.6.2 不同pH缓冲液对鲜叶蛋白提取的影响第24页
      2.2.6.3 不同料液比对鲜叶蛋白提取的影响第24页
      2.2.6.4 不同PVPP添加量对鲜叶蛋白提取的影响第24-25页
      2.2.6.5 不同尿素添加量对鲜叶蛋白提取的影响第25页
    2.2.7 微纳米颗粒粒径分布—动态光散射技术第25-26页
    2.2.8 微纳米颗粒稳定性测定—Zeta电位第26页
    2.2.9 蛋白质定量检测第26-29页
      2.2.9.1 蛋白质分子量鉴定—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第26-28页
      2.2.9.2 蛋白质含量测定—福林酚法第28-29页
    2.2.10 统计与分析方法第29-30页
  2.3 结果与分析第30-42页
    2.3.1 正山小种茶汤中微纳米颗粒性质第30-31页
    2.3.2 正山小种茶汤电泳图第31-32页
    2.3.3 正山小种茶汤超滤截留液、滤过液电泳图第32-33页
    2.3.4 正山小种鲜叶蛋白质电泳图第33-34页
    2.3.5 正山小种鲜叶中粗蛋白提取条件优化第34-42页
      2.3.5.1 提取缓冲液体系对鲜叶蛋白质提取的影响第35-36页
      2.3.5.2 提取缓冲液pH对鲜叶蛋白质提取的影响第36-37页
      2.3.5.3 料液比对鲜叶蛋白质提取的影响第37-38页
      2.3.5.4 PVPP添加量对鲜叶蛋白质提取的影响第38-40页
      2.3.5.5 尿素添加量对鲜叶蛋白质提取的影响第40-42页
    2.3.6 正山小种鲜叶蛋白粗提液的制备第42页
  2.4 本章小结第42-44页
第3章 正山小种茶叶水溶性热稳定蛋白的分离纯化及其在茶汤中状态的研究第44-63页
  3.1 引言第44页
  3.2 材料与方法第44-50页
    3.2.1 研究材料第44页
    3.2.2 主要试剂表第44页
    3.2.3 主要仪器与设备表第44-45页
    3.2.4 沉淀分离第45-47页
      3.2.4.1 硫酸铵沉降第45-46页
      3.2.4.2 乙醇沉降第46页
      3.2.4.3 透析第46-47页
    3.2.5 层析分离第47-49页
      3.2.5.1 正山小种鲜叶蛋白分离纯化-UNOsphere Q阴离子交换色谱第47-48页
      3.2.5.2 正山小种茶汤蛋白分离纯化—UNOsphere Q阴离子交换色谱第48页
      3.2.5.3 正山小种茶汤截留组分蛋白分离纯化—UNOsphere Q阴离子交换色谱第48-49页
    3.2.6 蛋白质定量检测第49页
      3.2.6.1 蛋白质分子量鉴定—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第49页
      3.2.6.2 蛋白质含量测定—福林酚法第49页
    3.2.7 多酚氧化酶活性测定第49-50页
    3.2.8 统计与分析方法第50页
  3.3 结果与分析第50-61页
    3.3.1 正山小种鲜叶粗提液的沉淀分离第50-52页
      3.3.1.1 硫酸铵分级沉降第50-51页
      3.3.1.2 乙醇分级沉降第51-52页
    3.3.2 正山小种鲜叶蛋白的分离纯化第52-56页
    3.3.3 水溶性热稳定蛋白在茶汤中状态的研究第56-61页
      3.3.3.1 水溶性热稳定蛋白在正山小种成品茶茶汤中状态的研究第56-58页
      3.3.3.2 水溶性热稳定蛋白在正山小种成品茶茶汤颗粒中状态的研究第58-61页
  3.4 本章小结第61-63页
第4章 正山小种蛋白表征、酶学性质研究及微纳米颗粒自组装的初步探索第63-85页
  4.1 引言第63页
  4.2 材料与方法第63-69页
    4.2.1 材料与试剂第63页
    4.2.2 主要仪器与设备第63-64页
    4.2.3 蛋白的浓缩—超滤第64页
    4.2.4 糖蛋白的鉴定—过碘酸-希夫(periodic acid-Schiff stain,PAS)染色法第64-65页
    4.2.5 蛋白质等电点的测定—等电聚焦第65-66页
    4.2.6 多酚氧化酶酶学性质的探究第66-67页
      4.2.6.1 多酚氧化酶活性测定第66页
      4.2.6.2 多酚氧化酶活性的最适温度第66页
      4.2.6.3 多酚氧化酶活性的最适pH第66-67页
      4.2.6.4 Cu~(2+)对多酚氧化酶活性的作用第67页
      4.2.6.5 抑制剂对多酚氧化酶活性的作用第67页
      4.2.6.6 多酚氧化酶动力学实验第67页
    4.2.7 观察微纳米颗粒形状—透射电镜技术第67-68页
    4.2.8 蛋白质微纳米颗粒自组装初步探索第68-69页
      4.2.8.1 微纳米颗粒粒径分布—动态光散射第68页
      4.2.8.2 微纳米颗粒稳定性测定—Zeta电位第68页
      4.2.8.3 溶液pH和时间、温度对P66蛋白聚集的影响第68-69页
    4.2.9 统计与分析方法第69页
  4.3 结果与分析第69-84页
    4.3.1 正山小种鲜叶蛋白的超滤浓缩第69-70页
    4.3.2 正山小种鲜叶糖蛋白的鉴定第70-73页
    4.3.3 正山小种鲜叶蛋白等电聚焦第73-74页
    4.3.4 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶活力的检测第74-75页
    4.3.5 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶性质研究第75-80页
      4.3.5.1 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的最适温度第75-76页
      4.3.5.2 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的最适pH第76-77页
      4.3.5.3 Cu~(2+)对正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的影响第77-78页
      4.3.5.4 抑制剂对正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的作用第78-79页
      4.3.5.5 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶动力学参数第79-80页
    4.3.6 正山小种鲜叶蛋白水溶液的透射电镜观察第80页
    4.3.7 正山小种鲜叶蛋白聚集行为的研究第80-83页
      4.3.7.1 选择最适溶液pH第81页
      4.3.7.2 选择最适恒温时间第81-83页
    4.3.8 正山小种鲜叶蛋白微纳米颗粒电镜观察第83-84页
  4.4 本章小结第84-85页
第五章 主要研究结论与展望第85-87页
  5.1 主要研究结论第85-86页
  5.2 研究展望第86-87页
参考文献第87-93页
致谢第93-94页

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