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地衣芽孢杆菌来源β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、改造及其表达

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地衣芽孢杆菌来源β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、改造及其表达
论文目录
 
摘要第1-8 页
Abstract第8-12 页
第一章 引言第12-29 页
  · β-葡聚糖概述第12 页
  · β-1,3-1,4-葡聚糖酶第12-17 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶分布第12-13 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶结构与性质第13-15 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶功能及应用第15 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆及表达研究第15-17 页
  · 原核表达系统——pET系统第17-18 页
    · pET系统概述第17 页
    · pET载体第17-18 页
    · pET宿主菌第18 页
  · 巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris(简写P.pastoris)表达系统第18-25 页
    · 巴斯德毕赤酵母表达系统的优势特点第18-19 页
    · 表达载体第19-22 页
    · 翻译后修饰及加工第22-23 页
    · P.pastoris发酵条件研究第23-24 页
    · P.pastoris发酵策略研究第24-25 页
  · 外源基因自身的改造方法第25-26 页
  · 存在问题及实验方案第26-28 页
  · 本研究目的及意义第28-29 页
第二章 天然菌株地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis EGW039产酶研究第29-33 页
  · 材料第29 页
  · 方法第29-30 页
    · 产酶培养基的优化第29 页
    · 发酵条件的优化第29-30 页
    · 酶活测定第30 页
  · 结果与分析第30-32 页
    · 不同碳氮源的影响第30-31 页
    · 发酵条件的优化第31-32 页
  · 讨论第32-33 页
第三章 原核表达:地衣芽孢杆菌B.licheniformis EGW039来源β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆及其在E.coli BL21(DE3)中表达第33-53 页
  · 材料第33-35 页
  · 方法第35-40 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆与重组载体的构建第35-38 页
    · 重组大肠杆菌的构建第38-39 页
    · 重组酶的诱导表达与SDS-PAGE第39 页
    · 重组酶的纯化第39-40 页
    · 重组酶的酶学性质第40 页
  · 结果与分析第40-51 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆第40-41 页
    · β-1,3-1,4-葡聚糖酶的序列分析和高级结构模拟第41-44 页
    · 重组表达载体的构建第44-47 页
    · 重组酶的SDS-PAGE第47 页
    · 重组酶的纯化第47-48 页
    · 重组酶的酶学性质第48-51 页
  · 讨论第51-53 页
    · 表达水平研究第51 页
    · 表达系统研究第51-52 页
    · 酶学性质研究第52-53 页
第四章 真核表达:β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因改造及其在P.pastoris GS115中表达第53-78 页
  · 材料第53-54 页
  · 方法第54-60 页
    · B.licheniformis EGW039来源β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因改造第54-55 页
    · 重组载体的构建第55-56 页
    · 重组酵母的构建第56-57 页
    · 重组酵母的产酶发酵第57-58 页
    · 发酵参数的检测第58-59 页
    · 重组酶的酶学性质第59 页
    · 酶解产物分析第59-60 页
  · 结果与分析第60-72 页
    · 密码子优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列分析第60-61 页
    · 重组表达载体的构建及验证第61-63 页
    · 重组酵母的构建第63 页
    · 重组酵母的产酶发酵第63-68 页
    · 重组酶的酶学性质第68-72 页
  · 讨论第72-78 页
    · 密码子优化第73 页
    · 表达载体、宿主菌株的优化选择第73 页
    · 重组酵母发酵罐水平上的条件优化第73-74 页
    · P.pastoris GS115/pPIC9K-M-eg1314高密度发酵的优势第74-75 页
    · 基因重组与表达策略研究第75-76 页
    · 提高表达产物稳定性的研究第76-78 页
第五章 结论与展望第78-80 页
  · 主要研究结果如下第78-79 页
  · 展望第79-80 页
参考文献第80-86 页
致谢第86-87 页
作者简历第87页

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