论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 小麦及小麦赤霉病 | 第10-11页 |
| 1.1.1 小麦赤霉病的防治 | 第10-11页 |
| 1.2 国内外的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.2.1 基因枪转化法 | 第11-12页 |
| 1.2.2 农杆菌转化法 | 第12-13页 |
| 1.2.3 农杆菌转化机制 | 第13-14页 |
| 1.2.4 影响农杆菌转化效率的因素 | 第14-15页 |
| 1.3 选择标记基因 | 第15-17页 |
| 1.3.1 选择标记基因Bar基因 | 第16页 |
| 1.3.2 筛选标记基因Pmi基因 | 第16-17页 |
| 1.4 抗小麦赤霉病基因 | 第17页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-24页 |
| 2.1.1 农杆菌菌株及载体 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 小麦材料 | 第20页 |
| 2.1.4 小麦叶片基因组DNA提取试剂 | 第20页 |
| 2.1.5 小麦麦穗RNA提取及RT-PCR试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.6 PCR扩增引物 | 第21-22页 |
| 2.1.7 小麦愈伤转化所用培养基 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 菌体鉴定 | 第24页 |
| 2.2.2 遗传转化及植物组织培养相关实验 | 第24-25页 |
| 2.2.3 小麦叶片基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.4 抗性植株的PCR鉴定 | 第26页 |
| 2.2.5 转基因小麦后代RNA的提取及RT-PCR鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.6 接种检测转基因小麦的赤霉病抗性 | 第28-30页 |
| 3 实验结果与分析 | 第30-47页 |
| 3.1 菌体PCR鉴定农杆菌转化子 | 第30页 |
| 3.2 X76、X13、Z9023和Y158对农杆菌转化的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 Pmi筛选体系与Bar筛选体系对农杆菌转化筛选的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 农杆菌介导的小麦遗传转化过程 | 第32-33页 |
| 3.5 农杆菌介导的转基因小麦的获得及分析 | 第33-41页 |
| 3.5.1 转CONP基因T_0-T_6代PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 3.5.2 转CNP基因T_0-T_5代PCR鉴定 | 第34-36页 |
| 3.5.3 转CONP和CNP基因T_6和T_5代RT-PCR | 第36页 |
| 3.5.4 转CONP与CNP基因T_6、T_5代抗性鉴定 | 第36-38页 |
| 3.5.5 转OAPAR基因T_0-T_4代PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3.5.6 转CHS7基因T_0-T_4代PCR鉴定 | 第39-41页 |
| 3.6 转基因材料的加代和分析 | 第41-47页 |
| 3.6.1 转Ech42基因T_5-T_6代PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.6.2 转Hvchi基因T_5-T_6代PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 3.6.3 转Ech42与Hvchi基因赤霉病抗性鉴定 | 第43-44页 |
| 3.6.4 转CONP基因T_3-T_4代PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 3.6.5 转CHS7基因T_3-T_4代PCR鉴定 | 第45-46页 |
| 3.6.6 Y158转CHS7基因T_2-T_3代PCR鉴定 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 阳性材料的获得 | 第47-48页 |
| 4.2 转化效率的提高 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
