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玫瑰RrMYB10及其拟南芥同源基因AtTT2的互作蛋白筛选及功能研究

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玫瑰RrMYB10及其拟南芥同源基因AtTT2的互作蛋白筛选及功能研究
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
第一部分 综述第12-20页
  1. 引言第12页
  2. 植物MYB转录因子家族第12-13页
  3. 植物中MYB基因的研究进展第13-17页
  3.1 MYB调控植物细胞的形态与模式建成第13-14页
  3.2 MYB参与应答外界环境与植物激素等刺激第14页
  3.3 MYB参与调节植物苯丙烷生物代谢途径第14-17页
  4. 拟南芥AtTT2基因研究进展第17-18页
  5. 研究的目的和意义第18-19页
  6. 研究技术路线第19-20页
第二部分 玫瑰RrMYB10的功能研究第20-30页
  1. 前言第20页
  2. 材料与方法第20-23页
  2.1 试验材料第20-21页
    2.1.1 植物材料与培养条件第20页
    2.1.2 菌株与载体第20-21页
    2.1.3 试验试剂第21页
    2.1.4 基本培养基及所需试剂配方第21页
  2.2 试验方法第21-23页
    2.2.1 RNA提取及反转录为cDNA第21-22页
    2.2.2 实时定量PCR第22页
    2.2.3 数据分析第22页
    2.2.4 RrMYB10亚细胞定位第22-23页
    2.2.5 转录组测序第23页
    2.2.6 RrMYB10启动子GUS载体构建第23页
  3. 结果分析第23-28页
  3.1 RrMYB10系统进化树分析第23-24页
  3.2 超量表达RrMYB10转基因早花烟草的表型鉴定第24-25页
  3.3 超量表达RrMYB10转基因早花烟草的花中类黄酮代谢途径相关酶的表达分析第25-26页
  3.4 RrMYB10亚细胞定位分析及其启动子GUS载体构建第26-28页
    3.4.1 RrMYB10基因及其启动子的克隆第26-27页
    3.4.2 RrMYB10 GFP载体和其启动子GUS载体双酶切验证第27页
    3.4.3 RrMYB10亚细胞定位第27-28页
  3.5 转录组测序分析第28页
  4. 讨论第28-30页
  4.1 超量表达RrMYB10转基因早花烟草的表型鉴定第28-29页
  4.2 超量表达RrMYB10转基因早花烟草的花中类黄酮代谢途径相关酶的表达分析第29页
  4.3 超量表达玫瑰RrMYB10转基因早花烟草的花转录组测序第29页
  4.4 RrMYB10启动子分析第29-30页
第三部分 玫瑰RrMYB10酵母双杂交筛库及筛到的互作蛋白的表型鉴定第30-43页
  1. 前言第30页
  2. 材料与方法第30-33页
  2.1 试验材料第30页
  2.2 培养基及其配方第30-32页
  2.3 试验方法第32-33页
    2.3.1 RrMYB10诱饵载体构建第32页
    2.3.2 重组质粒转化酵母菌株Y187及空PGADT7转化酵母菌株AH 109第32页
    2.3.3 RrMYB10自激活检测第32页
    2.3.4 RrMYB10酵母双杂交筛选拟南芥转录因子文库第32页
    2.3.5 X-α-Gal显色反应第32-33页
    2.3.6 筛到与RrMYB10互作的蛋白构建超量表达载体第33页
    2.3.7 超量表达互作蛋白基因转早花烟草的表型鉴定第33页
  3. 结果分析第33-40页
  3.1 RrMYB10基因的诱饵载体构建及转酵母菌株Y187第33-35页
  3.2 RrMYB10自激活检测第35页
  3.3 RrMYB10酵母双杂交筛选拟南芥转录因子文库第35-36页
  3.4 X-α-Gal显色反应第36-37页
  3.5 筛到与RrMYB10互作的蛋白构建超量表达载体第37-38页
  3.6 超量表达互作蛋白基因转早花烟草的表型鉴定第38-40页
  4. 讨论第40-43页
  4.1 RrMYB10酵母双杂交筛选互作蛋白第40-42页
  4.2 超量表达互作蛋白基因转早花烟草的表型鉴定第42-43页
第四部分 拟南芥中RrMYB10的同源基因AtTT2的酵母双杂交及相关基因BiFC载体构建第43-48页
  1. 前言第43页
  2. 试验材料与方法第43-44页
  2.1 试验材料第43页
  2.2 试验方法第43-44页
    2.2.1 AtTT2诱饵载体及其超表载体构建第43-44页
    2.2.2 重组质粒转化酵母菌株AH109第44页
    2.2.3 AtTT2自激活检测第44页
    2.2.4 AtTT2酵母双杂交及X-α-Gal显色反应第44页
    2.2.5 BiFC分析的载体构建第44页
  3. 结果分析第44-47页
  3.1 AtTT2基因克隆和其诱饵载体和超表载体构建第44-45页
  3.2 AtTT2酵母双杂交第45-46页
  3.3 相关基因BiFC分析的载体构建第46-47页
  4. 讨论第47-48页
第五部分 本文总结与前景展望第48-49页
参考文献第49-61页
附录第61-70页
致谢第70页

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