论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 植物病原体抗性反应机制的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1.1 番茄病害现状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 番茄常见病原体分类 | 第14页 |
| 1.1.3 抗病基因-无毒基因互作机理 | 第14页 |
| 1.1.4 植物的免疫防卫反应 | 第14-15页 |
| 1.1.5 番茄中抗病基因克隆 | 第15-16页 |
| 1.2 植物抗病防卫反应的基本信号通路 | 第16-19页 |
| 1.2.1 水杨酸信号转导途径 | 第16-17页 |
| 1.2.2 茉莉酸信号转导途径 | 第17-19页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.5 常用培养基的配置 | 第20-21页 |
| 2.1.6 常用抗生素的配置 | 第21-22页 |
| 2.1.7 溶液的配置 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 植物培养 | 第23页 |
| 2.2.2 转基因植物载体构建 | 第23-24页 |
| 2.2.2.1 大肠杆菌感受态制备 | 第24页 |
| 2.2.2.2 大肠杆菌转化 | 第24页 |
| 2.2.3 转基因番茄的获得 | 第24-26页 |
| 2.2.3.1 农杆菌感受态制备 | 第24-25页 |
| 2.2.3.2 双元载体转化到LB | 第25页 |
| 2.2.3.3 农杆菌介导番茄转化 | 第25-26页 |
| 2.2.4 病原体的分离与鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.4.1 分离前的准备工作 | 第26页 |
| 2.2.4.2 植物病原体的分离(以番茄叶霉病为例) | 第26-27页 |
| 2.2.4.3 植物病原体的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.4.4 植物病原体的保存 | 第28页 |
| 2.2.5 B.cinerea侵染番茄叶片 | 第28-29页 |
| 2.2.5.1 B.cinerea的培养与孢子的收集 | 第28页 |
| 2.2.5.2 B.cinerea侵染番茄离体叶片 | 第28-29页 |
| 2.2.5.3 B.cinerea侵染番茄活体叶片 | 第29页 |
| 2.2.6 C.fulvum侵染番茄叶片 | 第29页 |
| 2.2.6.1 C.fulvum的培养与孢子的收集 | 第29页 |
| 2.2.6.2 C.fulvum侵染番茄活体叶片 | 第29页 |
| 2.2.7 番茄基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.8 番茄叶片RNA的提取及定量PCR分析 | 第30-32页 |
| 2.2.8.1 TRIzoL试剂法提取番茄叶片总RNA | 第30页 |
| 2.2.8.2 单链cDNA的合成 | 第30-31页 |
| 2.2.8.3 荧光定量PCR分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.1 抗性基因时间表达差异统计 | 第32-34页 |
| 3.1.1 B.cinerea诱导的抗性基因表达 | 第32-33页 |
| 3.1.2 C.fulvum诱导的抗性基因表达 | 第33-34页 |
| 3.2 抗性基因空间表达差异统计 | 第34-36页 |
| 3.2.1 B.cinerea诱导的抗性基因表达 | 第34-35页 |
| 3.2.2 C.fulvum诱导的抗性基因表达 | 第35-36页 |
| 3.3 转基因番茄鉴定结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 4.1 抗性基因时空表达谱的构建 | 第37-39页 |
| 4.2 番茄转基因株系的构建 | 第39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
