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J亚群禽白血病病毒变动表位集成疫苗免疫原性及动物保护研究

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J亚群禽白血病病毒变动表位集成疫苗免疫原性及动物保护研究
论文目录
 
中文摘要第11-12页
英文摘要第12-15页
1 前言第15-26页
  1.1 J亚群禽白血病病原学第15-19页
    1.1.1 ALV-J病毒结构第16页
    1.1.2 ALV-J流行病学第16-17页
    1.1.3 ALV-J致病性及危害第17-18页
    1.1.4 ALV-J的预防和诊断第18-19页
  1.2 病毒抗原表位及表位疫苗第19-23页
    1.2.1 病毒抗原表位的概念第19页
    1.2.2 病毒抗原表位的筛选第19-21页
    1.2.3 病毒抗原表位疫苗的研究背景第21页
    1.2.4 病毒抗原表位疫苗的分类第21-22页
    1.2.5 病毒抗原表位疫苗的设计第22页
    1.2.6 病毒重组多表位疫苗构建第22-23页
  1.3 ALV-J疫苗研究第23页
  1.4 其他病毒表位疫苗的应用第23-24页
    1.4.1 狂犬病病毒表位疫苗第23-24页
    1.4.2 HIV病毒表位疫苗第24页
    1.4.3 猪瘟病毒表位疫苗第24页
  1.5 病毒表位疫苗发展前景第24-25页
  1.6 研究目的与意义第25-26页
2 材料与方法第26-41页
  2.1 材料第26-28页
    2.1.1 细胞第26页
    2.1.2 菌种及载体第26页
    2.1.3 病毒及试验动物第26页
    2.1.4 试验试剂第26-27页
    2.1.5 试验仪器第27页
    2.1.6 试验地点第27-28页
  2.2 方法第28-41页
    2.2.1 ALV-J抗原表位的筛选第28页
    2.2.2 多表位基因的串联合成第28页
    2.2.3 BL21(DE3)感受态细胞的制备第28-31页
    2.2.4 质粒转化第31页
    2.2.5 质粒提取第31-32页
    2.2.6 质粒酶切鉴定第32页
    2.2.7 重组菌的诱导表达第32页
    2.2.8 挑选最佳重组表达菌第32页
    2.2.9 表位蛋白的鉴定第32-33页
    2.2.10 表位蛋白的提取与纯化第33页
    2.2.11 表位蛋白的Westernblot验证第33-34页
    2.2.12 表位蛋白浓度测定第34-35页
    2.2.13 表位蛋白联合弗氏佐剂免疫动物免疫原性试验第35-36页
      2.2.13.1 抗体消长规律监测第35页
      2.2.13.2 动物生长情况监测第35-36页
    2.2.14 gp85质粒转化及酶切鉴定第36页
    2.2.15 gp85蛋白表达第36页
    2.2.16 gp85重组蛋白纯化、复性及鉴定第36-37页
      2.2.16.1 gp85重组蛋白纯化第36-37页
      2.2.16.2 gp85重组蛋白复性第37页
      2.2.16.3 Westernblot检测gp85重组蛋白第37页
    2.2.17 表位疫苗动物保护试验第37-40页
      2.2.17.1 抗体消长规律监测第38页
      2.2.17.2 动物生长情况监测第38页
      2.2.17.3 动物排毒情况检测第38页
      2.2.17.4 鸡体组织病毒含量检测第38-39页
      2.2.17.5 病理组织学病变观察第39-40页
    2.2.18 间接免疫荧光法(IFA)第40页
    2.2.19 体外病毒中和试验第40-41页
3 结果第41-59页
  3.1 ALV-J抗原表位的获得第41页
  3.2 ALV-J多表位基因串联合成与鉴定第41-43页
  3.3 ALV-J表位集成基因最佳表达菌的选定及蛋白诱导表达第43-44页
    3.3.1 ALV-J表位集成基因最佳表达菌的选定第43页
    3.3.2 ALV-J表位集成基因在大肠杆菌中的诱导表达第43-44页
  3.4 重组蛋白的纯化及Westernblot检测结果第44-45页
  3.5 ALV-J表位集成蛋白浓度第45页
  3.6 表位集成疫苗免疫原性检测结果第45-46页
    3.6.1 抗体消长规律监测结果第45-46页
    3.6.2 鸡群生长情况监测结果第46页
  3.7 gp85质粒鉴定第46-47页
  3.8 gp85蛋白在大肠杆菌中表达及纯化蛋白WB检测分析第47-48页
  3.9 动物保护试验结果第48-50页
    3.9.1 抗体消长规律监测结果第48-49页
    3.9.2 鸡群生长情况监测结果第49页
    3.9.3 动物保护率第49-50页
    3.9.4 PCR检测动物带毒情况第50页
  3.10 病理组织学病变第50-57页
    3.10.1 42日龄病理组织学观察第51-53页
    3.10.2 56日龄病理组织学观察第53-55页
    3.10.3 70日龄病理组织学观察第55-57页
  3.11 间接免疫荧光法(IFA)第57页
  3.12 病毒中和试验第57-59页
4 讨论第59-62页
5 结论第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
攻读硕士学位期间发表论文第72页

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