论文目录 | |
| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 非生物胁迫对植物的影响 | 第13-15页 |
| 1.1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第13页 |
| 1.1.2 盐胁迫对植物的影响 | 第13-15页 |
| 1.2 植物的非生物胁迫响应 | 第15-17页 |
| 1.2.1 植物抵御非生物胁迫的功能基因 | 第15-16页 |
| 1.2.1.1 渗透调节物质合成相关基因 | 第15页 |
| 1.2.1.2 编码抗逆蛋白相关基因 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物抵御非生物胁迫的转录因子 | 第16-17页 |
| 1.2.2.1 NAC转录因子 | 第16页 |
| 1.2.2.2 WRKY转录因子 | 第16-17页 |
| 1.2.2.3 DREB转录因子 | 第17页 |
| 1.3 ABA信号的功能 | 第17-18页 |
| 1.3.1 调控植物响应非生物胁迫 | 第17页 |
| 1.3.2 调节种子的休眠和萌发 | 第17页 |
| 1.3.3 调节植物衰老 | 第17-18页 |
| 1.3.4 调节气孔运动 | 第18页 |
| 1.3.5 调节根系构型 | 第18页 |
| 1.4 植物中MYB转录因子研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4.1 MYB转录因子的结构和分类 | 第18页 |
| 1.4.2 MYB转录因子的功能 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-35页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 载体 | 第20页 |
| 2.1.4 酶 | 第20页 |
| 2.1.5 引物及测序 | 第20页 |
| 2.1.6 试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.1.7 其他试剂和药品 | 第21页 |
| 2.1.8 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-35页 |
| 2.2.1 植物组织总RNA提取 | 第21-24页 |
| 2.2.2 RNA含量与纯度检测 | 第24页 |
| 2.2.3 植物RNA纯化(除DNA)的方法 | 第24页 |
| 2.2.4 配置第一链cDNA合成的反应液 | 第24页 |
| 2.2.5 cDNA模板的合成 | 第24-25页 |
| 2.2.6 基因扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.7 回收纯化DNA | 第26页 |
| 2.2.8 连接克隆载体 | 第26-27页 |
| 2.2.9 大肠杆菌的转化 | 第27页 |
| 2.2.10 测序 | 第27页 |
| 2.2.11 质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.12 双酶切反应 | 第28-29页 |
| 2.2.13 表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.14 农杆菌感受态细胞的转化 | 第30页 |
| 2.2.15 植物材料的种植及转化 | 第30-33页 |
| 2.2.16 植物基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.17 组织含水量的测定 | 第34页 |
| 2.2.18 生物信息学分析方法 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-51页 |
| 3.1 苹果MdMYB2基因的分子克隆及序列分析 | 第35-37页 |
| 3.1.1 MdMYB2基因的分子克隆 | 第35页 |
| 3.1.2 MdMYB2与其他物种中MYB2蛋白的进化树分析和氨基酸序列比对 | 第35-37页 |
| 3.2 MdMYB2基因的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.2.1 MdMYB2基因在不同苹果组织和器官中的表达 | 第37页 |
| 3.2.2 MdMYB2的启动子顺式作用元件分析 | 第37-38页 |
| 3.3 非生物胁迫和外源激素影响MdMYB2基因的表达 | 第38-39页 |
| 3.4 MdMYB2过量表达提高苹果愈伤组织对非生物胁迫的抗性 | 第39-42页 |
| 3.4.1 转基因苹果愈伤组织的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
| 3.4.2 MdMYB2过量表达提高苹果愈伤组织对盐胁迫的抗性 | 第40-41页 |
| 3.4.3 MdMYB2过量表达提高苹果愈伤组织对渗透胁迫的抗性 | 第41-42页 |
| 3.5 MdMYB2过量表达转基因苹果愈伤组织对ABA更敏感 | 第42-43页 |
| 3.6 异位表达MdMYB2提高拟南芥对非生物胁迫的抗性 | 第43-49页 |
| 3.6.1 异位表达MdMYB2的转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第43-44页 |
| 3.6.2 异位表达MdMYB2提高拟南芥幼苗对盐和渗透胁迫的抗性 | 第44-46页 |
| 3.6.3 异位表达MdMYB2提高拟南芥幼苗对PEG的抵抗能力 | 第46-48页 |
| 3.6.4 异位表达MdMYB2提高拟南芥成苗对干旱胁迫的抗性 | 第48-49页 |
| 3.7 异位表达MdMYB2转基因拟南芥幼苗对ABA更敏感 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 MdMYB2响应多种非生物胁迫 | 第51-52页 |
| 4.2 MdMYB2过量表达提高植株对ABA的敏感程度 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-64页 |
| 7 附录 | 第64-66页 |
| 8 致谢 | 第66-67页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第67页 |
