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集胞藻PCC 6803 FabG蛋白的功能研究
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集胞藻PCC 6803 FabG蛋白的功能研究
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 绪论第10-23页
　　1.1 蓝藻概述第10-13页
　　　　1.1.1 蓝藻生产化学品第10页
　　　　1.1.2 提高蓝藻生产化学品的策略第10-13页
　　　　　　1.1.2.1 提高蓝藻固定CO_2效率第10-11页
　　　　　　1.1.2.2 重新设计内源碳流的分配第11-12页
　　　　　　1.1.2.3 调整藻细胞内氧化还原平衡第12-13页
　　1.2 集胞藻PCC 6803概述第13-14页
　　　　1.2.1 集胞藻PCC 6803基因组第13页
　　　　1.2.2 集胞藻PCC 6803的诱变和突变株分离第13-14页
　　　　　　1.2.2.1 转化和接合转移第13-14页
　　　　　　1.2.2.2 突变株的构建和分离第14页
　　1.3 聚羟基脂肪酸酯(PHA)概述第14-19页
　　　　1.3.1 PHA的应用第15页
　　　　1.3.2 PHA生产选用的菌株第15-17页
　　　　　　1.3.2.1 野生型菌株生产PHA第16页
　　　　　　1.3.2.2 基因重组菌株生产PHA第16-17页
　　　　1.3.3 工业发酵生产PHA第17页
　　　　1.3.4 利用集胞藻PCC 6803生产PHB第17-19页
　　1.4 β-酮脂酰-酰基载体蛋白还原酶(FabG)的研究进展第19-21页
　　　　1.4.1 FabG在医药方面的研究进展第19-20页
　　　　1.4.2 FabG调控PHA合成机制研究进展第20-21页
　　　　1.4.3 FabG酶促反应动力学研究第21页
　　1.5 本论文的研究意义与内容第21-23页
第二章 SpFabG反应动力学研究第23-35页
　　2.1 前言第23页
　　2.2 实验材料第23-24页
　　　　2.2.1 实验仪器第23页
　　　　2.2.2 实验试剂及耗材第23-24页
　　　　2.2.3 培养基及相关溶液配制第24页
　　2.3 实验方法第24-28页
　　　　2.3.1 SpFabG的表达和纯化第24-26页
　　　　　　2.3.1.1 SpFabG大量诱导第25页
　　　　　　2.3.1.2 Ni-NTA亲和层析初步纯化第25页
　　　　　　2.3.1.3 FPLC进一步纯化第25页
　　　　　　2.3.1.4 蛋白浓度和纯度检测第25-26页
　　　　2.3.2 SpFabG催化乙酰乙酰CoA活性表征第26-28页
　　　　　　2.3.2.1 测定最适反应温度第26页
　　　　　　2.3.2.2 测定最适反应pH第26-27页
　　　　　　2.3.2.3 测定反应动力学参数第27-28页
　　2.4 结果与讨论第28-34页
　　　　2.4.1 FPLC纯化结果第28页
　　　　2.4.2 蛋白浓度和纯度第28-29页
　　　　2.4.3 最适反应温度第29-30页
　　　　2.4.4 最适反应pH第30页
　　　　2.4.5 反应动力学参数第30-34页
　　　　　　2.4.5.1 NADPH标准曲线第31页
　　　　　　2.4.5.2 不同乙酰乙酰CoA浓度下反应速度第31-32页
　　　　　　2.4.5.3 动力学参数的拟合第32-34页
　　2.5 本章小结第34-35页
第三章 突变藻株构建和生理生化研究第35-49页
　　3.1 前言第35页
　　3.2 实验材料第35-37页
　　　　3.2.1 实验仪器第35-36页
　　　　3.2.2 实验试剂及耗材第36页
　　　　3.2.3 培养基及相关溶液配制第36-37页
　　3.3 实验方法第37-43页
　　　　3.3.1 突变株的构建和鉴定第37-39页
　　　　　　3.3.1.1 构建质粒第37-39页
　　　　　　3.3.1.2 转化集胞藻PCC 6803第39页
　　　　　　3.3.1.3 突变株的PCR鉴定第39页
　　　　3.3.2 正常/缺氮培养条件下指标测定第39-43页
　　　　　　3.3.2.1 绘制生长曲线第40页
　　　　　　3.3.2.2 干重测定第40页
　　　　　　3.3.2.3 脂肪酸含量测定第40-41页
　　　　　　3.3.2.4 PHB含量测定第41页
　　　　　　3.3.2.5 蛋白质含量测定第41-42页
　　　　　　3.3.2.6 总糖含量测定第42-43页
　　3.4 结果与讨论第43-48页
　　　　3.4.1 突变株分离鉴定第43-44页
　　　　3.4.2 正常/缺氮培养藻株生理指标第44-48页
　　　　　　3.4.2.1 基因改造对藻生长的影响第44-45页
　　　　　　3.4.2.2 脂肪酸含量第45-46页
　　　　　　3.4.2.3 PHB含量第46-47页
　　　　　　3.4.2.4 蛋白含量第47-48页
　　　　　　3.4.2.5 总糖含量第48页
　　3.5 本章小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56页

本篇论文共56页，点击这进入下载页面。
 
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