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番鸭呼肠孤病毒S组基因序列分析及衣壳蛋白克隆表达

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番鸭呼肠孤病毒S组基因序列分析及衣壳蛋白克隆表达
论文目录
 
中文摘要第1-10 页
英文摘要第10-12 页
第一部分 引言第12-16 页
第二部分 禽(番鸭)呼肠孤病毒株S组基因序列分析第16-46 页
  材料与方法第16-22 页
    1 材料第16-18 页
      · 病毒第16 页
      · 非免疫番鸭胚第16 页
      · 主要试剂第16 页
      · 溶液配制第16-17 页
      · 引物第17-18 页
      · 主要仪器第18 页
    2 方法第18-22 页
      · 病毒的增殖及RNA的提取第18 页
      · 病毒RNA反转录和PCR扩增第18-19 页
      · PCR产物的回收与纯化第19 页
      · PCR产物的克隆第19-20 页
      · DRV-S组基因节段的序列测定第20-21 页
      · DRV-S组基因节段测序结果的联机检索分析第21 页
      · DRV-S组基因节段cDNA核苷酸、推导的氨基酸序列的比较及系统发生树的绘制第21-22 页
  结果与分析第22-41 页
    1 RT-PCR扩增结果第22-23 页
      · 对YH和YJL的S组基因的RT-PCR扩增结果第22 页
        · YH和YJL-S1基因的RT-PCR扩增第22 页
        · YJL-S2基因的RT-PCR扩增第22 页
        · YH和YJL-S3基因的RT-PCR扩增第22 页
        · YJL-S4基因的RT-PCR扩增第22 页
      · 对YB的S组基因的RT-PCR扩增结果第22-23 页
        · YB-S1基因的RT-PCR扩增第22 页
        · YB-S2基因的RT-PCR扩增第22 页
        · YB-S3基因的RT-PCR扩增第22 页
        · YB-S4基因的RT-PCR扩增第22-23 页
    2 YH、YJL和YB的S组基因的阳性质粒PCR鉴定第23-28 页
      · YH和YJL的S组基因的阳性质粒PCR鉴定第23 页
        · YH和YJL-S1基因的阳性质粒PCR鉴定第23 页
        · YJL-S2基因的阳性质粒PCR鉴定第23 页
        · YH和YJL-S3基因的阳性质粒鉴定第23 页
        · YJL-S4基因的阳性质粒PCR鉴定第23 页
      · YB的S组基因的阳性质粒PCR鉴定第23-28 页
        · YB-S1基因的阳性质粒PCR鉴定第23 页
        · YB-S2基因的阳性质粒PCR鉴定第23-24 页
        · YB-S3基因的阳性质粒PCR鉴定第24 页
        · YB-S4基因的阳性质粒PCR鉴定第24-28 页
    3 cDNA的序列测定第28-30 页
      · YH和YJL的S组基因cDNA的序列测定第28-29 页
        · YH、YJL-S1基因的序列测定第28 页
        · YJL-S2基因的序列测定第28 页
        · YH、YJL-S3基因的序列测定第28-29 页
        · YJL-S4基因的序列测定第29 页
      · YB的S组基因cDNA的序列测定第29-30 页
        · YB-S1基因的序列测定第29 页
        · YB-S2基因的序列测定第29 页
        · YB-S3基因的序列测定第29 页
        · YB-S4基因的序列测定第29-30 页
    4 测序结果的联机检索第30 页
    5 DRV核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第30-37 页
      · 编码σA蛋白的基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第30 页
      · 编码σNS蛋白的基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第30-31 页
      · 编码σB蛋白的基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第31 页
      · 具有多顺反子基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第31-37 页
        · YH、YJL-S1基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第31-32 页
        · YB-S4基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析第32-37 页
    6 DRV-S组基因系统发生树的建立第37-41 页
      · 编码σA蛋白的基因系统发生树的建立第37 页
      · 编码σNS蛋白的基因系统发生树的建立第37 页
      · 编码σB蛋白的基因系统发生树的建立第37-38 页
      · 编码σC蛋白的基因系统发生树的建立第38-41 页
  讨论第41-46 页
    1 YJL、YH-S1和YB-S4基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较第41-43 页
    2 YJL-S4和YB-S2基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较第43-44 页
    3 YJL-S2和YB-S1基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较第44-45 页
    4 YH,YJL和YB-S3基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较第45-46 页
第三部分 DRV-YB株的S3与S40RF2基因的原核表达第46-57 页
  材料与方法第46-53 页
    1 材料第46-48 页
      · 病毒第46 页
      · 主要试剂第46-47 页
      · 溶液配制第47 页
      · 引物第47-48 页
      · 主要仪器第48 页
    2 方法第48-53 页
      · 病毒增殖第48 页
      · 病毒RNA的提取和PCR扩增第48 页
      · PCR产物的回收、克隆及鉴定第48 页
      · 目的基因的原核表达第48-51 页
      · 表达产物σB和σC蛋白的生物学活性检测第51-53 页
  结果与分析第53-57 页
    1 对YB的S3和S40RF2基因RT-PCR扩增结果第53 页
      · YB-S40RF2基因的RT-PCR扩增第53 页
      · YB-S3基因的RT-PCR扩增第53 页
    2 YB的S3和S40RF2基因阳性质粒PCR鉴定第53-54 页
      · YB-S40RF2基因的阳性质粒PCR鉴定第53 页
      · YB-S3基因的阳性质粒PCR鉴定第53-54 页
    3 表达产物SDS-PAGE分析和Western-blotting分析第54-56 页
      · 诱导表达蛋白的分析第54-55 页
      · 表达产物的Western-blotting检测第55-56 页
    4 蛋白胶薄层扫描分析重组表达蛋白第56-57 页
讨论第57-59 页
结论第59-60 页
参考文献第60-64 页
附录第64-74 页
致谢第74-75 页
作者简介第75页

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