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荷花NnMYB4转录因子全长ORF克隆及功能分析

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荷花NnMYB4转录因子全长ORF克隆及功能分析
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词第11-12页
前言第12-13页
第一章 文献综述第13-25页
1 MYB转录因子研究进展第13-19页
  1.1 MYB转录因子的结构与分类第13-15页
  1.2 MYB转录因子的起源和进化第15-16页
  1.3 MYB转录因子的生物学功能第16-19页
    1.3.1 参与非生物和生物胁迫应答第16-17页
    1.3.2 调控细胞代谢和植物生长发育第17页
    1.3.3 调控植物次生代谢第17-19页
2 木质素研究进展第19-25页
  2.1 木质素的组成和生物合成第19-21页
    2.1.1 木质素的组成第19-20页
    2.1.2 木质素的生物合成第20-21页
  2.2 关键酶基因对木质素的调控作用第21-22页
  2.3 R2R3-MYB转录因子对木质素合成的调控作用第22-25页
第二章 荷花NnMYB4转录因子全长ORF的克隆及序列分析第25-35页
1 材料与方法第26-30页
  1.1 植物材料第26页
  1.2 试剂与仪器第26页
    1.2.1 试剂、菌株与载体第26页
    1.2.2 仪器设备第26页
  1.3 实验方法第26-30页
    1.3.1 ORF特异性引物设计第26-27页
    1.3.2 RNA提取第27页
    1.3.3 1st-Strand cDNA合成及检测第27-28页
    1.3.4 高保真ORF全长扩增第28-29页
    1.3.5 目的片段的连接转化第29页
    1.3.6 重组子筛选及测序第29-30页
    1.3.7 序列比对与进化树构建第30页
2 结果与分析第30-33页
  2.1 RNA提取质量与反转录效果检测第30页
  2.2 NnMYB4全长ORF的克隆第30-31页
  2.3 荷花NnMYB4氨基酸序列同源性比对第31-32页
  2.4 系统进化树构建第32-33页
3 讨论第33-35页
第三章 荷花NMYB4转录因子的表达特性及转录激活活性分析第35-45页
1 材料与方法第36-40页
  1.1 植物材料第36页
  1.2 试剂与仪器第36-37页
    1.2.1 主要试剂和菌株第36页
    1.2.2 仪器设备第36-37页
  1.3 实验方法第37-40页
    1.3.1 荷花总RNA提取及反转录第37页
    1.3.2 荷花NnMYB4基因的Real time-PCR分析第37页
    1.3.3 荷花NnMYB4的亚细胞定位转化载体构建第37-39页
    1.3.4 洋葱表皮细胞瞬时表达第39页
    1.3.5 显微镜观察第39页
    1.3.6 酵母表达载体构建第39页
    1.3.7 酵母感受态的制备与转化第39-40页
    1.3.8 阳性克隆筛选第40页
2 结果与分析第40-42页
  2.1 荷花NnMYB4组织定量表达特性第40-41页
  2.2 亚细胞定位分析第41页
  2.3 NnMYB4转录激活活性分析第41-42页
3 讨论第42-45页
第四章 荷花NnMYB4转录因子的功能分析第45-55页
1 材料与方法第46-50页
  1.1 植物材料第46页
  1.2 试剂与仪器第46页
    1.2.1 试剂及菌株第46页
    1.2.2 仪器设备第46页
  1.3 实验方法第46-50页
    1.3.1 NnMYB4正义表达载体的构建第46页
    1.3.2 拟南芥的遗传转化第46-47页
    1.3.3 转基因拟南芥的阳性筛选及分子鉴定第47页
    1.3.4 拟南芥横截面切片观察第47页
    1.3.5 细胞壁总木质素含量测定第47-48页
    1.3.6 木质素、纤维素合成关键酶基因的表达分析第48-50页
2 结果与分析第50-53页
  2.1 转基因拟南芥鉴定第50页
  2.2 转基因拟南芥表型及花序茎横截面观察第50-52页
  2.3 荷花NnMYB4转录因子对木质素合成的影响第52页
  2.4 转基因拟南芥木质素、纤维素合成关键酶基因表达量分析第52-53页
3 讨论第53-55页
全文结论第55-57页
创新点第57-59页
参考文献第59-71页
附录第71-81页
发表论文第81-83页
致谢第83页

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