论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 植物与疫霉菌互作机制的研究进展 | 第12-26页 |
| 1 卵菌引起的病害 | 第12页 |
| 2 卵菌生活史 | 第12页 |
| 3 卵菌效应分子 | 第12-13页 |
| 3.1 质外体效应分子 | 第12-13页 |
| 3.2 细胞质效应分子 | 第13页 |
| 4 植物的防御反应一病原菌 | 第13-16页 |
| 4.1 PAMPs触发的植物免疫反应(PAMPs-triggered immunity,PTI) | 第14页 |
| 4.2 效应分子触发的植物免疫反应(Effector-triggered immunity,ETI) | 第14-16页 |
| 5 疫霉菌与植物之间的互作 | 第16-19页 |
| 5.1 致病疫霉效应分子Avr1靶向sec5操控植物的免疫反应 | 第16页 |
| 5.2 大豆疫霉效应分子PsAvr3b模拟植物的防卫反应抑制因子而干扰寄主植物的防卫反应 | 第16-17页 |
| 5.3 致病疫霉RxLR效应分子PexRD2与MAPKKKε互作去阻断植物的免疫信号途径 | 第17页 |
| 5.4 大豆疫霉CRN效应分子靶向HSP基因的启动子改变其表达,从而促进大豆疫霉的侵染 | 第17-18页 |
| 5.5 大豆疫霉PSR1靶向PINP1干扰RNA途径从而促进病原菌在寄主植物的侵染 | 第18页 |
| 5.6 致病疫霉效应分子靶向植物蛋白PP1c,从而促进病原菌的侵染 | 第18-19页 |
| 6 总结与展望 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-26页 |
| 下篇 研究内容 | 第26-72页 |
| 第一章 无毒基因Avr1k的功能分析及其互作蛋白的筛选与验证 | 第28-54页 |
| 1 材料与方法 | 第29-34页 |
| 1.1 试剂及培养基 | 第29-30页 |
| 1.1.1 配制LB液体培养基及固体培养基 | 第29-30页 |
| 1.1.2 配制酵母培养基 | 第30页 |
| 1.2 Infusion技术构建载体 | 第30页 |
| 1.3 酵母双杂交试验 | 第30-31页 |
| 1.4 制备感受态细胞——大肠杆菌Jm109 | 第31-32页 |
| 1.5 制备感受态细胞农秆菌GV3101及其转化 | 第32-33页 |
| 1.6 烟草中目的基因表达蛋白检测 | 第33-34页 |
| 1.7 大肠杆菌中蛋白的表达 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-49页 |
| 2.1 Avr1k在侵染阶段上调表达 | 第34-35页 |
| 2.2 过表达Avr1k可以促进辣椒疫霉的侵染 | 第35页 |
| 2.3 诱饵蛋白pGBKT7:Avr1k酵母表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 2.4 诱饵蛋白Avr1k无自激活 | 第37页 |
| 2.5 效应分子Avr1k酵母双杂筛库结果 | 第37-44页 |
| 2.6 酵母双杂交验证Avr1k与GmPirin互作 | 第44-46页 |
| 2.7 原核表达蛋白 | 第46-47页 |
| 2.8 GST Pull-Down体外验证Avr1k与GmPirin互作 | 第47-48页 |
| 2.9 Avr1k第21-128和222-280位氨基酸是互作关键区域 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第二章 无毒基因Avr1k和GmPirin互作机制分析 | 第54-66页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 1.1 试剂及培养基 | 第55页 |
| 1.2 Infusion技术构建载体 | 第55页 |
| 1.3 制备感受态细胞——大肠杆菌DH5 α | 第55-56页 |
| 1.4 农杆菌介导的瞬时表达 | 第56页 |
| 1.5 辣椒疫霉侵染烟草 | 第56页 |
| 1.6 荧光定量PCR检测 | 第56-57页 |
| 1.7 烟草中瞬时表达目的基因的亚细胞定位观察 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-62页 |
| 2.1 GmPirin在大豆疫霉侵染大豆后期特异性上调表达 | 第58页 |
| 2.2 GmPirin是植物免疫反应的负调控因子 | 第58-59页 |
| 2.3 GmPirin可以抑制Bax触发的免疫反应 | 第59-60页 |
| 2.4 无毒基因Avr1k改变GmPirin亚细胞定位 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第三章 大豆疫霉效应分子Avh262和GmBip互作验证 | 第66-72页 |
| 1 材料与方法 | 第67页 |
| 1.1 试剂及培养基 | 第67页 |
| 1.2 供试植物材料和实验室菌株的保存和培养 | 第67页 |
| 1.3 Infusion技术构建载体 | 第67页 |
| 1.4 制备感受态细胞 | 第67页 |
| 1.5 农杆菌介导的瞬时表达 | 第67页 |
| 1.6 烟草中瞬时表达目的基因的亚细胞定位观察 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-69页 |
| 2.1 双分子荧光互补载体构建 | 第67-68页 |
| 2.2 效应分子Avh262和GmBiP1互作验证 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 附表 | 第72-74页 |
| 攻读硕士期间发表的研究论文 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
