论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1 菊花再生体系及遗传转化体系的研究进展 | 第13-18页 |
1.1 再生体系的建立 | 第13-14页 |
1.2 菊花遗传转化效率的影响因素 | 第14-16页 |
1.2.1 农杆菌菌株的选择 | 第14页 |
1.2.2 预培养 | 第14-15页 |
1.2.3 农杆菌浓度和侵染时间 | 第15页 |
1.2.4 抗生素的选用 | 第15页 |
1.2.5 共培养 | 第15页 |
1.2.6 延迟培养 | 第15-16页 |
1.3 菊花转基因研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 花色合成基因的转化 | 第16页 |
1.3.2 提高抗性的转基因 | 第16-17页 |
1.3.3 株型改良的转基因 | 第17页 |
1.3.4 改变菊花花期的基因工程 | 第17-18页 |
2 花色呈色机理 | 第18-21页 |
2.1 花的呈色机理 | 第18页 |
2.2 花色素的生物合成途径 | 第18-19页 |
2.3 影响蓝色花呈色的因素 | 第19-21页 |
2.3.1 花色素苷的种类及花色呈色 | 第19-20页 |
2.3.2 助色素与蓝色花色呈色 | 第20页 |
2.3.3 液泡pH | 第20-21页 |
3 花色基因工程研究进展 | 第21-24页 |
3.1 利用反义RNA和共抑制技术改良花色 | 第21-22页 |
3.2 引入外源物种基因 | 第22-23页 |
3.3 升高液泡的pH | 第23页 |
3.4 F3'5'H基因的转基因及蓝色花基因工程育种现状 | 第23-24页 |
4 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
第二章 菊花遗传转化体系的建立 | 第25-35页 |
1 试验材料 | 第26页 |
1.1 植物材料 | 第26页 |
1.2 主要化学试剂 | 第26页 |
1.3 实验仪器和设备 | 第26页 |
1.4 培养基与培养条件 | 第26页 |
2 试验方法 | 第26-28页 |
2.1 无菌苗的获得 | 第26-27页 |
2.2 菊花不定芽的分化 | 第27-28页 |
2.2.1 外植体和再生途径选择 | 第27页 |
2.2.2 直接诱导不定芽再生培养基的筛选 | 第27-28页 |
2.2.3 菊花组培苗的生根培养 | 第28页 |
2.3 抗生素的筛选试验 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-31页 |
3.1 直接诱导芽再生培养基对菊花不定芽再生的影响 | 第28-30页 |
3.2 抗生素浓度对菊花'南农粉羽'不定芽再生及生根的影响 | 第30-31页 |
3.2.1 不同浓度的潮霉素对菊花叶片不定芽再生的影响 | 第30页 |
3.2.2 不同浓度的潮霉素对菊花生根的影响 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-35页 |
4.1 影响菊花高频再生体系的因素 | 第31-32页 |
4.1.1 基因型 | 第31-32页 |
4.1.2 再生途径 | 第32页 |
4.1.3 激素组合对再生的影响 | 第32页 |
4.2 抗生素选择压对不定芽再生及生根的影响 | 第32-35页 |
第三章 VtF3'5'H基因转化'南农粉翠'的研究 | 第35-43页 |
1 试验材料 | 第35-37页 |
1.1 植物材料 | 第35-36页 |
1.2 菌株和植物表达载体 | 第36页 |
1.3 培养基 | 第36页 |
1.4 主要仪器及设备 | 第36-37页 |
2 试验方法 | 第37-40页 |
2.1 农杆菌的培养与活化 | 第37页 |
2.2 转化方法 | 第37页 |
2.3 转基因植株的获得 | 第37页 |
2.4 转基因菊花植株的PCR检测 | 第37-38页 |
2.4.1 总DNA的提取 | 第37页 |
2.4.2 PCR反应体系 | 第37-38页 |
2.5 转基因菊花中的RT-PCR检测 | 第38-40页 |
2.5.1 RNA的提取 | 第38页 |
2.5.2 反转录反应 | 第38-39页 |
2.5.3 RT-PCR反应 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-41页 |
3.1 VtF3'5'H转基因菊花的再生 | 第40页 |
3.2 转基因菊花中的PCR检测 | 第40-41页 |
3.3 转基因菊花中VtF3'5'H基因表达的RT-PCR检测 | 第41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
全文结论及创新点 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-55页 |
附录Ⅰ | 第55-56页 |
附录Ⅱ | 第56-57页 |
附录Ⅲ | 第57-58页 |
附录Ⅳ | 第58-59页 |
附录Ⅴ | 第59-61页 |
攻读学位期间发表论文、申请专利 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |