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菊花遗传转化体系建立及VtF3’5’H基因转化‘南农粉翠’的研究

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菊花遗传转化体系建立及VtF3’5’H基因转化‘南农粉翠’的研究
论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
英文缩略词表第10-11页
引言第11-13页
第一章 文献综述第13-25页
1 菊花再生体系及遗传转化体系的研究进展第13-18页
  1.1 再生体系的建立第13-14页
  1.2 菊花遗传转化效率的影响因素第14-16页
    1.2.1 农杆菌菌株的选择第14页
    1.2.2 预培养第14-15页
    1.2.3 农杆菌浓度和侵染时间第15页
    1.2.4 抗生素的选用第15页
    1.2.5 共培养第15页
    1.2.6 延迟培养第15-16页
  1.3 菊花转基因研究进展第16-18页
    1.3.1 花色合成基因的转化第16页
    1.3.2 提高抗性的转基因第16-17页
    1.3.3 株型改良的转基因第17页
    1.3.4 改变菊花花期的基因工程第17-18页
2 花色呈色机理第18-21页
  2.1 花的呈色机理第18页
  2.2 花色素的生物合成途径第18-19页
  2.3 影响蓝色花呈色的因素第19-21页
    2.3.1 花色素苷的种类及花色呈色第19-20页
    2.3.2 助色素与蓝色花色呈色第20页
    2.3.3 液泡pH第20-21页
3 花色基因工程研究进展第21-24页
  3.1 利用反义RNA和共抑制技术改良花色第21-22页
  3.2 引入外源物种基因第22-23页
  3.3 升高液泡的pH第23页
  3.4 F3'5'H基因的转基因及蓝色花基因工程育种现状第23-24页
4 本研究的目的意义第24-25页
第二章 菊花遗传转化体系的建立第25-35页
1 试验材料第26页
  1.1 植物材料第26页
  1.2 主要化学试剂第26页
  1.3 实验仪器和设备第26页
  1.4 培养基与培养条件第26页
2 试验方法第26-28页
  2.1 无菌苗的获得第26-27页
  2.2 菊花不定芽的分化第27-28页
    2.2.1 外植体和再生途径选择第27页
    2.2.2 直接诱导不定芽再生培养基的筛选第27-28页
    2.2.3 菊花组培苗的生根培养第28页
  2.3 抗生素的筛选试验第28页
3 结果与分析第28-31页
  3.1 直接诱导芽再生培养基对菊花不定芽再生的影响第28-30页
  3.2 抗生素浓度对菊花'南农粉羽'不定芽再生及生根的影响第30-31页
    3.2.1 不同浓度的潮霉素对菊花叶片不定芽再生的影响第30页
    3.2.2 不同浓度的潮霉素对菊花生根的影响第30-31页
4 讨论第31-35页
  4.1 影响菊花高频再生体系的因素第31-32页
    4.1.1 基因型第31-32页
    4.1.2 再生途径第32页
    4.1.3 激素组合对再生的影响第32页
  4.2 抗生素选择压对不定芽再生及生根的影响第32-35页
第三章 VtF3'5'H基因转化'南农粉翠'的研究第35-43页
1 试验材料第35-37页
  1.1 植物材料第35-36页
  1.2 菌株和植物表达载体第36页
  1.3 培养基第36页
  1.4 主要仪器及设备第36-37页
2 试验方法第37-40页
  2.1 农杆菌的培养与活化第37页
  2.2 转化方法第37页
  2.3 转基因植株的获得第37页
  2.4 转基因菊花植株的PCR检测第37-38页
    2.4.1 总DNA的提取第37页
    2.4.2 PCR反应体系第37-38页
  2.5 转基因菊花中的RT-PCR检测第38-40页
    2.5.1 RNA的提取第38页
    2.5.2 反转录反应第38-39页
    2.5.3 RT-PCR反应第39-40页
3 结果与分析第40-41页
  3.1 VtF3'5'H转基因菊花的再生第40页
  3.2 转基因菊花中的PCR检测第40-41页
  3.3 转基因菊花中VtF3'5'H基因表达的RT-PCR检测第41页
4 讨论第41-43页
全文结论及创新点第43-45页
参考文献第45-55页
附录Ⅰ第55-56页
附录Ⅱ第56-57页
附录Ⅲ第57-58页
附录Ⅳ第58-59页
附录Ⅴ第59-61页
攻读学位期间发表论文、申请专利第61-63页
致谢第63页

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