论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语中英文对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡 | 第11-21页 |
| 1. 卵泡闭锁 | 第11-13页 |
| 1.1 卵泡发育 | 第11页 |
| 1.2 卵泡闭锁 | 第11-12页 |
| 1.3 卵泡闭锁的原因 | 第12-13页 |
| 2. 颗粒细胞凋亡 | 第13-15页 |
| 2.1 颗粒细胞凋亡途径 | 第13页 |
| 2.2 颗粒细胞凋亡研究方法 | 第13-14页 |
| 2.3 颗粒细胞凋亡与氧化应激 | 第14-15页 |
| 3. 卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡的研究意义 | 第15-16页 |
| 参考文献 | 第16-21页 |
| 第二章 细胞自噬研究进展 | 第21-39页 |
| 1. 自噬分类和形成过程 | 第21-24页 |
| 1.1 自噬分类 | 第21-22页 |
| 1.2 自噬的形成过程 | 第22-24页 |
| 2. 自噬调控分子机制 | 第24-27页 |
| 2.1 Beclin 1 | 第25页 |
| 2.2 mTOR | 第25页 |
| 2.3 Foxo | 第25-26页 |
| 2.4 p53 | 第26-27页 |
| 3. 自噬与凋亡 | 第27页 |
| 4. 自噬与卵泡闭锁 | 第27-28页 |
| 5. 自噬检测方法 | 第28-31页 |
| 5.1 电镜检测 | 第29页 |
| 5.2 LC3检测 | 第29-30页 |
| 5.3 p62的检测 | 第30页 |
| 5.4 MDC染色 | 第30页 |
| 5.5 吖啶橙染色(AO) | 第30-31页 |
| 5.6 Keima标记检测 | 第31页 |
| 6. 自噬研究意义 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第三章 实验研究 氧化应激诱导猪卵巢颗粒细胞自噬及其对凋亡的作用 | 第39-70页 |
| 1. 前言 | 第39-40页 |
| 2. 材料与方法 | 第40-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-43页 |
| 2.1.1 实验动物组织 | 第40页 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 | 第40-41页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 2.1.4 RT-PCR引物 | 第41-42页 |
| 2.1.5 相关生物学数据库和软件 | 第42页 |
| 2.1.6 主要溶液配置 | 第42-43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-56页 |
| 2.2.1 分离猪卵泡及形态观察 | 第43页 |
| 2.2.2 颗粒细胞的培养及转染 | 第43-44页 |
| 2.2.3 实验处理 | 第44-45页 |
| 2.2.4 细胞总RNA提取 | 第45-46页 |
| 2.2.5 RNA反转录合成cDNA | 第46-47页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR | 第47页 |
| 2.2.7 流式细胞术 | 第47-48页 |
| 2.2.8 CCK8测定 | 第48页 |
| 2.2.9 质粒的转化和提取 | 第48-50页 |
| 2.2.9.1 质粒转化 | 第48-49页 |
| 2.2.9.2 质粒鉴定 | 第49页 |
| 2.2.9.3 质粒提取 | 第49-50页 |
| 2.2.9.4 质粒转染 | 第50页 |
| 2.2.10 免疫荧光 | 第50-52页 |
| 2.2.11 Western blot | 第52-56页 |
| 2.3 数据分析 | 第56页 |
| 3. 实验结果 | 第56-70页 |
| 3.1 氧化应激能诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡 | 第56-59页 |
| 3.2 氧化应激能诱导猪卵巢颗粒细胞自噬 | 第59-63页 |
| 3.3 抑制自噬能减少H_2O_2诱导的猪卵巢颗粒细胞凋亡 | 第63-67页 |
| 3.3.1 3-MA能抑制氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞自噬 | 第63-65页 |
| 3.3.2 3-MA能减少氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞凋亡和提高细胞活力 | 第65-67页 |
| 3.4 氧化应激诱导猪卵泡颗粒细胞自噬和凋亡的分子机制初探 | 第67-70页 |
| 3.4.1 mTOR可能参与了氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞自噬 | 第67-68页 |
| 3.4.2 Foxo1可能参与了猪卵泡颗粒细胞自噬的调节 | 第68-69页 |
| 3.4.3 胰岛素能显著抑制氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞自噬 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 全文结论 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第81页 |
