论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 前言 | 第11页 |
| 2 脂肪酶家族概述 | 第11-12页 |
| 3 脂蛋白脂肪酶研究进展 | 第12-19页 |
| 3.1 脂蛋白脂肪酶的发现 | 第12-13页 |
| 3.2 脂蛋白脂肪酶基因的结构和性质 | 第13-15页 |
| 3.3 脂蛋白脂肪酶基因的表达及其调控 | 第15-16页 |
| 3.4 脂蛋白脂肪酶基因突变性研究 | 第16-18页 |
| 3.5 催化活性测定方法 | 第18-19页 |
| 4 实验目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 鲤鱼两种脂蛋白脂肪酶基因的cDNA克隆及组织表达 | 第21-33页 |
| 1 材料与方法 | 第21-25页 |
| 1.1 实验用鱼 | 第21页 |
| 1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 1.3 实验试剂与引物 | 第21-22页 |
| 1.4 总RNA提取及cDNA合成 | 第22-23页 |
| 1.5 鲤鱼LPL1、LPL2基因编码区cDNA序列克隆 | 第23页 |
| 1.6 序列分析 | 第23页 |
| 1.7 LPL mRNA组织表达测定 | 第23-24页 |
| 1.8 LPL蛋白含量测定 | 第24页 |
| 1.9 遗传进化分析 | 第24-25页 |
| 2 实验结果 | 第25-31页 |
| 2.1 鲤鱼LPLs基因序列及其结构分析 | 第25-27页 |
| 2.2 遗传进化分析 | 第27-29页 |
| 2.3 组织表达分析 | 第29页 |
| 2.4 LPL蛋白的组织分布 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 原核表达及蛋白纯化 | 第33-43页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 1.1 实验材料及试剂 | 第33页 |
| 1.2 重组质粒LPLs-pEASY-E2的构建及鉴定 | 第33-34页 |
| 1.3 重组质粒LPLs-pEASY-E2的原核表达 | 第34-35页 |
| 1.4 蛋白纯化 | 第35-36页 |
| 1.5 BCA蛋白浓度测定 | 第36页 |
| 2 实验结果 | 第36-40页 |
| 2.1 重组质粒LPLs-pEASY-E2的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2 重组质粒LPLs-pEASY-E2的原核表达 | 第37-38页 |
| 2.3 融合蛋白LPLs的纯化及其鉴定 | 第38-39页 |
| 2.4 BCA蛋白浓度测定 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 第四章 LPLs催化活性测定和分析 | 第43-49页 |
| 1 材料与方法 | 第44-45页 |
| 1.1 实验试剂及仪器 | 第44页 |
| 1.2 p-NPP底物和p-NP标准溶液的的配制 | 第44页 |
| 1.3 p-NP标准曲线的制作 | 第44页 |
| 1.4 LPLs在不同温度下的酶活 | 第44页 |
| 1.5 LPLs在不同pH下的酶活 | 第44-45页 |
| 2 实验结果 | 第45-46页 |
| 2.1 温度对LPL1、LPL2酶活的影响 | 第45页 |
| 2.2 pH对LPL1、LPL2酶活的影响 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 全文总结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 在学期间发表的论文 | 第65页 |
